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結(jié)晶紫染色液

2019/12/26 13:45:04

背景[1][2][3][4]

結(jié)晶紫或龍膽紫(六甲基對(duì)苯二胺氯化物)是用作組織學(xué)染色的三芳基甲烷染料和Gram的細(xì)菌分類方法。

結(jié)晶紫具有抗菌,抗真菌和驅(qū)蟲(chóng)的特性,并且以前作為局部防腐劑是重要的。雖然它仍被世界衛(wèi)生組織列出,但這種染料的醫(yī)學(xué)用途已被很多現(xiàn)代藥物取代。最初用于甲基pararosaniline染料(甲基紫)的混合物,但現(xiàn)在通常被認(rèn)為是結(jié)晶紫的同義詞。許多可能的途徑可用于制備結(jié)晶紫。德國(guó)化學(xué)家Kern和Caro開(kāi)發(fā)的原始程序涉及二甲基苯胺與光氣的反應(yīng),得到4,4'-雙(二甲基氨基)二苯甲酮(米歇爾酮)作為中間體。這是在隨后的存在下與二甲基苯胺附加反應(yīng)的三氯氧化磷和鹽酸。

染料也可以通過(guò)甲醛和二甲基苯胺的縮合制備,得到隱色染料。當(dāng)溶解在水中時(shí),染料具有藍(lán)紫色,在590nm處具有吸光度。染料的顏色取決于溶液的酸度。在pH為+1.0時(shí),染料為綠色,吸收在420nm和620nm,而在強(qiáng)酸性溶液(pH1.0)中,染料為黃色,在420nm處具有吸收。不同的顏色是染料分子的不同帶電狀態(tài)的結(jié)果。

在黃色形式中,所有三個(gè)氮原子帶有正電荷,其中兩個(gè)被質(zhì)子化,而綠色對(duì)應(yīng)于一種形式的染料,其中兩個(gè)氮原子帶正電荷。在中性pH下,兩個(gè)額外的質(zhì)子都會(huì)損失到溶液中,只留下一個(gè)氮原子帶正電荷。在堿性溶液中,親核羥基離子攻擊親電子中心碳以產(chǎn)生無(wú)色三苯甲醇或甲醇形式的染料。當(dāng)?shù)由系恼姾蓪?dǎo)致中心碳的親電子特性增強(qiáng)時(shí),一些三苯基甲醇也在非常酸性的條件下形成,這允許水分子的親核攻擊。這種效果會(huì)使黃色略微褪色。

研究應(yīng)用[5][6]

結(jié)晶紫不僅用作紡織染料,而且還用于染色紙和用作印刷,圓珠筆和噴墨打印機(jī)的海軍藍(lán)和黑色墨水的組分。它還用于著色各種產(chǎn)品,如肥料,防凍劑,洗滌劑和皮革。染料也用作組織學(xué)染色劑,特別是在用于分類細(xì)菌的革蘭氏染色中。當(dāng)進(jìn)行DNA凝膠電泳時(shí),結(jié)晶紫可用作無(wú)毒DNA染色劑,作為熒光,嵌入染料如溴化乙錠的替代品。

以這種方式使用,它可以摻入瓊脂糖凝膠中或在電泳過(guò)程結(jié)束后施用。以0.001%的濃度使用,并在電泳30分鐘后使凝膠染色,它可以檢測(cè)少至16ng的DNA。通過(guò)使用甲基橙復(fù)染劑和更復(fù)雜的染色方法,可以進(jìn)一步提高靈敏度至8ng DNA。

當(dāng)結(jié)晶紫用作熒光染料的替代品時(shí),不必使用紫外線照射;在體外進(jìn)行DNA克隆時(shí),這使得結(jié)晶紫被廣泛用作避免紫外線誘導(dǎo)的DNA破壞的手段。在生物醫(yī)學(xué)研究中,結(jié)晶紫可用于染色貼壁細(xì)胞的細(xì)胞核。在本申請(qǐng)中,結(jié)晶紫可以作為一個(gè)嵌入染料,并允許DNA的定量成比例的細(xì)胞的數(shù)目。在法醫(yī)學(xué)中,龍膽紫被用來(lái)發(fā)展指紋。在制備光學(xué)顯微鏡切片時(shí),結(jié)晶紫也用作組織染色劑。

在實(shí)驗(yàn)室中,含有結(jié)晶紫和福爾馬林的溶液通常用于同時(shí)固定和染色組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)的細(xì)胞以保存它們并使其易于看見(jiàn),因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)胞是無(wú)色的。它有時(shí)也被用作在實(shí)驗(yàn)室老鼠身上放置識(shí)別標(biāo)記的廉價(jià)方法;由于許多實(shí)驗(yàn)室小鼠品系都是白化病,因此紫色在皮毛上停留數(shù)周。在穿孔時(shí),龍膽紫通常用于標(biāo)記穿孔的位置,包括表面穿孔。

參考文獻(xiàn)

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