【培養(yǎng)基成分】
1. 蛋白胨
蛋白胨是用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶 等蛋白質(zhì)水解酶水解酪素、獸肉、大豆蛋白等制成的。主要成分是各種氨基酸、肽類、?等可溶性氮化合物。 因此依所用原料和酶的不同,其組成也有所不同。
由于蛋白胨的質(zhì)量對(duì)微生物生長(zhǎng)、代謝產(chǎn)物產(chǎn)生影響很大, 所" />

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微生物培養(yǎng)基

微生物非常細(xì)小,必須通過培養(yǎng)基才能生長(zhǎng)出來。各種微生物都有它們不同的營(yíng)養(yǎng)特性,也就是需要各種成分不同的培養(yǎng)基,因此,掌握培養(yǎng)基的原理、制法與應(yīng)用是十分重要的,是進(jìn)行微生物研究的基本技能。
【培養(yǎng)基成分】
1. 蛋白胨
蛋白胨是用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶 等蛋白質(zhì)水解酶水解酪素、獸肉、大豆蛋白等制成的。主要成分是各種氨基酸、肽類、?等可溶性氮化合物。 因此依所用原料和酶的不同,其組成也有所不同。
由于蛋白胨的質(zhì)量對(duì)微生物生長(zhǎng)、代謝產(chǎn)物產(chǎn)生影響很大, 所以采用時(shí)應(yīng)注意。但即使同一牌號(hào)的產(chǎn)品也會(huì)因不同批次而質(zhì)量有所差異,所以盡可能使用同批產(chǎn)品。由于蛋白胨易潮解,使用后必須將瓶子密封。
2. 牛肉膏
牛肉膏是牛肉浸出液的濃縮物,肉中的可溶性氮 化合物、維生素等生長(zhǎng)促進(jìn)因子以及無機(jī)鹽都很豐富,廣泛用于細(xì)菌培養(yǎng)。但不同牌號(hào)的商品制法不同,所以應(yīng)使用同一牌號(hào)為好。
3. 酵母膏
酵母膏系啤酒酵母或面包酵母在低溫下的自溶浸出汁,經(jīng)低溫真空蒸發(fā)而成。富含氨基酸、維生素類、無機(jī)鹽類,被廣泛用于微生物的培養(yǎng),近來有用來取代肉膏的趨向。
4. 麥芽汁
麥芽汁是釀造啤酒前,未加酒花,未經(jīng)發(fā)酵的新鮮麥芽汁,可向啤酒廠購(gòu)買,也可自制:取大麥芽粉1kg,加水3L, 保溫60℃使其自行糖化,直到液體無淀粉反應(yīng)為止。過濾,在濾液中加2~3個(gè)雞蛋清(有助于麥汁的澄清); 攪均勻,煮沸,再過濾,則得麥芽汁。加水沖至10~15波林備用。麥芽汁適于培養(yǎng)霉菌和酵母等真菌。主要成分是麥芽糖等,但也有含氮源和生長(zhǎng)素等。
5. 米曲汁
米曲汁被廣泛用來代替麥芽汁。其制法:將米曲霉接種在大米飯上,制成大米曲。取干大米曲1kg,加水3L,保溫60 ℃,使之糖化,至無淀粉反應(yīng)為止。然后與制麥芽汁一樣,澄清、過濾。
6. 瓊脂
瓊脂本由石花菜制成,近來差不多以青絲菜為原 料來制備。瓊脂是一種硫酸化的聚半乳糖。瓊脂含有兩種主要成分:瓊脂糖和瓊脂膠。瓊脂的特點(diǎn)是微生物無毒害,又不為大多數(shù)微生物利用。在加熱到100℃時(shí)融化,涼至45℃時(shí)凝固,所以很適合于做培養(yǎng)基的固化劑。
商品瓊脂規(guī)格因產(chǎn)地不同,常含一些不純物質(zhì),對(duì)一些試驗(yàn)會(huì)產(chǎn)生影響。
【培養(yǎng)基的種類】
根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可將培養(yǎng)基分為三類:
1. 合成培養(yǎng)基:由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例配制而成。
2. 半合成培養(yǎng)基:由一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物質(zhì)配制而成。
3. 天然培養(yǎng)基:利用天然來源的有機(jī)物配制而成的。
從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來分:
1. 液體培養(yǎng)基:不加凝固劑的液態(tài)狀培養(yǎng)基。
2. 固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入2%左右的凝固劑的固體狀培養(yǎng)基或固體狀農(nóng)副產(chǎn)品培養(yǎng)基。
3. 半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入0.2%-0.5%凝固劑而成的半固體狀培養(yǎng)基。
微生物最常用的凝固劑為瓊脂(其次為明膠),又叫洋菜、凍粉。它不是一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),只能被極少數(shù)種類的細(xì)菌分解利用。瓊脂是從海藻中(主要是石花菜)提取而制成的。是一種多糖類化合物,主要成分是復(fù)雜的多糖硫酸酯鈣鹽,瓊脂是一種可逆性膠體,在常規(guī)濃度下加熱到96C以上即成溶膠狀態(tài),融化的瓊脂,當(dāng)溫度下降到42℃以下,又凝固為固體。
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