草酸銨結(jié)晶紫染色液是革蘭氏染色法中的一種成分。革蘭陽性菌染色中，細(xì)胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理，形成不溶性復(fù)合物，該復(fù)合物不能通過細(xì)胞壁，不易被脫色，所以保持紫色。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。

操作步驟(僅供參考)

1、 按實(shí)驗(yàn)具體要求操作或參考下列革蘭氏染色的方法。
2、 涂片：取待檢細(xì)菌，于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無菌水，取菌與水混合均勻，涂成薄層。
3、 干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥。
4、 固定：手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動(dòng)。
5、 初染：滴加結(jié)晶紫染色液染色，清水沖洗去染色液。
6、 媒染：滴加Gram碘液，并覆蓋載玻片室溫放置，水洗。
7、脫色：滴加脫色液搖動(dòng)，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色為止，立即用水沖去脫色液，終止反應(yīng)。
8、 復(fù)染：滴加沙黃染色液染色，水洗。
9、 干燥。鏡檢：置油鏡觀察。

染色結(jié)果：革蘭氏陽性菌：藍(lán)色至紫色；革蘭氏陰性菌：紅色。

注意事項(xiàng)

1、涂片之前，應(yīng)事先在背面做好圓圈標(biāo)記，以便判斷后續(xù)試驗(yàn)的位置。
2、待檢細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間會(huì)影響染色，陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長或已死亡或細(xì)菌溶解，常呈陰性。
3、 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

結(jié)晶紫染色液配制：結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h后過濾即成。