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組培中瓊脂粉不凝固或偏軟?該怎么辦?

2024/2/23 14:19:17 作者:云霄

瓊脂粉又稱寒天粉,果凍粉。它是提取自天然石花菜、江蘺菜、紫菜,采用科學(xué)方法精煉提純的天然高分子多糖物質(zhì)。粉末狀,可以直接沖茶或加入果汁中喝,比較方便。口感和它的使用量有關(guān),用量越多,呈現(xiàn)出脆硬的口感,用量少,口軟較柔軟嫩滑。此外,在生物實驗中也常常用瓊脂粉來配培養(yǎng)基,有時會發(fā)現(xiàn)瓊脂粉不凝固或偏軟,本文將簡要分析可能的原因。

瓊脂粉

瓊脂粉不凝固

1. 組培室剛運營的時候,工作人員經(jīng)驗不足,瓊脂粉忘加了。

2. 瓊脂添加的量算錯了,少加了。

3. pH誤差較大,差1以上; 忘記調(diào)節(jié)pH。這種情況很容易造成培養(yǎng)基出現(xiàn)不凝固,偏軟的現(xiàn)象。平常pH計也會因為各種原因出現(xiàn)偏差,所以需要定期校準(zhǔn)。

瓊脂粉偏軟

1. 瓊脂粉用量問題

瓊脂用量的差異主要出現(xiàn)在不同強度和不同批次的瓊脂粉上,所以每次更換瓊脂必須要做好測試工作。

2. pH問題

平時要多留心在正常情況下,滅菌后的培養(yǎng)基pH值與所調(diào)節(jié)的pH值相比下降了多少。例如冬天一般會下降0.2-0.3個pH,夏天則會下降0.3-0.4,不同滅菌鍋之間也會有差異。

一旦培養(yǎng)基出現(xiàn)問題,我們最關(guān)心的是滅菌后的培養(yǎng)基pH值。所以組培室如果配的培養(yǎng)基凝固的不好,第一時間會校準(zhǔn)pH計,再測量那些有問題的。

通過校準(zhǔn)pH計,檢查儀器是否準(zhǔn)確。大多數(shù)情況下儀器會有偏差,這是導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固不好的一個原因。

3. 瓊脂過度水解問題

pH計沒問題,再測量偏軟培養(yǎng)基的pH值。絕大部分會pH偏低。瓊脂的水解比例加大,有效瓊脂粉含量下降,導(dǎo)致凝固性能下降。甚至有時候排冷氣的時間加長,或者滅菌結(jié)束后悶在鍋里一段時間,或者滅菌后的培養(yǎng)基放在太熱的空調(diào)房里,冷凝時間加長等等,都會造成瓊脂的水解。

在同等pH和滅菌條件下,部分瓊脂會水解的厲害一些,前后會下降0.4-0.5個pH,針對這類瓊脂,需要在調(diào)節(jié)pH時比平時高0.2左右,滅菌出來的pH就會跟平常所滅的培養(yǎng)基一樣,凝固也會好很多。

還有一種情況會造成瓊脂粉損失,培養(yǎng)基加熱過程中攪拌不到位,粘鍋了,致使培養(yǎng)基顏色加深,往往凝固也不好。

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