淀粉酶生產(chǎn)廠家淀粉酶廠家淀粉酶工廠
淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱,通常通過(guò)淀粉酶催化水解織物上的淀粉漿料,由于淀粉酶的高效性及專一性,酶退漿的退漿率高,退漿快,污染少,產(chǎn)品比酸法、堿法更柔軟,且不損傷纖維。淀粉酶的種類很多,根據(jù)織物不同,設(shè)備組合不同,工藝流程也不同,目前所用的退漿方法有浸漬法、堆置法、卷染法、連續(xù)洗等,由于淀粉酶退漿機(jī)械作用小,水的用量少,可以在低溫條件下達(dá)到退漿效果,具有鮮明的環(huán)保特色。
淀粉酶屬于水解酶類,是催化淀粉、糖元和糊精中糖苷鍵的一類酶的統(tǒng)稱。淀粉酶廣泛分布于自然界,幾乎所有植物、動(dòng)物和微生物都含有淀粉酶。他是研究較多、生產(chǎn)最早、應(yīng)用最廣和產(chǎn)量的一種酶,其產(chǎn)量占整個(gè)酶制劑總產(chǎn)量的50 %以上。按其來(lái)源可分為細(xì)菌淀粉酶、霉菌淀粉酶和麥芽糖淀粉酶。根據(jù)對(duì)淀粉作用方式的不同,可以將淀粉酶分成四類:α- 淀粉酶,他從底物分子內(nèi)部將糖苷鍵裂開(kāi):β- 淀粉酶,他從底物的非還原性末端將麥芽糖單位水解下來(lái): 葡萄糖淀粉酶,他從底物的非還原性末端將葡萄糖單位水解下來(lái):脫支酶,只對(duì)支鏈淀粉、糖原等分支點(diǎn)的α- 1,6- 糖苷鍵有專一性。其中α-淀粉酶以淀粉或糖原為底物,從分子內(nèi)部水解α-1,4 -糖苷鍵,廣泛存在于動(dòng)物、植物和微生物中,應(yīng)用于糧食加工、食品工業(yè)、釀造、發(fā)酵、紡織、醫(yī)藥及石油開(kāi)采等行業(yè)。由于該酶是一種有內(nèi)切活性的淀粉酶,可在中性pH條件下將淀粉水解為糊精、寡糖、麥芽糖和葡萄糖等,從而使黏稠的淀粉糊很快失去黏性而液化,碘的呈色反應(yīng)很快消失,故又稱為淀粉液化酶。β-淀粉酶是一種外切型糖化酶,作用于淀粉時(shí),能從α-1,4糖苷鍵的非還原性末端順次切下一個(gè)麥芽糖單位,生成麥芽糖及大分子的β-界限糊精。由于該酶作用底物時(shí),發(fā)生沃爾登轉(zhuǎn)位反應(yīng),使產(chǎn)物由α-型變?yōu)?beta;-型麥芽糖,故名β-淀粉酶。其廣泛存在于大麥、小麥、玉米、大豆、甘薯等植物和一些微生物
1.α-淀粉酶分離純化方法的研究
高純度α-淀粉酶是一種重要的水解淀粉類酶制劑,可用于研究酶反應(yīng)機(jī)理和測(cè)定生化反應(yīng)平衡常數(shù)等。分離純化α-淀粉酶的方法很多,一般都是依據(jù)酶分子的大小、形狀、電荷性質(zhì)、溶解度、穩(wěn)定性、專一性結(jié)合位點(diǎn)等性質(zhì)建立的。要得到高純度α-淀粉酶,往往需要將各種方法聯(lián)合使用。鹽析沉淀、凝膠過(guò)濾層析、離子交換層析、疏水作用層析、親和層析和電泳等,是蛋白質(zhì)分離純化的主要方法。通過(guò)乙醇沉淀、離子交換層析和凝膠過(guò)濾層析等方式,從白曲霉菌A.kawachii的米曲粗抽出液中,分離純化到兩個(gè)耐酸性α-淀粉酶比活性極高的組分。用疏水吸附法和DEAE-cellulose柱層析法分離純化α-淀粉酶,所得酶活力為110 000 U/g。用硫酸銨沉淀和垂直板制備凝膠電泳對(duì)地衣芽孢桿菌A.4041耐高溫α-淀粉酶進(jìn)行分離純化,得到3種電泳均一的組分。通過(guò)超濾、濃縮、脫鹽和聚丙烯酰胺垂直板凝膠電泳,對(duì)利用基因工程菌生產(chǎn)的重組超耐熱耐酸性α-淀粉酶進(jìn)行純化,得到電泳純級(jí)的超耐熱耐酸性α-淀粉酶,純化倍數(shù)為11.7,活力回收率29.8% 。
但上述方法存在的共同問(wèn)題是,連續(xù)操作和規(guī)模放大都比較困難。反膠團(tuán)萃取具有選擇性高、正萃與反萃可同時(shí)進(jìn)行、分離與濃縮同步進(jìn)行、操作簡(jiǎn)單和易于放大等優(yōu)點(diǎn),并能有效防止生物分子變性失活。采用DMBAC(十二烷基二甲基芐基氯化銨)/正庚反膠團(tuán)體系萃取分離純化α-淀粉酶,克服了以前最常用的AOT(丁二酸-2 -乙基己基酯磺酸鈉)/異辛烷體系無(wú)法對(duì)分子量大于30000的酶進(jìn)行有效萃取分離的缺點(diǎn),并對(duì)萃取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,易于實(shí)現(xiàn)各種酶分離,單級(jí)萃取率高,總回收率可達(dá)78.0%,但對(duì)連續(xù)萃取及有關(guān)工藝條件的完善有待進(jìn)一步研究。雙水相技術(shù)具有處理容量大、能耗低、易連續(xù)化操作和工程放大等優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用雙水相系統(tǒng)PEG/磷酸鹽分離純化α-淀粉酶,增PEG濃度有助于酶富集上相。同樣用PEG/磷酸鹽雙水相體系從發(fā)酵液中直接萃取分離低溫α-淀粉酶,分配系數(shù)及回收率分別為4.8 和87%。
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