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細菌性疫苗培養(yǎng)基中的六邊形戰(zhàn)士—酸水解酪蛋白

2023/3/22 10:37:26 作者:小滿

細菌發(fā)酵是疫苗生產(chǎn)的關(guān)鍵工藝,而培養(yǎng)基是影響細菌生產(chǎn)濃度和產(chǎn)糖和產(chǎn)蛋白的關(guān)鍵因素。常見的細菌性疫苗有肺炎疫苗,流腦疫苗,百白破疫苗。對應(yīng)的細菌是肺炎球菌,腦膜炎球菌,白喉桿菌,破傷風(fēng)桿菌。由于這類生長對營養(yǎng)物質(zhì)要求較高,除了基礎(chǔ)的長鏈蛋白胨之外,還經(jīng)常輔以多氨基酸組分的水解物。而通過完全水解的蛋白胨,酸水解酪蛋白對于這些所有細菌培養(yǎng)都是有幫助和生長的??梢哉f是妥妥的全能戰(zhàn)士。

什么是酸水解?

蛋白胨,也稱為蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物,是源自植物、酵母或動物蛋白質(zhì)部分水解的水溶性產(chǎn)物。可以使用強酸、強堿或蛋白水解酶來完成蛋白質(zhì)水解過程,這些強酸、強堿或蛋白水解酶會產(chǎn)生復(fù)雜的、營養(yǎng)豐富的最終產(chǎn)品,易于細胞使用。酸水解一般通過Muller和Miller的方法,在濃鹽酸下,105-110℃,20小時后形成完全水解的小分子氨基酸。

酸水解蛋白胨的生產(chǎn)流程

盡管大多數(shù)蛋白胨具有相似的組分基團,但水解過程和起始蛋白質(zhì)材料會產(chǎn)生獨特的產(chǎn)物組成,這是由相同原料制成的多種產(chǎn)物存在的基礎(chǔ)。通常在高溫下進行的酸或堿水解過程會攻擊所有肽鍵,并破壞某些氨基酸,同時將其他氨基酸轉(zhuǎn)化為酸性形式。不管水解方法如何,大多數(shù)蛋白胨都是使用類似于圖所示的流程生產(chǎn)的。蛋白質(zhì)和去離子水結(jié)合在大容量水解容器中形成蛋白質(zhì)材料的濃懸浮液,在整個水解過程中不斷攪拌。酸水解時,調(diào)節(jié)溫度并將消化材料添加到容器中。所需的水解程度取決于酶的量、消化時間以及 ph 值和溫度的控制。一旦達到預(yù)定的蛋白質(zhì)消解程度,就必須停止活性。將懸浮液加熱以滅活酶或中和以滅活酸或堿。然后將蛋白質(zhì)漿液離心和/或過濾以除去不溶性物質(zhì)并澄清和濃縮產(chǎn)物。真空蒸發(fā)可用于快速濃縮。然后可以對該蛋白胨糖漿進行進一步處理以調(diào)節(jié)pH,進行巴氏滅菌和過濾。

蛋白胨的生產(chǎn)流程.png

蛋白胨生產(chǎn)的基本步驟

潛在應(yīng)用

酸水解蛋白胨擬是一種營養(yǎng)補充物,用于不受高鹽含量影響的維生素化驗、靈敏度測試以及其他實驗室培養(yǎng)基和微生物發(fā)酵過程。Bacto酸水解酪蛋白由于酪蛋白幾乎完全水解,其氯化鈉和鐵含量很低,因此成為許多培養(yǎng)基配方的補充物。推薦將其作為純氨基酸的替代物,用于成分明確的乳酸桿菌的生長培養(yǎng)基,從而簡化配制過程。此外,它已與 Bacto 胰蛋白胨一起成功用于營養(yǎng)研究,以確定細菌對多肽或氨基酸的生長需求。它作為實驗室培養(yǎng)基的一個組分也起到很好的作用。它已在 TYI-S-33 培養(yǎng)基(用于寄生蟲組織內(nèi)阿米巴)和 LCM 培養(yǎng)基(用于線蟲-細菌復(fù)合體的生長)等多種應(yīng)用中使用。

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