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結(jié)晶紫染色液

2019/12/26 13:45:04

背景[1][2][3][4]

結(jié)晶紫或龍膽紫(六甲基對苯二胺氯化物)是用作組織學染色的三芳基甲烷染料和Gram的細菌分類方法。

結(jié)晶紫具有抗菌,抗真菌和驅(qū)蟲的特性,并且以前作為局部防腐劑是重要的。雖然它仍被世界衛(wèi)生組織列出,但這種染料的醫(yī)學用途已被很多現(xiàn)代藥物取代。最初用于甲基pararosaniline染料(甲基紫)的混合物,但現(xiàn)在通常被認為是結(jié)晶紫的同義詞。許多可能的途徑可用于制備結(jié)晶紫。德國化學家Kern和Caro開發(fā)的原始程序涉及二甲基苯胺與光氣的反應,得到4,4'-雙(二甲基氨基)二苯甲酮(米歇爾酮)作為中間體。這是在隨后的存在下與二甲基苯胺附加反應的三氯氧化磷和鹽酸。

染料也可以通過甲醛和二甲基苯胺的縮合制備,得到隱色染料。當溶解在水中時,染料具有藍紫色,在590nm處具有吸光度。染料的顏色取決于溶液的酸度。在pH為+1.0時,染料為綠色,吸收在420nm和620nm,而在強酸性溶液(pH1.0)中,染料為黃色,在420nm處具有吸收。不同的顏色是染料分子的不同帶電狀態(tài)的結(jié)果。

在黃色形式中,所有三個氮原子帶有正電荷,其中兩個被質(zhì)子化,而綠色對應于一種形式的染料,其中兩個氮原子帶正電荷。在中性pH下,兩個額外的質(zhì)子都會損失到溶液中,只留下一個氮原子帶正電荷。在堿性溶液中,親核羥基離子攻擊親電子中心碳以產(chǎn)生無色三苯甲醇或甲醇形式的染料。當?shù)由系恼姾蓪е轮行奶嫉挠H電子特性增強時,一些三苯基甲醇也在非常酸性的條件下形成,這允許水分子的親核攻擊。這種效果會使黃色略微褪色。

研究應用[5][6]

結(jié)晶紫不僅用作紡織染料,而且還用于染色紙和用作印刷,圓珠筆和噴墨打印機的海軍藍和黑色墨水的組分。它還用于著色各種產(chǎn)品,如肥料,防凍劑,洗滌劑和皮革。染料也用作組織學染色劑,特別是在用于分類細菌的革蘭氏染色中。當進行DNA凝膠電泳時,結(jié)晶紫可用作無毒DNA染色劑,作為熒光,嵌入染料如溴化乙錠的替代品。

以這種方式使用,它可以摻入瓊脂糖凝膠中或在電泳過程結(jié)束后施用。以0.001%的濃度使用,并在電泳30分鐘后使凝膠染色,它可以檢測少至16ng的DNA。通過使用甲基橙復染劑和更復雜的染色方法,可以進一步提高靈敏度至8ng DNA。

當結(jié)晶紫用作熒光染料的替代品時,不必使用紫外線照射;在體外進行DNA克隆時,這使得結(jié)晶紫被廣泛用作避免紫外線誘導的DNA破壞的手段。在生物醫(yī)學研究中,結(jié)晶紫可用于染色貼壁細胞的細胞核。在本申請中,結(jié)晶紫可以作為一個嵌入染料,并允許DNA的定量成比例的細胞的數(shù)目。在法醫(yī)學中,龍膽紫被用來發(fā)展指紋。在制備光學顯微鏡切片時,結(jié)晶紫也用作組織染色劑。

在實驗室中,含有結(jié)晶紫和福爾馬林的溶液通常用于同時固定和染色組織培養(yǎng)中生長的細胞以保存它們并使其易于看見,因為大多數(shù)細胞是無色的。它有時也被用作在實驗室老鼠身上放置識別標記的廉價方法;由于許多實驗室小鼠品系都是白化病,因此紫色在皮毛上停留數(shù)周。在穿孔時,龍膽紫通常用于標記穿孔的位置,包括表面穿孔。

參考文獻

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[4] Jump up to:abUS 290856,Caro,H.&A.Kern,"Manufacture of dye-stuff",issued 1883US 290891,Kern,A.,"Manufacture of dye-stuff or coloring-matter",issued 1883US 290892,Kern,A.,"Manufacture of purple dye-stuff",issued 1883

[5] Yang,Y.;Jung,D.W.;Bai,D.G.;Yoo,G.S.;Choi,J.K.(2001),"Counterion-dye staining method for DNA in agarose gels using crystal violet and methyl orange",Electrophoresis,22(5):855–859,doi:10.1002/1522-2683()22:5<855::AID-ELPS855>3.0.CO;2-Y,PMID 11332752

[6] Klingenberg,Marcel;Becker,Jürgen;Eberth,Sonja;Kube,Dieter;Wilting,Jörg(2014-04-06)."The NADPH Oxidase Inhibitor Imipramine-Blue in the Treatment of Burkitt Lymphoma".Molecular Cancer Therapeutics.13(4):833–841.doi:10.1158/1535-7163.mct-13-0688.

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