簡(jiǎn)述
APS-5化學(xué)名稱為(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽,化學(xué)名稱為C21H15ClNNa2O4PS,分子量為489.8。常溫常壓下,APS-5表現(xiàn)為白色至淡棕色粉末,可溶于二甲亞砜、水等溶液。其中,其在水中的溶解度可以達(dá)到20mg/mL。APS-5是一種基于 9,10-二氫吖啶的化學(xué)發(fā)光底物,特征發(fā)射波長(zhǎng)為430nm,適用于磷酸酶活性溶液測(cè)定和磷酸酶酶聯(lián)免疫測(cè)定[1]。
合成方法
文獻(xiàn)報(bào)道了一種用于免疫分析的化學(xué)發(fā)光試劑APS-5的合成方法,以廉價(jià)的吖啶酮作為主要原料,經(jīng)過(guò)甲基化,氰基化,水解,還原等步驟即可得到目標(biāo)物質(zhì)。該合成方法具有成本低,收率高等特點(diǎn),經(jīng)濟(jì)價(jià)值高,適合在工業(yè)上使用[2]。
應(yīng)用
APS-5目前已作為發(fā)光探針被用于基因芯片的研究中,其在均相堿性磷酸酶檢測(cè)中的應(yīng)用表現(xiàn)出超高的靈敏度,(可以檢測(cè)到小于10-19mol的堿性磷酸酶),能迅速達(dá)到峰值以減少檢測(cè)時(shí)間,增加通過(guò)量。例如,文獻(xiàn)報(bào)道了一種化學(xué)發(fā)光底物液。該化學(xué)發(fā)光底物液包括如下組分:150mg/L的APS-5,10mmol/L-500mmol/L的緩沖基質(zhì),0.1mg/L-20mg/L的熒光增強(qiáng)物質(zhì),10mg/L-5000mg/L的本底發(fā)光抑制物質(zhì)及0.1g/L-10g/L的表面活性劑,化學(xué)發(fā)光底物液的pH為8-11。該底發(fā)光抑制物質(zhì)為具有弱還原性的無(wú)機(jī)還原劑或者具有弱還原性的有機(jī)還原劑,表面活性劑為非離子表面活性劑與陰離子表面活性劑的混合物或者為非離子表面活性劑與陽(yáng)離子表面活性劑的混合物。上述化學(xué)發(fā)光底物液達(dá)到發(fā)光平臺(tái)期時(shí)間短,發(fā)光持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),檢測(cè)靈敏度高且光穩(wěn)定性好,可以提高臨床免疫檢測(cè)速度,縮短檢測(cè)時(shí)間[3]。在眾多分析研究中,APS-5還具有以下優(yōu)點(diǎn),發(fā)光強(qiáng)度高,平臺(tái)期短,3-5S可以達(dá)到發(fā)光峰值;可以持續(xù)穩(wěn)定發(fā)光,其發(fā)光過(guò)程在25-35℃內(nèi)不受溫度影響,不需溫度控制。
反應(yīng)機(jī)理
APS-5用于分析研究的原理主要包括兩步:
(1)酶催化作用?:在堿性磷酸酶的作用下,APS-5分解產(chǎn)生光子。
?(2)光子檢測(cè)?:釋放出的光子數(shù)量與溶液中堿性磷酸酶的濃度成正比,因此可以用于堿性磷酸酶的定量檢測(cè)?。
參考文獻(xiàn)
[1]傅智杰,周錦龍,龔海文,等.一種酶促化學(xué)發(fā)光底物液配制方法以及加注裝置:CN202010013245.3[P].CN111077140A.
[2]郭佳.一種用于免疫分析的化學(xué)發(fā)光試劑APS-5的合成方法:CN202210713643.5[P].CN202210713643.5.
[3]劉挺,鄧月月,姚天成.化學(xué)發(fā)光底物液及其應(yīng)用:CN201811215406.6[P].CN109490281A.