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生物實(shí)驗(yàn)中瓊脂粉常見問題解答

2023/3/2 13:13:36 作者:貝克曼

問題1:使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃?影響實(shí)驗(yàn)?

產(chǎn)品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質(zhì)量問題,不影響使用。進(jìn)口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?,F(xiàn)象。

問題2:凝膠強(qiáng)度?

答:凝膠強(qiáng)度(1.5%)≥800g/cm2  800-1200g/cm2

1.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時(shí)以上,再測定凝膠強(qiáng)度。與溫度,水質(zhì)等有關(guān)。

一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時(shí)間久,可能會有部分降解,所以要達(dá)到同樣凝膠強(qiáng)度的用量就偏高。

Agar-powder.jpg

問題3:瓊脂粉不凝固

1、培養(yǎng)基PH值過低 ,偏酸,水解

2、所加瓊脂量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。

3、瓊脂質(zhì)量不過關(guān),瓊脂條在使用時(shí)添加量要稍微高一點(diǎn),瓊脂粉是不是新買的4、滅菌溫度過高,加熱時(shí)間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度5、培養(yǎng)基沒有加熱溶解不夠,就沒有凝固。是不是瓊脂加錯了,營養(yǎng)瓊脂不會凝固。到平板時(shí)可以推薦在超凈臺內(nèi)吹干晾干,蒸發(fā)過多水分。

問題4:PH與瓊脂粉?

瓊脂粉默認(rèn)使用PH為中性,一般為7左右,PH小于4則無法凝結(jié),具體的PH與穩(wěn)定性的檢測沒有做過,根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來說 PH偏堿,凝膠后顏色稍白,PH偏酸,凝膠顏色稍暗。

問題5:瓊脂粉做碳源測試,不加碳源細(xì)菌仍然能生長,上一批次的就不能生長?

答:理論上應(yīng)該不長,一般微生物都不能利用瓊脂粉,但某些雜菌仍可以利用,所以要檢測到底是瓊脂粉純度問題還是染了雜菌

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