背景^[1-6]

小鼠神經(jīng)遞質(zhì)受體PCR芯片運(yùn)用高通量熒光定量PCR方法，在一張96孔或384孔板上同時(shí)對(duì)某個(gè)信號(hào)通路或疾病相關(guān)基因的表達(dá)量變化進(jìn)行檢測(cè)，芯片上的基因包括了與研究對(duì)象有確定關(guān)系的基因或者待考證的基因；目前啟因生物針對(duì)不同的信號(hào)通路和疾病相關(guān)基因設(shè)計(jì)了150多款功能分類PCR芯片，涵蓋生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。

小鼠神經(jīng)遞質(zhì)受體PCR ARRAY含有84個(gè)小鼠神經(jīng)遞質(zhì)受體基因，包括：腎上腺素受體，膽堿能受體，GABA能受體，谷氨酸受體及其他神經(jīng)遞質(zhì)受體等。神經(jīng)遞質(zhì)受體與調(diào)控因子RT²Pr ofiler™PCR Array包含84個(gè)調(diào)控神經(jīng)遞質(zhì)生物合成、攝入、轉(zhuǎn)運(yùn)及信號(hào)傳遞等生物過(guò)程的基因。芯片中包含神經(jīng)遞質(zhì)特異性受體，例如：乙酰膽堿、苯二氮、多巴胺、伽馬氨基丁酸（GABA）、谷氨酸、五羥色胺、生長(zhǎng)抑素和神經(jīng)肽等。

調(diào)控神經(jīng)遞質(zhì)水平的基因也包含其中。利用實(shí)時(shí)定量PCR，你可以方便并且可信地對(duì)與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的基因進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)分為四類，即生物原胺類、氨基酸類、肽類、其它類。生物原胺類神經(jīng)遞質(zhì)是最先發(fā)現(xiàn)的一類，包括：多巴胺（DA）、去甲腎上腺素（NA,NE）、腎上腺素（AD）、5-羥色胺（5-HT）也稱（血清素）。

氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)包括：γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸、谷氨酸、組胺、乙酰膽堿（Ach）。肽類神經(jīng)遞質(zhì)分為：內(nèi)源性阿片肽、P物質(zhì)、神經(jīng)加壓素、膽囊收縮素（CCK）、生成抑素、血管加壓素和縮宮素、神經(jīng)肽y。其它神經(jīng)遞質(zhì)分為：核苷酸類、花生酸堿、阿南德酰胺、sigma受體（σ受體）。

重要的神經(jīng)遞質(zhì)和調(diào)質(zhì)有：

①乙酰膽堿。最早被鑒定的遞質(zhì)。脊椎動(dòng)物骨骼肌神經(jīng)肌肉接頭、某些低等動(dòng)物如軟體、環(huán)節(jié)和扁形動(dòng)物等的運(yùn)動(dòng)肌接頭等，都是以乙酰膽堿為興奮性遞質(zhì)。脊椎動(dòng)物副交感神經(jīng)與效應(yīng)器之間的遞質(zhì)也是乙酰膽堿，但有的是興奮性的（如在消化道），有的是抑制性的（如在心?。Ｖ袊?guó)生理學(xué)家張錫鈞和J.H.加德姆（1932）所開(kāi)發(fā)的以蛙腹直肌標(biāo)本定量測(cè)定乙酰膽堿的方法，對(duì)乙酰膽堿的研究起了重要作用，至今仍有應(yīng)用價(jià)值。

②兒茶酚胺。包括去甲腎上腺素（NA）、腎上腺素(Ad)和多巴胺（DA）。交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞與效應(yīng)器之間的接頭是以去甲腎上腺素為遞質(zhì)。

③5-羥色胺（5-HT）。5-羥色胺神經(jīng)元主要集中在腦橋的中縫核群中，一般是抑制性的，但也有興奮性的。中國(guó)一些學(xué)者的研究表明，在針刺鎮(zhèn)痛中5-羥色胺起著重要作用。

④氨基酸遞質(zhì)。被確定為遞質(zhì)的有谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）和甘氨酸（Gly）。谷氨酸是甲殼類神經(jīng)肌肉接頭的遞質(zhì)。γ氨基丁酸首先是在螯蝦螯肢開(kāi)肌與抑制性神經(jīng)纖維所形成的接頭處發(fā)現(xiàn)的遞質(zhì)。后來(lái)證明γ-氨基丁酸也是中樞的抑制遞質(zhì)。以甘氨酸為遞質(zhì)的突觸主要分布在脊髓中，也是抑制性遞質(zhì)。

⑤多肽類神經(jīng)活性物質(zhì)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)多種分子較小的肽具有神經(jīng)活性，神經(jīng)元中含有一些小肽，雖然還不能肯定它們是遞質(zhì)。如在消化道中存在的胰島素、胰高血糖素和膽囊收縮素等都被證明也含于中樞神經(jīng)元中。

應(yīng)用^[7][8]

小鼠神經(jīng)遞質(zhì)受體PCR芯片可用于小鼠模型神經(jīng)遞質(zhì)受體的表達(dá)基因研究：

制備并鑒定出具備符合經(jīng)前期煩躁障礙(Premenstrual Dysphoric Disorder,PMDD)診斷首要標(biāo)準(zhǔn)的PMDD肝氣郁病證屬性的大鼠模型,并通過(guò)該病證大鼠模型研究,最終形成PMDD肝氣郁病證大鼠模型造模和評(píng)價(jià)的技術(shù)方法。同時(shí),以模型為載體,檢測(cè)各腦區(qū)神經(jīng)遞質(zhì)含量變化及與發(fā)病密切相關(guān)受體基因和蛋白表達(dá),初步探查其發(fā)病機(jī)制。方法:本研究采用動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)與神經(jīng)生化指標(biāo)檢測(cè)相結(jié)合的方法進(jìn)行探討。

(1)采用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的方法,選取間期1期和接受期為測(cè)試點(diǎn),依次進(jìn)行間期1期、接受期、間期1期3次強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST),每次間隔2個(gè)周期即9天,篩選出懸浮不動(dòng)時(shí)間等行為參數(shù)具有動(dòng)情周期依賴性的大鼠;(2)對(duì)篩選出的大鼠行卵巢切除術(shù)后,這種行為表型消失;(3)對(duì)卵巢切除大鼠進(jìn)行外源性性激素誘導(dǎo)人工周期,上病證行為表型又出現(xiàn);(4)對(duì)以上誘導(dǎo)人工周期大鼠“模型”進(jìn)行氟西汀和舒郁膠囊干預(yù),觀察懸浮不動(dòng)時(shí)間等行為參數(shù)的動(dòng)情周期依賴性消失現(xiàn)象,以嚴(yán)格科學(xué)證據(jù),證明該病證大鼠模型屬于PMDD肝氣郁病證大鼠模型;(5)藥物干預(yù)后采用ELSA試劑盒檢測(cè)血清及部分腦區(qū)中5-HT、NE、GABA在各組間的含量變化,以及采用RT-PCR、western-blot方法檢測(cè)GABAAR4α的基因和蛋白表達(dá),以初步探查其神經(jīng)生化機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

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