背景及概述[1-2]
巖藻多糖(Fucoidin) 是一類含有L-巖藻糖和硫酸基團的水溶性多糖，也稱褐藻多糖硫酸酯、褐藻糖膠，主要來源于褐藻、紅藻和一些海洋無脊椎動物。低分子量巖藻多糖具有抗凝血、抗病毒、抗血栓、抗腫瘤、增強免疫力等活性，被廣泛地應用于醫(yī)藥領域和現(xiàn)代食品工業(yè)。
制備[1]
報道一、
一種酶法提取海藻中巖藻多糖的工藝，其步驟包括：
（1）海藻預處理：將干燥的海藻剪切成適宜大小，然后用粉碎機粉碎成粉末狀，向該海藻粉末中加入7～15倍（重量比）的水，于30～80℃水浴中浸泡2～8 h，使其充分吸水溶脹。
（2）巖藻多糖的提?。合蛏鲜龀浞治苊浀暮Ｔ褰菀褐屑尤霝楹Ｔ逯亓康?.03～1.2%復合纖維素酶，控制pH 3.5～6.0，30～50℃下反應4～15 h；然后加入為海藻重量的0.01～0.8%復合蛋白酶，控制pH 6.5～10，上述溫度下反應2～8 h。反應結束后，離心分離酶解液，殘渣加入少量水充分攪拌、離心，合并兩次酶解液，此酶解液中除含有巖藻多糖外，還包含一定量的海藻酸、蛋白質以及其它雜質。
（3）巖藻多糖的分離純化：上述得到的酶解液先用硫酸調節(jié)pH 2～4.5，將其中的海藻酸類物質沉淀出來，然后加入石灰水，調節(jié)溶液的pH為6～9，過濾，進一步除去海藻酸雜質；澄清濾液在70～85℃經(jīng)雙效濃縮為原體積的1/2～1/4，然后加入1～3倍體積的乙醇，使其中的巖藻多糖沉淀出來，最后經(jīng)多次脫水、烘干得到高純度巖藻多糖產(chǎn)品。
報道二、
一種均一性小分子巖藻多糖的制備方法，所述方法為：(1)粗巖藻多糖提?。簩⒏珊Х叟c溶劑混合，在60-100℃浸提1-5h，將浸提液離心(優(yōu)選5000-10000r/min)，獲得提取液；并將提取液減壓濃縮至1/2-1/15體積(優(yōu)選50℃-70℃減壓濃縮至1/10)，獲得濃縮液；所述溶劑為體積濃度95％乙醇水溶液或去離子水；所述溶劑體積用量以干海帶粉質量計為25-50ml/g(優(yōu)選30ml/g)；然后向濃縮液中加質量濃度1％～4％CaCl2水溶液，攪拌至無沉淀產(chǎn)生(優(yōu)選攪拌4h)，離心，取上清液濃縮至1/2～1/3倍體積后，采用sevage法除蛋白直至水層與sevage溶液層中間未出現(xiàn)白色層，取水層旋轉蒸發(fā)除去殘留的氯仿，用14KDa透析袋于去離子水中透析；取截留液加入無水乙醇至乙醇體積濃度為50％-90％，攪拌，在4℃下靜置過夜，離心，沉淀干燥，得粗巖藻多糖；(2)粗巖藻多糖純化：將粗巖藻多糖用去離子水溶解后，上樣DEAE-52纖維素陰離子交換柱，分別用去離子水，0.3M NaCl水溶液、0.6M NaCl水溶液、0.9M NaCl水溶液、1.5M NaCl水溶液、2.0M NaCl水溶液進行洗脫，分別收集0.9M NaCl水溶液、1.5M NaCl水溶液、2.0M NaCl水溶液對應的三種流出液，分別用14KDa透析袋于去離子水中透析，取截留液凍干(12-24h)，分別獲得三種純化巖藻多糖；(3)小分子巖藻多糖的制備：將步驟(2)獲得的三種純化巖藻多糖用濃度為0.01～0.2mol/L的HCl水溶液制成質量濃度為0.5～5％的巖藻多糖溶液，于30℃-100℃下攪拌水解10min-2h，反應液調pH為7(優(yōu)選用1mol/L的NaOH)后，用3.5KDa透析袋于去離子水中透析24h，取截留液濃縮至1/3體積后，加入體積濃度10～30％H2O2水溶液溶解，再加入體積濃度5～20％氨水調節(jié)pH為8.5，室溫(25-30℃)避光放置30min，離心，上清液用3.5KDa透析袋于去離子水中透析，凍干，分別獲得三種小分子巖藻多糖，所述小分子巖藻多糖分子量均小于10kDa，優(yōu)選5-9kDa。
生物活性[3-4]
吳俊仙等人探討了巖藻多糖抑制炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)的作用及其機制。方法:將小鼠隨機分為實驗組和對照組(每組5只),實驗組給予巖藻多糖灌胃2周,對照組給予飲用水灌胃2周,隨后兩組小鼠均自由飲用溶有葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium salt,DSS)的水溶液,構建IBD小鼠模型。檢測小鼠體重、脾臟重量、結腸長度及重量,HE染色觀察結腸組織病理變化,觀察大便性狀并評分;運用實時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)檢測炎癥因子、趨化因子和緊密連接蛋白的mRNA水平變化。結果:巖藻多糖處理的實驗組小鼠腸炎相關指標顯著優(yōu)于對照組,炎癥程度減弱。結論:巖藻多糖能夠預防和抑制IBD的發(fā)生,為預防和治療IBD提供新方法和依據(jù)。
目前，科學家們在體外和體內的研究已經(jīng)證明了巖藻多糖的抗腫瘤的作用，包括在各種癌癥細胞中抑制生長、轉移、血管生成和誘導細胞凋亡。此外，巖藻多糖還能夠與巨噬細胞作用產(chǎn)生細胞因子和趨化因子增強機體的免疫功能，從而間接抑制腫瘤細胞的生長。巖藻多糖還具有免疫調節(jié)作用，因此在與化療藥物及放療進行聯(lián)合使用時，可緩解化療帶來的副作用。
參考文獻
[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權] CN201310726522.5 一種酶法提取海藻中巖藻多糖的工藝
[2] [中國發(fā)明] CN201811399126.5 一種小分子巖藻多糖的制備方法
[3] 吳俊仙,董昀凡,袁濤,黃宇康,馬嘉政,張娓娓,曹星月,陳允梓.巖藻多糖對炎癥性腸病的作用及其機制[J].南京醫(yī)科大學學報(自然科學版),2019,39(09):1304-1308+1313.
[4]閆洪雪,孫占一,趙麗麗,張鵬鵬,劉翔.巖藻多糖的抗癌活性研究進展[J].食品研究與開發(fā),2018,39(24):197-203.