背景及概述[1]
A,A二苯基Β苦基肼基游離基即DPPH自由基,在特定波長下測定 DPPH 與抗氧化物質(zhì)反應(yīng)前后吸收值的變化可定量測定被測物質(zhì)的抗氧化能力。DPPH 法是測定茶抗氧化性能的一種快速簡便的方法,測定條件掌握得當(dāng),可以獲得較好的測定穩(wěn)定性。取 DPPH 乙醇溶液 (5.0×10-5 mol·L-1)) 6mL 與稀釋 10 倍的茶湯200μL,混勻在 25℃下反應(yīng) 120 min 后取出即放入冰水浴中靜置后于波長 517 nm 下測定,測定結(jié)果穩(wěn)定。
方法[1]
1.茶提取液的制備
茶葉按 GB/T8303-2002 制成磨碎樣。稱取磨碎茶樣 1.0g(精確到 0.0001g),以 1:50(m/v)沸水提取 45min,其間每隔 15min 搖瓶一次,趁熱抽濾,濾液冷后用去離子水定容至 200mL 后,備用。
2. 測定
取一定量 5.0×10-5 mol·L-1 的 DPPH 乙醇溶液與不同體積的去離子水混合后,在紫外可見分光光度計上進行光譜掃描,確定吸收波長。取 6 mL 5.0×10-5 mol·L-1 的 DPPH 乙醇溶液與一定量茶提取液于試管中混勻后測定其吸光值的變化,按下式計算 DPPH 清除率:DPPH 清除率(%)=[(A0-A1)/A0×100%
注:A0 為未加樣品的空白對照吸光值;A1 為加入樣品反應(yīng)后的吸光值
參考文獻
[1] 涂云飛,毛志方,周衛(wèi)龍,黃皓.2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)法測定茶抗氧化性能條件的研究[J].中國茶葉加工,2008(03):39-41.