背景及概述^[1][3]

近年來，大豆異黃酮(soybeanisoflavones，SI)生物學作用引起高度重視。研究發(fā)現(xiàn)，以大豆素(daidzein，Dai)和染科木黃酮(genistein，Gen)為主要成分的大豆異黃酮，具有非常廣泛的生物學特性，如雌激素樣作用、抗氧化、調(diào)節(jié)細胞周期等，可以預(yù)防多種嚴重困擾人類健康的疾病，包括骨質(zhì)疏松癥、阿爾茲海默病(AD)、動脈硬化，以及乳腺癌、前列腺癌等。雌馬酚具有更高的抗氧化活性和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)親和力。已有文獻表明，雌馬酚通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，緩解載脂蛋白 E 缺陷小鼠的動脈粥樣硬化。

制備^[1]

1)化合物(B)的制備

于洗凈干燥的1000ml反應(yīng)瓶中投入50g(0.1968mol)大豆苷元、300g1，2- 二氯乙烷、95g(0.9314mol)醋酐以及12g濃硫酸。投畢，升溫至60℃反應(yīng)4h， 反應(yīng)完畢，減壓回收1，2-二氯乙烷，回收完畢，將剩余物反加至冰水混合液中， 析出大量結(jié)晶，過濾，干燥，得類白色固體55g。即為化合物(B)。收率：82.66％ (以化合物A計算)。熔點：187.2-187.4℃，ESI(M/Z)：338.

2)化合物(C)的制備

于洗凈干燥的500ml高壓釜中投入6g5％Pd/C、200gN，N-二甲基甲酰胺， 2g(0.0196mol)醋酐以及20g(0.0592mol)化合物(B)，投畢，密封高壓釜， 開動攪拌，經(jīng)氮氣換氣后，充H2至10-20atm，于25℃，25atmH2壓力下攪拌 反應(yīng)8h。反應(yīng)完畢，緩慢放出殘余H2，將釜內(nèi)物料過濾，濾液減壓蒸出N，N- 二甲基甲酰胺，剩余物中加入200g蒸餾水攪拌，析出結(jié)晶，過濾，干燥得白 色固體料15g。即為化合物(C)。收率：74.12％(以化合物B計算)。熔點： 152.6-154.4℃，ESI(M/Z)：342.

3)化合物(D)的制備

于洗凈干燥的1000ml反應(yīng)瓶中，投入438.5g甲醇、14g(0.1707mol)無水 乙酸鈉、50g(0.1462mol)化合物(C)。投畢，升溫至62℃回流反應(yīng)3h，反應(yīng) 完畢，常壓回收甲醇，回收完畢，向反應(yīng)瓶中加入100g蒸餾水攪拌，析出大量 結(jié)晶，過濾，干燥，得白色固體料28g。即為化合物(D)。收率：79.80％(以 化合物C計算)。熔點：205.9-206.2℃，ESI(M/Z)：240.

4)化合物(E)的制備

于洗凈干燥的500ml高壓釜中投入4.4g5％Pd/C、224g甲醇、56g二氯甲烷 和28g(0.1167mol)化合物(D)。投畢，密封高壓釜，開動攪拌，經(jīng)氮氣換氣后， 充H2壓力值15atm，于20℃反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢，緩慢放出殘余H2，釜內(nèi)物料 過濾，濾液回收溶劑，剩余物中加入適量蒸餾水，析出大量結(jié)晶，過濾，干燥， 得白色固體料20g。即為化合物(E)。收率：70.84％(以化合物D計算)。熔點： 155.0-156.1℃，ESI(M/Z)：242.

藥理研究^[2-3]

楊志平等人體外研究了雌馬酚和順鉑聯(lián)合作用對人胃癌細胞增殖和細胞凋亡的影響及其作用機制。方法：不同濃度的雌馬酚和順鉑單獨或聯(lián)合作用于人胃癌MGC-803細胞。MTS法檢測細胞存活率;AnnexinV/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;Western blotting法檢測P-gp蛋白的表達。結(jié)果：雌馬酚與順鉑聯(lián)合作用組相對于順鉑單獨處理組顯示更強的抗增殖和促凋亡作用，并且二者聯(lián)合具有協(xié)同抗腫瘤作用。雌馬酚能夠抑制順鉑引起的P-gp蛋白的增高。結(jié)論：雌馬酚聯(lián)合順鉑能夠協(xié)同抑制人胃癌細胞的增殖和促進細胞凋亡，這可能與其抑制P-gp蛋白的表達有關(guān)。該研究為改善胃癌細胞對順鉑的敏感性提供新的治療思路，并需更進一步的研究。

白跳等人探討了雌馬酚對糖尿病心肌病大鼠心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和細胞凋亡的影響。方法： 24只8周齡雄性Wistar大鼠隨機分為對照組，糖尿病組和雌馬酚組，每組8只。對照組喂以普通飼料，糖尿病組和雌馬酚組大鼠喂以高糖高脂飼料。飼養(yǎng)第56天(第8周)，糖尿病組及雌馬酚組大鼠分別腹腔注射鏈尿佐菌素45 mg/kg一次，制備糖尿病模型。此后，雌馬酚組大鼠改為食用含0.1%雌馬酚的高糖高脂飼料，糖尿病組和對照組大鼠繼續(xù)飼喂原方案飼料。鏈尿佐菌素注射后第12周，測定體質(zhì)量、血清甘油三酯和總膽固醇水平及空腹血糖，用Western blot蛋白檢測法測定心肌GRP78、CHOP、ATF-6、活化caspase-3、Bax及Bcl-2表達水平。

結(jié)果與對照組比較，糖尿病組大鼠體質(zhì)量顯著下降，血清總膽固醇、空腹血糖水平明顯升高(P<0.05)，血漿LDH、CK-MB、AST水平增高(P<0.05)，心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)指標GRP78、CHOP、ATF-6顯著升高(P<0.05)，且活化caspase-3蛋白和促凋亡蛋白Bax顯著增高，抗凋亡蛋白Bcl-2減少(P<0.05)。與糖尿病組比較，雌馬酚組大鼠體質(zhì)量增加，血清總膽固醇、空腹血糖水平明顯降低(P<0.05)，血漿心肌酶LDH、CK-MB、AST水平減少(P<0.05)，心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)指標GRP78、CHOP、ATF-6顯著減少(P<0.05)，且活化caspase-3蛋白和促凋亡蛋白Bax表達減少，抗凋亡蛋白Bcl-2表達增多(P<0.05)。結(jié)論：雌馬酚可減輕糖尿病大鼠心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及細胞凋亡。

主要參考資料

[1] CN201410810612.7 一種雌馬酚的合成方法

[2] 楊志平，李駿，姚亞紅，楊雪帆.雌馬酚通過抑制P-gp蛋白增強順鉑抗胃癌細胞增殖[J].營養(yǎng)學報，2019，41(01):81-84.

[3] 白跳，遲麗屹，高宇勤，胡小菁.雌馬酚對糖尿病大鼠心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和細胞凋亡的影響[J].山西醫(yī)科大學學報，2018，49(08):886-889.