簡述
4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷又名對硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷,是α-葡萄糖苷酶的顯色底物,可用于測量α-葡萄糖苷酶活性[1-2]。體外研究發(fā)現(xiàn),4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷可以通過酶促裂解釋放對硝基苯酚。以葡萄糖為原料,經(jīng)乙?;s合,分離,脫乙酰化4步反應(yīng)可以合成了目標產(chǎn)物4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷,常溫常壓下表現(xiàn)為白色至灰白色粉末[3]。
理化性質(zhì)
密度 1.6±0.1 g/cm3
沸點 582.2±50.0℃ at 760 mmHg
熔點 210-216℃
分析測定
實驗建立高效液相色譜法測定4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量,具體參數(shù)如下:
色譜柱:Hypersil C18色譜柱(250 mm×4.6mm,5μm)
流動相:甲醇-水(759:25)
流速:為0.8 mL·min-1
紫外檢測器:檢測波長303 nm
柱溫:35℃
結(jié)果發(fā)現(xiàn),4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的濃度在13.5~135.0μg·mL-1的范圍內(nèi),峰面積與濃度呈良好線性 (r=0.9999),平均回收率為99.7%(n=6)。上述方法簡便,快速,準確,可用于4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量測定[4]。
有關(guān)研究
以裂葉蕁麻為原料,用70%乙醇對其進行提取,以醇提物為研究對象,測定其黃酮含量。以抗環(huán)血酸(VC)為陽性對照,通過測定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率,羥基自由基(·OH)清除率及總還原力來評價裂葉蕁麻醇提物體外抗氧化能力。以4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷(4-Nitrophenylα-D-glucopyranoside,PNPG)為底物,研究裂葉蕁麻醇提物對α-葡萄糖苷酶的抑制作用。結(jié)果表明,裂葉蕁麻醇提物中黃酮含量為12.09 mg/g,對DPPH自由基的最大清除率為92.76%,半抑制濃度(IC50)為9.960μg/mL,對羥基自由基的最大清除率為98.05%,IC50值為1.123 mg/mL,總還原力隨醇提物濃度的增加而增強;對α-葡萄糖苷酶的最大抑制率為59.06%,IC50值為31.598 mg/mL。以上實驗結(jié)果說明裂葉蕁麻醇提物具有明確的體外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制作用,有望開發(fā)成為抗氧化降糖功能性食品[5]。
參考文獻
[1]. Zeng L, et, al. Inhibitory mechanism of morin on α-glucosidase and its anti-glycation properties. Food Funct. 2016 Sep 14;7(9):3953-63.
[2]. Binder TP, et, al. p-Nitrophenyl alpha-D-glucopyranoside, a new substrate for glucansucrases. Carbohydr Res. 1983 Dec 23;124(2):287-99.
[3]孫家莉,褚婕,丁曉琴.酶底物對硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的合成[J].化學(xué)試劑, 2005, 27(002):97-98.DOI:10.3969/j.issn.0258-3283.2005.02.012.
[4]楊萍,陳麗宇,王曉琳,等.高效液相色譜法測定對硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的含量[J].藥物分析雜志, 2011, 31(4):2.DOI:CNKI:SUN:YWFX.0.2011-04-044.
[5]楊文娟,何亞娟,毛跟年,等.裂葉蕁麻醇提物體外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].食品研究與開發(fā), 2020, 41(3):6.DOI:CNKI:SUN:SPYK.0.2020-03-003.