背景[1-3]
兔抗GSK3 BETA多克隆抗體是一類可以特異性結合GSK3 BETA的多克隆抗體，主要用于檢測GSK3 BETA的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中GSK3 BETA水平。用純化的GSK3 BETA抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入GSK3 BETA，再與HRP標記的GSK3 BETA抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GSK3 BETA呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中GSK3 BETA濃度。
GSK-3β的生物學特性：GSK-3最早在兔骨骼肌的分次提取物中被分離出來，主要有兩種亞型，即GSK-3α和GSK-3β，二者在催化區(qū)域具有98%的同源性，于N-和C-末端略有不同。
糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是一種在進化上非常保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，普遍存在于哺乳動物真核細胞中，除去最早發(fā)現的調控糖原合成酶(GS)的活性外，GSK-3β還能作用于眾多信號蛋白結構蛋白和轉錄因子，調節(jié)細胞的分化、增殖、存活和凋亡.在癌癥神經退行性疾病神經精神類疾病等多種重大疾病的研究中，選擇其作為治療靶點，受到越來越多研究者的重視。
GSK-3β是參與肝糖代謝的關鍵酶，通過磷酸化GS抑制其活性，降低肝糖的合成，使體內血糖濃度升高，在胰島素信號通路中受控于胰島素，參與肝糖的合成代謝。同時，GSK-3β通過影響血液中葡萄糖的濃度，還可調控Bax/HKII的比例，進而影響線粒體滲透性及細胞色素C的釋放，參與細胞凋亡的調控。
應用[4][5]
用于頸部降溫通過PI3K/Akt/GSK-3β信號通路減輕心肺復蘇后兔腦損傷及抑制凋亡的機制研究
研究PI3K/Akt/GSK3β信號通路在頸部降溫的調節(jié)作用，初步探討頸部降溫的腦保護作用是否與PI3K/Akt及GSK3β的磷酸化有關。
方法：健康雄性新西蘭家兔隨機分為5組，采用4min室顫模型。按照復蘇后4、9、24小時不同時間點再分別分成3個亞組
（1）假手術組：常規(guī)手術操作置管，不誘導CA，于術后30分鐘處死取標本。（2）常溫復蘇組（normothermia theat NT組）：常規(guī)致顫復蘇并于4、9、24小時時間點處死動物取標本。
（2）復蘇中降溫組（intra-arresttherapeutic hypothermia IATH組）：于心肺復蘇同時啟動頸部快速降溫，目標腦溫為34℃，以后維持目標腦溫至ROSC后4小時。于4、9、24小時時間點處死動物取標本。
（3）復蘇中降溫+LY294002（LY294002組）：復蘇前20分鐘腦室注射LY294002，余同組3。
（4）復蘇后1小時降溫組（post-arrest therapeutic hypothermia PATH組），于心肺復蘇后1小時啟動頸部快速降溫，目標腦溫為34℃，余同組3。LY294002溶于DMSO稀釋成10μM，在動物腦立體定位儀下在ROSC前20min前給予腦室內注射，其余各組給予溶劑DMSO。動物分別4h、9h、24h過量麻醉處死，采集標本，若復蘇失敗或在相應時間點之前發(fā)生死亡的，該動物的實驗數據不錄用，另外進行補充動物實驗，保證各組5只動物。
應用Western blotting檢測Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β(ser9)、的蛋白表達，運用TUNEL等方法觀察各組組織凋亡變化。結果：與Sham組比較，常溫心肺復蘇組兔腦細胞胞質中的Akt(Thr-308)磷酸化水平（P-AKT）和P-GSK3β在心肺復蘇后4、9、24小時明顯減低，并呈逐步減低趨勢(p<O．05)；
復蘇后即刻頸部降溫組P-AKT和P-GSK3β水平在心肺復蘇后4、9、24小時各時間點均較常溫復蘇組明顯增強(p<O.05)；復蘇后1小時降溫組的蛋白表達水平各時間點也較常溫復蘇組有增強(p<O.05)，但弱于復蘇后即刻頸部降溫組。
參考文獻
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[2]Ultrafast and Whole-Body Cooling With Total Liquid Ventilation Induces Favorable Neurological and Cardiac Outcomes After Cardiac Arrest in Rabbits[J].M.Chenoune,F.Lidouren,C.Adam,S.Pons,L.Darbera,P.Bruneval,B.Ghaleh,R.Zini,J.-L.Dubois-Randé,P.Carli,B.Vivien,J.-D.Ricard,A.Berdeaux,R.Tissier.Circulation.2011(8)
[3]State of the Art in Therapeutic Hypothermia[J].Joshua W.Lampe,Lance B.Becker.Annual Review of Medicine.2011
[4]Intra-Arrest Transnasal Evaporative Cooling:A Randomized,Prehospital,Multicenter Study(PRINCE:Pre-ROSC IntraNasal Cooling Effectiveness)[J].Circulation.2010(7)
[5]張浙.頸部降溫通過PI3K/Akt/GSK-3β信號通路減輕心肺復蘇后兔腦損傷及抑制凋亡的機制研究[D].第二軍醫(yī)大學,2014.