背景及概述[1]
菊粉( Inulin) 屬于線型菊糖型果聚糖，作為一種天然的功能性多糖，具有水溶性膳食纖維和生物活性前提的生理功能，具有超強(qiáng)的增殖雙歧桿菌的功能，對(duì)于調(diào)節(jié)機(jī)體平衡、恢復(fù)胃腸功能、提高免疫力、促進(jìn)礦物質(zhì)鈣、鎂、鋅、銅等的吸收、調(diào)節(jié)血糖、降低血脂、預(yù)防肥胖癥以及抗癌等生理作用，預(yù)防各種疾病、維護(hù)身體健康有著極為重要的作用，可廣泛用于低熱量、低糖、低脂食品中。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)直鏈結(jié)構(gòu)的果聚糖的純度在70％以上菊粉在防治高尿酸血癥的藥物及保健品中也具廣泛前途。
菊粉已被世界上多個(gè)國家批準(zhǔn)作為食品的營養(yǎng)增補(bǔ)劑。日本厚生省批準(zhǔn)菊粉為特定保健食品，應(yīng)用于多種食品中。美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)菊粉為公認(rèn)的安全級(jí)食品配料。歐洲則把它作為控制膽固醇水平的功能性甜味劑廣泛應(yīng)用。我國菊粉的生產(chǎn)也已廣泛應(yīng)用在食品工業(yè)。
純度的鑒定[1-2]
1）果糖對(duì)照品溶液配制：準(zhǔn)確稱取果糖對(duì)照品50mg至5ml容量瓶中，配制成濃度10mg/ml的果糖標(biāo)準(zhǔn)液，過0.45um待測；葡萄糖對(duì)照品溶液配制：準(zhǔn)確稱取葡萄糖對(duì)照品10mg至10ml容量瓶中，配制成濃度1mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，過0.45um待測；
2）色譜條件的設(shè)定：檢測器：示差折光檢測器 檢測器溫度50℃；色譜柱：Phenomenex Rezex Ca2+ ；柱溫：80℃；流動(dòng)相：純化水；流速：0.50ml/min；進(jìn)樣量：25μ1；運(yùn)行時(shí)間：30min；
3）菊粉樣品處理：供試品（1）：精密稱取菊粉樣品1.0g置100ml容量瓶中，加入適量水，加熱溶解，冷卻至溫室，用定容至刻度。供試品（2）：精密稱取菊粉樣品1.0g置100ml容量瓶中，加入10ml水，加熱溶解，冷卻至溫室，分別添加菊粉內(nèi)切酶菊粉、外切酶入菊粉酶各5U，混合均勻，置60℃水浴振蕩器中加熱12小時(shí)，沸水浴滅活酶，用水定容至100ml，充分搖均，離心，取上清液過濾，進(jìn)樣。
4）HPLC分析計(jì)算果糖和葡萄糖的含量： 按色譜條件供試品（1）進(jìn)樣，得到菊粉酶解前果糖、葡萄糖的峰面積，參照對(duì)照品的面積，計(jì)算菊粉中的果糖、葡萄糖含量；按色譜條件供試品（2）進(jìn)樣，得到菊粉酶解后果糖、葡萄糖的峰面積，參照對(duì)照品的面積，計(jì)算菊粉中的果糖、葡萄糖含量；
5）菊粉純度的鑒別：供試品（2）酶解后樣品的果糖和葡萄糖含量減去供試品（1）樣品的果糖和葡萄糖含量，再乘以0.9，從而確定菊粉樣品的純度；觀察其是否符合正常范圍，由此判斷供試品菊粉純度是否合格；所述0.9為菊粉中脫水果糖或脫水葡萄糖與果糖或葡萄糖的分子量的比率。
應(yīng)用[2]
一種菊糖酶酶解菊粉生產(chǎn)低聚果糖的方法，該方法包括以下步驟：
(1)菊粉混合溶液：稱取去質(zhì)量比為8:1的去離子水和菊粉，將稱取的菊粉倒入攪拌器中，向攪拌器中加入所稱的去離子水，在轉(zhuǎn)速為500r/min下攪拌30min至混合均勻，攪拌結(jié)束后，將混合液按照1℃/min的升溫速率均勻升溫，升溫至60℃后保溫30min，保溫結(jié)束后對(duì)混合液進(jìn)行5min的超聲處理，待超聲處理結(jié)束后，繼續(xù)向攪拌器中加入乙酸溶液將混合液的pH進(jìn)行調(diào)節(jié)為4.5，將調(diào)節(jié)好pH的混合溶液在轉(zhuǎn)速為300r/min下進(jìn)行20min的離心振蕩，得菊粉混合溶液；
(2)菊粉液經(jīng)菊糖酶酶解制備低聚果糖漿：將所得菊粉混合溶液中加入菊糖酶，充分進(jìn)行混合均勻，按照0.5℃/min的升溫速率升溫至30℃，保溫15min，并一同加入生物反應(yīng)器中進(jìn)行酶解反應(yīng)，控制酶解溫度為50℃，并保溫3.5h進(jìn)行酶解，菊粉混合溶液經(jīng)菊糖酶酶解菊粉產(chǎn)生低聚果糖漿。
參考文獻(xiàn)
[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201210450137.8 一種低聚果糖菊粉純度的鑒定方法
[2] [中國發(fā)明] CN201811452605.9 一種菊糖酶酶解菊粉生產(chǎn)低聚果糖的方法