人纖維蛋白原(Fgrinogen，F(xiàn)g)是血漿中最早分離出來的一種蛋白質(zhì)，由肝臟合成。是大分子的可溶性糖蛋白，分子量330 000～340 000，等電點5.5，沉降常數(shù)7.7～7.9。其分子為一個二聚體，呈長條狀，長度50～60nm，含有三對多肽鏈(Aα2、Bβ2、γ2)，由二硫鍵連接。三條多肽鏈分別由三條獨立mRNA 轉(zhuǎn)錄，這三條基因相連成簇，均為不連續(xù)單一拷貝基因，它們共同位于第4 號染色體長臂q23～q32不到50kb 的核苷酸上。纖維蛋白原共含有19種氨基酸，其中天門冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸含量較多，各占分子量的13.1%和14.5%。纖維蛋白原在溶液中帶負電荷，一旦失去這些酸性基團，則有利于聚合。大量的文獻表明，纖維蛋白原水平的變化不僅與凝血障礙、出血性疾病、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)、應激等有關，而且與冠心病(CHD)、心肌梗死(AMI)、腦血管病等有關，因而纖維蛋白原研究倍受關注。

Fg蛋白結構

纖維蛋白原是一種含2964個氨基酸的大分子糖蛋白，相對分子質(zhì)量為340×103，首先在肝細胞中合成，由兩個相同的組分(Aα，Ββ，γ)2組成六聚體，鏈間以二硫鍵相連。Aα，Ββ，γ三條多肽鏈借助AαCys28、γCys8和Cys9構成對稱性二聚體。單體中AαCys36與另一單體ΒβCys65組成的二硫鍵對形成二聚體分子也起到關鍵作用。Aα、Ββ、γ三條多肽鏈相對分子質(zhì)量分別為66 ×103、52 ×103 和46 ×103，并分別由610個、461個和411個氨基酸殘基組成。三條鏈在肝臟由獨立的多核糖體合成其前體蛋白(分別包括19、30、26個信號肽)，在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)將信號肽切除、疏水反應及二硫鍵形成等加工后，折疊、裝配成成熟的二聚體分子，最后經(jīng)糖基化、部分磷酸化分泌到胞外。 

在成熟的纖維蛋白原二聚體分子中，中央?yún)^(qū)(E區(qū))由6條多肽鏈的氨基端組成，形成二硫鍵結;兩個外圍區(qū)(D區(qū))由Ββ和γ鏈的羧基端組成，而Aα鏈的羧基端折回參與E區(qū)結構。E區(qū)和D區(qū)之間由帶狀結構(coiled-coil)相連，coiled-coil區(qū)為Aα、Ββ、γ三鏈形成的α-螺旋結構，大約由110個氨基酸殘基組成，coiled-coil區(qū)兩端的二硫鍵對纖維蛋白原分子成熟二聚體結構的形成至關重要。coiled-coil區(qū)近氨基端部分的缺失對雜聚體和半分子的形成幾乎沒有影響，但會阻止半分子形成成熟的六鏈分子;相反此區(qū)遠氨基端部分的缺失則會完全終止裝配過程。用幼鼠腎細胞株(BHK)轉(zhuǎn)染實驗顯示，纖維蛋白原的起始裝配包括αγ和βγ雜聚體的形成，但不包括αβ雜聚體，第三條鏈的加入導致半分子αβγ的形成，而后二聚化形成成熟的六鏈的纖維蛋白原，參與血液循環(huán)。
 
纖維蛋白原分子中，有多個配體的結合位點，研究較多的是凝血酶作用位點和血小板糖蛋白IIb/IIIa的結合位點。凝血酶的裂解位點在Aα-16和Ββ-14作用后分別釋放出纖維蛋白肽A和B，并同時分別形成纖維蛋白單體Ⅰ和Ⅱ。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)g中有多個糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的結合序列，主要是α95～97、α572～574的RGD序列和γ400～411附近的10～15個氨基酸殘基;并且兩個多肽會相互抑制，說明兩者在糖蛋白上的結合位點可能相同，也或是前者結合后導致糖蛋白構型的改變，而阻止另一種多肽的再次結合。其中γ400～411是血小板聚集的關鍵，α鏈的RGD序列則不是必需的。由于Fg的3條多肽鏈是獨立合成的，在成熟之前要經(jīng)過加工和裝配;每條多肽鏈的部分氨基酸的改變都可能影響這些過程，使3條多肽鏈不能裝配成完整的Fg 分子。除了前述的二硫鍵的重要作用外，β 鏈的合成是裝配的限速步驟，特別是Ββ73～93之間是裝配所必需的;γ鏈的羧基末端氨基酸143～411，特別是γ387 也是關鍵。 

FG在血管疾病中的意義

FG為重要的凝血因子，越來越多的研究表明高纖維蛋白原水平導致高凝狀態(tài)，誘發(fā)血管疾病造成缺血性損傷。國外學者提出腦梗死發(fā)生之前降低FG水平，減少血栓形成的前體物質(zhì)，阻斷異常凝血過程，降低腦梗死的發(fā)生率。Knuiman等研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)G 水平增高與腦梗死有密切的關系，并且FG的水平直接影響到卒中的嚴重程度，在12%的不可逆型、16%的進展型、85%的完全卒中型，F(xiàn)G 水平>4g/L。 
 

FG在腫瘤疾病中的意義

血漿FG分解形成纖維蛋白，為癌細胞的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移提供支架，F(xiàn)G亦可以作為不同的黏附分子的配體，增加PLT及腫瘤細胞間的黏附結合，促進腫瘤細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，PLT附著腫瘤細胞的表面，形成瘤栓阻礙免疫細胞攻擊腫瘤細胞;鱗狀細胞癌能刺激肝細胞產(chǎn)生大量的FG;惡性腫瘤與凝血功能的改變有密切的關系，腫瘤細胞通過組織因子或其他促凝因子激活FG，為腫瘤細胞轉(zhuǎn)移提供有利的條件，因此FG對腫瘤細胞的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移具有重要的價值。

FG在糖尿病中的意義

大量研究表明，糖尿病患者體內(nèi)存在凝血、纖溶功能及血小板活性異常，呈血液高凝狀態(tài)，患者血漿FG水平會明顯升高。主要原因可能有:血液中纖溶活性的調(diào)節(jié)主要取決于內(nèi)皮細胞分泌纖溶酶原激活物(t-PA)與纖溶酶原激活物抑制劑(PAI-1)的相對比例，血小板α顆粒中富含PAI-1，而且3/4儲存于血小板中，抑制纖溶酶原激活劑的活性，使血漿中纖維蛋白濃度增高。此外，血漿中的一些脂蛋白與纖溶酶原激活劑競爭結合FG，從而抑制纖溶酶的活性，F(xiàn)G 水平增高。

FG在其他疾病中的意義

FG是肝臟合成的重要凝血因子，嚴重的肝臟疾病尤其是慢性乙肝患者，其肝功能嚴重受損，F(xiàn)G 合成量下降，因此FG的水平有助于準確判斷肝病的病情、評估預后、指導治療。當機體發(fā)生炎癥時，血液處于高凝狀態(tài)，部分凝血指標會明顯升高，其中FG主要通過白細胞表面的受體與白細胞相互作用而參與炎癥過程。因此在治療過程中適當降低FG的水平對控制病情是有益的。

纖維蛋白原水平測定

血漿中纖維蛋白原生理含量為2.0～4.0g/L，該水平具有生理和病理雙重作用。一方面保證在凝血最后一步，有足量的纖維蛋白原聚合成不可溶性纖維蛋白，另一方面又影響了血漿和血液粘滯度。纖維蛋白原水平受外傷、炎癥、妊娠、肥胖、吸煙等影響，也受遺傳因素影響。并隨著年齡的增長呈進行性增高。  

纖維蛋白原水平的測定也有助于缺血性心血管疾病的危險度判斷。目前纖維蛋白原測定方法頗多，大體有三類，類功能測定法，即在血漿中加入凝血酶后測定所形成的纖維蛋白量或凝固時間。該類方法中Jocobsson 法為世界衛(wèi)生組織(WHO)和美國國家臨床檢驗標準委員會(NIBCC)推薦的參考方法，von Clauss 法為國外常規(guī)方法。該類方法測定的是有凝血功能的纖維蛋白原，因此最能直接反映血漿中具有凝血功能纖維蛋白原水平，所以特異性好;第二類物理化學法，主要通過鹽析沉淀、熱變性沉淀、電泳等測定纖維蛋白原，該類方法多數(shù)比較簡單、快速，但是特異性不高，所測定纖維蛋白原不僅包括可凝固纖維蛋白原，而且含有異常纖維蛋白原(無凝固功能)和纖維蛋白降解產(chǎn)物和/或其它蛋白，其中有的方法精密度差，影響因素多;第三類免疫測定法，用抗纖維蛋白原多克隆抗體或單克隆抗體測定纖維蛋白原，該類方法大部分比較簡單，缺點是因與纖維蛋白降解產(chǎn)物和異常纖維蛋白有共同抗原，而特異性不高。

纖維蛋白原亞組份測定

血漿纖維蛋白原亞組份測定自70年代已受到臨床的重視。由于纖維蛋白原分子Aα鏈的異質(zhì)性，血漿纖維蛋白原可被十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分為高分子組份纖維蛋白原(HMW、MW340 000)、低分子組份纖維蛋白原(LMW、MW300 000)和低分子′組份纖維蛋白原(LMW′、MW280 000)。一般認為，HMW 是纖維蛋白原的主要成分，而LMW 和LMW′是其降解產(chǎn)物，HMW 較LMW 和LMW′易凝固、易聚合和不易溶解于水。這種差異的生理意義在于外傷、應激時HMW 的增加，有利于機體保護。但病理狀態(tài)時，如DIC等早期，當纖維蛋白原總量尚未改變，HMW/LMW 可能已有變化，可提示血液有高凝傾向;而AMI 早期是因為HMW 合成增加使纖維蛋白原明顯升高，所以HMW 增高可作為早期診斷AMI 的指標;但CHD 中則是以LMW 增高為主，因此LMW在CHD 發(fā)病中起關鍵性作用;另外在某些血栓病中存在有HMW明顯高于LMW 現(xiàn)象。通過123 例1～93 歲健康人纖維蛋白原亞組份分析可知，人群中有隨年齡增加血漿HMW 水平逐漸下降，而LMW 水平逐漸升高的傾向。這與CHD 發(fā)病率隨年齡增高而升高趨勢有一致性，表明纖維蛋白原亞組份的改變可能與CHD 的發(fā)生、發(fā)展有一定的病理聯(lián)系，因此纖維蛋白原亞組份的測定具有重要的臨床意義。
 
纖維蛋白原亞組份測定方法有兩類，一類SDS-PAGE 法，其中Mills D 方法可直接用血漿進行電泳;Holm 方法需將血漿中纖維蛋白原形成纖維蛋白凝塊，再用尿素溶解凝塊后進行電泳。前者由于血漿中其它蛋白干擾，結果不穩(wěn)定，后者可排除其它蛋白干擾，能反映有凝血功能的纖維蛋白原，并且電泳所得條帶清晰，容易分辨，結果穩(wěn)定，不僅能反映血漿中纖維蛋白原三個組份的比例，同時還能觀察到五條弱亞組份。該類方法的參考值:HMW69.7 ±5.1 %，LMW26.5±4.8 %，LMW′3.8 ±1.8 %。第二類是利用不同的離子強度的甘氨酸溶液將總纖維蛋白原和HMW 分別沉淀，然后計算LMW。常用的是Sasaki 法，該類方法受到纖維蛋白降解產(chǎn)物或其它蛋白的影響，特異性較差。

纖維蛋白單體聚合功能測定

纖維蛋白原被凝血酶作用形成纖維蛋白單體，繼而發(fā)生聚合反應形成凝塊。觀察纖維蛋白單體聚合速率(FMPV)不僅能了解纖維蛋白原分子對凝血酶的反應性，且異常時有臨床價值。FMPV 降低可能與纖維蛋白原結構異常有關。測定時可用凝血酶、爬蟲酶或蘄蛇毒使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體。用凝血酶更符合生理狀況，但需要在純體系內(nèi)進行，而用爬蟲酶或蘄蛇毒可避免血漿蛋白抑制酶、肝素和纖維蛋白原或纖維蛋白降解產(chǎn)物的影響，并可直接用0.515 ±0.154，A:0.136 ±0.030，F(xiàn)MPV/A:3.579±0.256。
 
纖維蛋白原作為急性時相蛋白和缺血性心腦血管病的危險因素的理論已被普遍接受,纖維蛋白原水平、亞組份、功能、基因多態(tài)性的研究和應用不僅為出、凝血性疾病, 而且為心腦血管疾病的防治提供一定的理論依據(jù)。