背景[1-3]
MMO-MUG培養(yǎng)基主要用于生活飲用水及其水源水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的同時(shí)檢測(cè)。目前我國(guó)對(duì)生活飲用水、水源水、地表水等進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià),檢測(cè)的指標(biāo)為大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群(耐熱大腸菌群),以這些指標(biāo)作為糞便污染的指示菌。固定底物技術(shù)酶底物法是比較快速簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法,該方法使用的培養(yǎng)基為MMO-MUG培養(yǎng)基。
原理:固定底物技術(shù)酶底物法采用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG使培養(yǎng)液呈黃色,以及大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來(lái)判斷水樣中是否含有大腸菌群及大腸埃希氏菌。
方法步驟:
1、定性試驗(yàn):用100ml的無(wú)菌稀釋瓶量取100ml水樣,加入本品2.7±0.5克,混搖均勻使其完全溶解,放入36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。
2、10管法。
3、51孔定量盤(pán)法。
結(jié)果:若水樣顏色變成黃色,則表示該水樣含有總大腸菌群。若培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光,則表示該水樣含有大腸埃希氏菌。
應(yīng)用[4][5]
用于水中大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè)方法的比較
比較多管發(fā)酵法(包括乳糖蛋白胨和EC-MUG培養(yǎng)基)與酶底物法(MMO-MUG培養(yǎng)基)測(cè)定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,為日常水質(zhì)檢測(cè)大腸菌群和大腸埃希氏菌選用一種檢測(cè)方法。方法依照《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB5750-2006中的多管發(fā)酵法與酶底物法測(cè)定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,進(jìn)行方法的適用性試驗(yàn)、靈敏度試驗(yàn)、水樣加標(biāo)試驗(yàn)及實(shí)際水樣品檢測(cè)應(yīng)用。
結(jié)果適用性試驗(yàn)結(jié)果為多管發(fā)酵法與酶底物法檢測(cè)結(jié)果顯示有某些菌株的差別;靈敏度試驗(yàn)酶底物法約為1 cfu/100 mL,多管發(fā)酵法約為1 cfu/100m;加標(biāo)試驗(yàn)結(jié)果三種培養(yǎng)基法無(wú)明顯差別;水樣品檢測(cè)兩種方法的結(jié)果差別無(wú)顯著性。結(jié)論多管發(fā)酵法與酶底物法檢測(cè)水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的結(jié)果差別無(wú)顯著性,但酶底物法只需一種培養(yǎng)基在24h內(nèi)同時(shí)檢出大腸菌群和大腸埃希氏菌結(jié)果,操作更為方便、時(shí)間可節(jié)約24 h~48 h、結(jié)果觀察直觀容易。
參考文獻(xiàn)
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[2]Microbial ecology of the human large intestine.Conway,PL,Gibson,GR,Macfarlane,GT.Human Colonic Bacteria:Role in Nutrition,Physiology,and Pathology.1995
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[4]三種方法檢測(cè)水中總大腸菌群的比較探討[J].關(guān)麗梅,鐘寧.福建分析測(cè)試.2009(01)
[5]袁月明,俞慕華,袁夢(mèng).水中大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè)方法的比較[J].河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,20(03):185-186+216.