免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基概述^[1]

免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞（細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。

免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基特點(diǎn)

1、無(wú)血清培養(yǎng)基，無(wú)添加細(xì)胞因子

2、無(wú)異源動(dòng)物成分，化學(xué)成分限定培養(yǎng)基

3、培養(yǎng)性能優(yōu)越，支持高密度單核細(xì)胞培養(yǎng)

免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基應(yīng)用

1、DC細(xì)胞、CIK細(xì)胞和NK細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

2、PBL細(xì)胞和TIL細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

3、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

4、T淋巴細(xì)胞的長(zhǎng)期增殖培養(yǎng)

免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基使用方法^[1]

1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個(gè)核細(xì)胞。

2、單個(gè)核細(xì)胞的接種與誘導(dǎo)活化
1) 0d時(shí)，繃胞計(jì)數(shù)。按細(xì)胞密度2x10⁶cell/mL接種至對(duì)應(yīng)體積的培養(yǎng)液中。添加誘導(dǎo)因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
2) 1d時(shí)(24小時(shí))，添加誘導(dǎo)因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細(xì)胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。

3、細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴(kuò)增
1) 3d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。同時(shí)添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補(bǔ)液比例大致在1：2左右（原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積）
2) 5d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：3左右。
3) 7d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(06-08）x10⁶cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：2左右。
4) 9d時(shí)，將剩余培養(yǎng)液全部加入。

4、收獲細(xì)胞
培養(yǎng)周期結(jié)束后，依據(jù)細(xì)胞量收獲細(xì)胞。

主要參考文獻(xiàn)

[1] 孫婧、陳紅松、高燕、王松霞、張毅、王宇；無(wú)血清培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基對(duì)體外誘導(dǎo)免疫細(xì)胞支持作用的比較。中國(guó)腫瘤生物治療雜志。