背景[1-3]
兔抗GSK3 BETA多克隆抗體是一類可以特異性結(jié)合GSK3 BETA的多克隆抗體，主要用于檢測(cè)GSK3 BETA的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中GSK3 BETA水平。用純化的GSK3 BETA抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入GSK3 BETA，再與HRP標(biāo)記的GSK3 BETA抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GSK3 BETA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中GSK3 BETA濃度。
GSK-3β是一種在進(jìn)化上非常保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不同于正常細(xì)胞的代謝變化，同時(shí)腫瘤細(xì)胞自身可通過(guò)糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）之間的轉(zhuǎn)換來(lái)適應(yīng)代謝環(huán)境的改變。研究人員發(fā)現(xiàn)在禁食狀態(tài)下使用二甲雙胍可以顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，并提出PP2A-GSK3β-MCL-1通路可能是腫瘤治療的新靶點(diǎn)。
糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是一種在進(jìn)化上非常保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，普遍存在于哺乳動(dòng)物真核細(xì)胞中，除去最早發(fā)現(xiàn)的調(diào)控糖原合成酶(GS)的活性外，GSK-3β還能作用于眾多信號(hào)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白和轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖、存活和凋亡。在癌癥神經(jīng)退行性疾病神經(jīng)精神類疾病等多種重大疾病的研究中，選擇其作為治療靶點(diǎn)，受到越來(lái)越多研究者的重視。
應(yīng)用[4][5]
用于GSK3β促腎小管間質(zhì)纖維化的分子機(jī)制及抗腎纖維化措施探討研究
糖原合成酶激酶3β(glycogen syntheses kinase 3β,GSK3β)具有促纖維化的作用,但是其機(jī)制以及在腎臟纖維化中的作用尚不清楚,探討了GSK3β在腎小管間質(zhì)纖維化中的作用及其機(jī)制。
GSK3β是在1980年做為糖原合成酶抑制分子被發(fā)現(xiàn),隨后發(fā)現(xiàn)其廣泛參與了細(xì)胞增殖、干細(xì)胞更新、凋亡和及發(fā)育的過(guò)程,通過(guò)胰島素、Wnt/β-catenin和Hedgehog等信號(hào)通路發(fā)揮作用,與神經(jīng)系統(tǒng)紊亂、糖尿病和炎癥等疾病和病理過(guò)程有著密切關(guān)系。在腎臟疾病,有報(bào)道發(fā)現(xiàn)GSK3β參與了腎細(xì)胞凋亡和炎癥相關(guān)通路。
研究發(fā)現(xiàn):1、GSK3β在纖維化組織高表達(dá);2、在體外腎小管上皮細(xì)胞纖維化模型中,以特異抑制劑抑制GSK3β活性可以抑制纖維化蛋白的表達(dá);而過(guò)表達(dá)GSK3β可加重腎小管上皮細(xì)胞纖維化,由此證明GSK3β是促腎小管上皮細(xì)胞纖維化的重要因素。
3、進(jìn)一步的機(jī)制探討發(fā)現(xiàn),GSK3β促進(jìn)了TGFβ1誘導(dǎo)的Smad3磷酸化,進(jìn)而促進(jìn)Smad3的入核;抑制GSK3β則可下調(diào)Smad3的活性。GSK3β的這種調(diào)節(jié)作用未見(jiàn)于包括Smad2在內(nèi)的其它Smad分子。
這一結(jié)果解析了GSK3β通過(guò)TGFβ1/Smad3發(fā)揮促腎纖維化(profibrotic)的機(jī)制和GSK3β與TGFβ1-Smad3信號(hào)通路的cross-talk,為防治腎臟小管間質(zhì)纖維化新靶點(diǎn)的篩選提供新的依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
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