背景及概述^[1]

香菇(Lentinusedodes)，是側(cè)耳科(Pleurotaccae)香菇屬的擔子菌，它含有多種有效藥用組分，幾千年來，香菇早已經(jīng)被作為豐富的藥用來源，治療各種疾病。近年來研究表明香菇的提取物有抗病毒、抗細菌、抗腫瘤以及調(diào)節(jié)免疫功能等多項生物功能。我實驗室從香菇C91-3菌絲體發(fā)酵液中提取的蛋白LFP91-3就已在抗多種腫瘤細胞的實驗中取得了良好的結(jié)果。國內(nèi)外學者己經(jīng)將其作為生物調(diào)節(jié)劑應用于臨床。

應用^[1-2]

1. 香菇提取物的抗病毒作用

近年來，國內(nèi)研究人員對香菇提取物的抗病毒特性進行了大量研究，研究表明：香菇提取物抗病毒療效好、幾乎沒有毒副作用、是值得臨床推廣的天然藥物。觀察到香菇提取物對單純皰疹病毒(herpessimplexvirus，HSV)有明顯的抑制作用，實驗以HSV-1和HSV-2在人羊膜細胞上增殖為模型，分別以組織細胞培養(yǎng)法對香菇多糖抑制單純皰疹病毒的藥效學進行探討。結(jié)果表明：香菇多糖對HSV-1和HSV-2兩型病毒感染的細胞都有明顯的保護作用，能抑制延緩細胞病變的發(fā)生，對病毒感染細胞的保護率最高可達89.4%，并且沒有明顯的毒副作用。香菇提取物對流感病毒也有同樣的作用，其對病毒感染細胞的保護率可達95.6%。實驗表明，香菇提取物對柯薩奇B組病毒具有一定的預防作用，它能夠影響柯薩奇B組病毒的吸附和穿入的某些環(huán)節(jié)，使細胞得到一定的保護。用拉米夫定和香菇提取物聯(lián)合應用治療慢性乙型病毒性肝炎，結(jié)果觀察組血清乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸陰轉(zhuǎn)率與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(94%對89%，P>0.05)，HBeAg陰轉(zhuǎn)率顯著高于對照組(56%對22%，P<0.01)，肝功能的復常率亦顯著高于對照組(99%對84%，P<0.01)，未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應。故得出結(jié)論香菇多糖可以輔助治療乙肝病毒，且安全性好。從以上研究成果可以看到：香菇提取物的抗病毒作用機制可能在于其提高感染細胞的免疫力，增加細胞膜的穩(wěn)定性，抑制細胞病變，促進細胞修復等功能。因此，香菇提取物表現(xiàn)出較強的抗病毒作用，是一種有待開發(fā)的抗病毒類保健藥物。

2. 香菇提取物的抗細菌作用

香菇提取物對枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和釀酒酵母均有一定抑制作用，抑菌效果隨提取物濃度的增大而顯著提高。在腫瘤內(nèi)科臨床中發(fā)現(xiàn)，較長時間使用香菇多糖靜脈滴注的患者較少發(fā)生感染性疾病。一部分己經(jīng)發(fā)生感染的患者，在規(guī)范化使用抗菌素的同時聯(lián)合香菇多糖感染更易控制。提示香菇多糖與其他中藥一樣，具有一定抗細菌作用。實驗發(fā)現(xiàn)香菇提取物能顯著抑制小鼠耳腫脹、拮抗小鼠足拓腫脹和肉芽組織增生。即通過對香菇提取物對實驗動物急、慢性炎癥的影響初步證明其的確具有一定的抗炎作用。香菇多糖的這種抗細菌作用，可能與其活化T細胞、增強巨噬細胞的吞噬能力有關(guān)。但目前這方面的研究尚少，對其抗菌機制還需要更深入的研究。

3.香菇提取物的抗腫瘤作用

日本學者已于20世紀80年代開始將香菇提取物作為生物反應調(diào)節(jié)劑應用于臨床。國內(nèi)也于20世紀90年代起開始在臨床上大量應用其治療惡性腫瘤。當前許多研究者將香菇提取物廣泛應用在抗腫瘤的輔助化療。觀察香菇多糖聯(lián)合奧沙利鉑及替加氟治療老年晚期胃癌的療效和毒性，112例老年晚期胃癌隨機分為2組，治療組采用香菇多糖聯(lián)合奧沙利鉑及替加氟治療，對照組采用奧沙利鉑及替加氟治療。結(jié)果治療組與對照組的緩解率分別為58.9%(33/56)和41.1%(23/56)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.17，P<0.05)；CBR2組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。證明香菇多糖聯(lián)合奧沙利鉑及替加氟治療晚期胃癌有效率高，毒性反應小，老年患者可耐受，值得臨床推廣。

4.香菇提取物的免疫調(diào)節(jié)作用

香菇中最早的提取物香菇多糖于1969年最先由日本學者CHIHARA等從香菇實體中提取，1986年作為免疫調(diào)節(jié)制劑獲日木厚生省批準生產(chǎn)并外銷，1988年我國衛(wèi)生部批準引進，現(xiàn)今我國已有幾家國產(chǎn)香菇多糖免疫調(diào)節(jié)制劑。香菇提取物作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，它的作用類似于宿主免疫增強劑，能夠刺激免疫細胞的成熟、分化和增殖，改善宿主個體平衡，達到恢復或提高宿主細胞對淋巴因子、激索及其它生物活性因子的反應性作用。試驗證實：香菇多糖實驗組脾細胞懸液CD4+/CD8+比值完全倒置，使荷瘤小鼠脾指數(shù)增加，具有恢復和保護脾功能的作用；能改善骨髓造血機能，使外周血淋巴細胞數(shù)量顯著增加，增強機體免疫功能；能影響荷瘤機體T細胞亞群的比例，具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用。用香菇多糖對體外小鼠脾淋巴細胞的進行刺激，發(fā)現(xiàn)其能在初期就激活小鼠脾T/B淋巴細胞TLR4、TLR9的表達，從而改善機體的免疫力。研究還表明在對約氏瘧原蟲感染BALB/c小鼠Th1型應答的調(diào)節(jié)作用中，香菇提取物用藥組顯著降低科感染小鼠的原蟲血癥水平，提高生存率；明顯增強Th1型免疫應答中關(guān)鍵細胞因子IL-12、IFN-γ的分泌水平，并提高NO含量；有效激發(fā)約氏瘧原蟲感染的BALB/c小鼠Th1型細胞免疫應答的建立?？傮w來說，香菇提取物的免疫調(diào)節(jié)作用是通過其對T淋巴細胞、B淋巴細胞、細胞因子和補體系統(tǒng)的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)的。

5.香菇提取物的臨床應用

近年來，從香菇及其提取物中提取有效成分的研究日益得到人們的重視，其抗腫瘤、抗病毒、抗細菌的活性也在實驗室得到證實。其以不良反應少、療效顯著等優(yōu)點在多項臨床治療方面有獨到之處，正逐步從實驗室走向臨床應用。在肺癌治療中，對38例未經(jīng)手術(shù)的肺癌患者化療并用香菇多糖，發(fā)現(xiàn)服用香菇多糖組NK細胞活性提高，與對照組比差異有統(tǒng)計學意義。將香菇提取物用于輔助治療44例惡性血液病患者，結(jié)果患者的CD4、CD4/CDR和NK細胞活性明顯提高。對40例惡性腫瘤患者化療并用香菇多糖輔助治療，結(jié)果表明：患者的NK細胞活性均有上升趨勢，而單化療組化療后NK細胞活性均低于化療前，在肺癌患者中下降尤為明顯。在消化道癌治療過程，林清等將香菇提取物聯(lián)合應用治療晚期消化道癌，結(jié)果聯(lián)合用藥組的生存質(zhì)量改善，生存期延長，并且無明顯的不良反應。觀察香菇提取物聯(lián)合化療綜合治療晚期胃癌的療效和毒性，也取得了良好的效果，總有效率為51%，1年、2年生存率分別為56.1%和22.8%。

綜上所述，香菇提取物在抗腫瘤方面的臨床應用較多，但其他方面，如抗病毒、抗細菌的研究，還僅局限在實驗室中，其臨床應用也是香菇提取物未來發(fā)展的方向之一。

制備^[3]

一種生物酶解香菇提取物及其制備方法包括：

步驟一，原料預處理：按重量份選取香菇粉12～18份，水120～180份，將香菇粉和水投入到反應釜中，攪拌均勻得到香菇液；

步驟二，一次酶解：將纖維素酶、果膠酶、復合酶加入到步驟(1)中，調(diào)節(jié)PH＝6～8，升溫至45～55℃，反應時間為2～3h，然后升溫至95～100℃，保持10-20min，使酶失去活性，酶解過程及滅酶過程保持攪拌狀態(tài)，酶解后冷卻至常溫，得水解液；

步驟三，二次酶解：將5’-磷酸二酯酶加入到步驟(2)中，調(diào)節(jié)PH＝4～5，升溫至50～60℃，反應時間為1.5～2.5h，然后升溫至95～100℃，保持10～20min，滅酶，酶解過程及滅酶過程保持攪拌狀態(tài)，酶解后冷卻至常溫，過60～80目篩網(wǎng)或者離心分離得酶解液；

步驟四，調(diào)配：將多酶酶解香菇提取液、β-環(huán)狀糊精、食用鹽混合均勻；

步驟五，干燥：將步驟(4)中的混合物料進行噴霧干燥，得到香菇提取物。

主要參考資料

[1] 香菇提取物的生物作用概述

[2] 生物酶法制備香菇提取物的工藝研究

[3] CN201810771418.0一種生物酶解香菇提取物及其制備方法