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4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的分析測(cè)定與研究

2024/12/9 9:32:31 作者:風(fēng)華

簡(jiǎn)述

4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷又名對(duì)硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷,是α-葡萄糖苷酶的顯色底物,可用于測(cè)量α-葡萄糖苷酶活性[1-2]。體外研究發(fā)現(xiàn),4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷可以通過酶促裂解釋放對(duì)硝基苯酚。以葡萄糖為原料,經(jīng)乙酰化,縮合,分離,脫乙酰化4步反應(yīng)可以合成了目標(biāo)產(chǎn)物4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷,常溫常壓下表現(xiàn)為白色至灰白色粉末[3]。

4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷.jpg

理化性質(zhì)

密度 1.6±0.1 g/cm3

沸點(diǎn) 582.2±50.0℃ at 760 mmHg

熔點(diǎn) 210-216℃

分析測(cè)定

實(shí)驗(yàn)建立高效液相色譜法測(cè)定4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量,具體參數(shù)如下:

色譜柱:Hypersil C18色譜柱(250 mm×4.6mm,5μm)

流動(dòng)相:甲醇-水(759:25)

流速:為0.8 mL·min-1

紫外檢測(cè)器:檢測(cè)波長(zhǎng)303 nm

柱溫:35℃

結(jié)果發(fā)現(xiàn),4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的濃度在13.5~135.0μg·mL-1的范圍內(nèi),峰面積與濃度呈良好線性 (r=0.9999),平均回收率為99.7%(n=6)。上述方法簡(jiǎn)便,快速,準(zhǔn)確,可用于4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷的含量測(cè)定[4]。

有關(guān)研究

以裂葉蕁麻為原料,用70%乙醇對(duì)其進(jìn)行提取,以醇提物為研究對(duì)象,測(cè)定其黃酮含量。以抗環(huán)血酸(VC)為陽(yáng)性對(duì)照,通過測(cè)定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率,羥基自由基(·OH)清除率及總還原力來評(píng)價(jià)裂葉蕁麻醇提物體外抗氧化能力。以4-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷(4-Nitrophenylα-D-glucopyranoside,PNPG)為底物,研究裂葉蕁麻醇提物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用。結(jié)果表明,裂葉蕁麻醇提物中黃酮含量為12.09 mg/g,對(duì)DPPH自由基的最大清除率為92.76%,半抑制濃度(IC50)為9.960μg/mL,對(duì)羥基自由基的最大清除率為98.05%,IC50值為1.123 mg/mL,總還原力隨醇提物濃度的增加而增強(qiáng);對(duì)α-葡萄糖苷酶的最大抑制率為59.06%,IC50值為31.598 mg/mL。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明裂葉蕁麻醇提物具有明確的體外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制作用,有望開發(fā)成為抗氧化降糖功能性食品[5]。

參考文獻(xiàn)

[1]. Zeng L, et, al. Inhibitory mechanism of morin on α-glucosidase and its anti-glycation properties. Food Funct. 2016 Sep 14;7(9):3953-63.

[2]. Binder TP, et, al. p-Nitrophenyl alpha-D-glucopyranoside, a new substrate for glucansucrases. Carbohydr Res. 1983 Dec 23;124(2):287-99.

[3]孫家莉,褚婕,丁曉琴.酶底物對(duì)硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的合成[J].化學(xué)試劑, 2005, 27(002):97-98.DOI:10.3969/j.issn.0258-3283.2005.02.012.

[4]楊萍,陳麗宇,王曉琳,等.高效液相色譜法測(cè)定對(duì)硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷的含量[J].藥物分析雜志, 2011, 31(4):2.DOI:CNKI:SUN:YWFX.0.2011-04-044.

[5]楊文娟,何亞娟,毛跟年,等.裂葉蕁麻醇提物體外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].食品研究與開發(fā), 2020, 41(3):6.DOI:CNKI:SUN:SPYK.0.2020-03-003.

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