背景及概述[1]
鹽酸硫胺又叫維生素B1，白色結(jié)晶性粉末。鹽酸硫胺有微弱特臭、味苦，有潮解性。熔點(diǎn)248℃，易溶于水，微溶于乙醇，不溶于醚和苯中。維生素B1具有維持正常糖代謝及神經(jīng)傳導(dǎo)的功能，用于治療腳氣病和中樞神經(jīng)及胃腸病、心臟活動(dòng)失調(diào)等。自然界中以酵母中維生素B1含量最多。鹽酸硫胺可由2-甲基呋喃和乙烯腈等合成或由β-乙氧基丙酸乙酯和甲酸乙酯等合成。
含量測(cè)定[2]
普通小麥中維生素B1含量的測(cè)定方法如下：
一、普通小麥中維生素B1的提取
(1)小麥籽粒收獲后，曬干，采用旋風(fēng)磨制粉(旋風(fēng)式粉碎磨)，充分混勻后將磨好的粉狀樣品(即全麥粉)于-20℃條件下避光保存。
(2)稱取小麥粉2.5g于100ml的藍(lán)蓋試劑瓶中，加入25ml醋酸鈉溶液(0.05M，pH4.5)，蓋緊蓋子，放在混旋器上混合，使粉狀樣品充分濕潤。
(3)將混合后的粉狀樣品分別加入木瓜蛋白酶(50mg)，1％還原型谷胱甘肽水溶液(250μl)，酸性磷酸酶(10mg)，α-淀粉酶(5mg)，每次添加酶后充分混勻。
(4)將混合后的粉狀樣品置于恒溫振蕩器中，180rpm，37℃，酶解18h。
(5)振蕩完成后，放置室溫。轉(zhuǎn)移至50ml的容量瓶中用超純水定容，濾紙過濾。
(6)取2ml次的濾液放入10ml的離心管中，加入2ml堿性鐵氰化鉀溶液，搖勻，靜置5min。
(7)再加2mL正丁醇，用力振蕩，4℃，4400×g離心3min，吸取上層清液，過濾0.2μm的醋酸纖維膜，用于維生素B1的色譜測(cè)定。
二、小麥中維生素B1含量的測(cè)定
(1)依據(jù)如下色譜條件進(jìn)行HPLC檢測(cè)：
儀器：島津LC-2010系統(tǒng)，配備RF10Axl熒光檢測(cè)器；
色譜柱：WatersXTerraRP18(150×4.6mm，5μm)高效液相色譜柱；
流動(dòng)相：甲醇-0.05M醋酸鈉溶液(pH4.5)，體積比為30：70混合；洗脫方式為等度洗脫；
柱溫：35℃；樣品室溫度：4℃；
激發(fā)波長/發(fā)射波長：366nm/435nm；
進(jìn)樣體積：10μl。
(2)測(cè)試數(shù)據(jù)處理：工作站軟件為Labosolutions；
根據(jù)維生素B1標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留時(shí)間確定小麥中維生素B1的出峰時(shí)間，根據(jù)如下步驟分別制作標(biāo)準(zhǔn)樣品中維生素B1濃度和峰面積之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線：
1)配制5種不同濃度的維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品的鹽酸溶液；
2)將維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品的鹽酸溶液進(jìn)行上述小麥中維生素B1的提取方法中的衍生化和所述離心步驟(具體條件相同)，得到的上清液過0.2μm醋酸纖維膜得到維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品溶液；
3)將所述維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行高效液相檢測(cè)，得到不同濃度所述維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積，以峰面積為橫坐標(biāo)，以維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
然后將已測(cè)166份小麥樣品的峰面積數(shù)據(jù)代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得到維生素B1含量。
制劑[3]
CN200810053680.8公開了一種治療家畜消化不良的復(fù)方維生素B1注射液及其制備方法，旨在提供一種治療家畜消化不良，見效快，能緩解患畜身體應(yīng)激反應(yīng)，能標(biāo)本兼治的復(fù)方維生素B1注射液及其工藝簡單，容易實(shí)現(xiàn)的制備方法。該注射液中，每100L注射液的組成為：維生素B11~5kg，鹽酸胃復(fù)安0.1~1kg，亞硫酸氫鈉0.2kg，EDTA-2Na0.01kg，余量的注射用水。本發(fā)明為維生素B1與助消化藥鹽酸胃復(fù)安合用的復(fù)方制劑，維生素B1與鹽酸胃復(fù)安的聯(lián)合使用，對(duì)家畜消化不良治療見效快，有效并高效，能緩解患畜身體應(yīng)激反應(yīng)，并且標(biāo)本兼治。能防止飼料在家畜體內(nèi)異常發(fā)酵，提高治愈率。
參考文獻(xiàn)
[1]中學(xué)教師實(shí)用化學(xué)辭典
[2][中國發(fā)明]CN201710146098.5普通小麥中維生素B1含量的高效液相色譜測(cè)定方法
[3][中國發(fā)明]CN200810053680.8治療家畜消化不良的復(fù)方維生素B1注射液及其制備方法