簡(jiǎn)述
Beta-欖香烯是從姜科植物溫郁金中提取出來(lái)的倍半萜烯類(lèi)有效活性單體，為國(guó)家二類(lèi)非細(xì)胞毒性抗腫瘤的藥物。上世紀(jì)80至90年代，大連市醫(yī)藥科學(xué)研究所與大連醫(yī)學(xué)院（現(xiàn)大連醫(yī)科大學(xué)）聯(lián)合大連化物所申請(qǐng)國(guó)家“七五”科技攻關(guān)計(jì)劃，開(kāi)展Beta-欖香烯的相關(guān)研究。目前Beta-欖香烯在臨床上用于治療肺癌、肝癌、乳腺癌等，由于在抗腫瘤方面具有廣譜、安全、有效、廉價(jià)等突出優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)用前景十分廣闊[1]。
生產(chǎn)工藝
Beta-欖香烯植物來(lái)源培養(yǎng)周期長(zhǎng)，受環(huán)境影響大，且提取物中含有多種同分異構(gòu)體，嚴(yán)重制約了β-欖香烯的穩(wěn)定供應(yīng)。因此，亟需開(kāi)發(fā)新型且高效的Beta-欖香烯生產(chǎn)方式。
利用微生物細(xì)胞工廠(chǎng)，通過(guò)引入異源萜類(lèi)合成途徑并改造內(nèi)源代謝途徑，有望實(shí)現(xiàn)高價(jià)值萜類(lèi)化合物的高效合成。而多形漢遜酵母具有生長(zhǎng)速度快，底物譜廣泛，耐高溫等諸多優(yōu)良性能，是構(gòu)建微生物細(xì)胞工廠(chǎng)的優(yōu)良底盤(pán)細(xì)胞[2]。
分離純化
中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域報(bào)道了一種分離純化Beta-欖香烯，gamma-欖香烯，δ-欖香烯的方法。首先使用乙腈對(duì)提取物進(jìn)行溶解，然后通過(guò)半制備液相色譜法進(jìn)行分離純化，純化過(guò)程使用乙腈作為洗脫劑洗脫得到目標(biāo)洗脫液，最后將目標(biāo)洗脫液減壓蒸出溶劑后使用正己烷萃取，萃取液減壓干燥得到終產(chǎn)品。該方法首次采用半制備液相色譜法為核心的成套技術(shù)，從欖香烯提取物中分離純化了Beta-欖香烯，gamma-欖香烯，δ-欖香烯，建立了一條從欖香烯提取物中分離Beta-欖香烯，gamma-欖香烯，δ-欖香烯的的工藝路線(xiàn)，分離純化目標(biāo)產(chǎn)物的平均純度不小于90%，過(guò)程簡(jiǎn)單，溶劑回收方便，具有很強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值[3]。
藥理活性
為了探索Beta-欖香烯的抗腫瘤作用及其分子機(jī)理，用免疫熒光法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同因素處理的小鼠肝癌H22 細(xì)胞膜HSP70 蛋白表達(dá)的變化，并用處理后的H22 細(xì)胞作為抗原進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤免疫保護(hù)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各實(shí)驗(yàn)組H22 細(xì)胞胞膜HSP70 蛋白的表達(dá)率及表達(dá)強(qiáng)度均較對(duì)照組細(xì)胞有顯著增加( P< 0 .001)。表達(dá)率以Beta-欖香烯和絲裂霉素處理組細(xì)胞為最高，達(dá)95.1%，而熱休克能進(jìn)一步增加胞膜HSP70 蛋白的表達(dá)強(qiáng)度。用Beta-欖香烯處理的H22 細(xì)胞免疫C57BL/6 小鼠能誘導(dǎo)出特異性抗腫瘤免疫，該作用可部分被抗HSP70 分子的單抗阻斷。腫瘤發(fā)生率在Beta-欖香烯誘導(dǎo)組，單抗阻斷組及陰性對(duì)照組小鼠中分別為27-3 % (3/11)，50-0 % (5/10)，100-0 % (10/10)。攻擊后第28 天小鼠平均瘤重分別為(0 .17±0.33) g，(0.66±0.77) g 和(1.11±0.58) g。也就是說(shuō)，Beta-欖香烯等處理的H22 細(xì)胞具有較強(qiáng)免疫原性，能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫，是一種良好的腫瘤疫苗。其抗腫瘤效應(yīng)是或部分是由表達(dá)在腫瘤細(xì)胞膜上的HSP70 蛋白所介導(dǎo)[4]。
參考文獻(xiàn)
[1]麻杰,陳娟,趙冰潔,等.抗癌藥物β-欖香烯及其衍生物的研究進(jìn)展[J].中草藥, 2018, 049(005):1184-1191.
[2]傅乃武,全蘭萍,郭永沺,等.β-欖香烯的抗腫瘤作用和藥理學(xué)研究[J].中國(guó)中藥雜志, 1984, 9(2).
[3]馬賢鵬.一種分離純化β-欖香烯,γ-欖香烯,δ-欖香烯的方法:CN201911126285.2[P].CN110903156A.
[4]吳偉忠,劉康達(dá),湯曉雷,等.β-欖香烯誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫保護(hù)作用機(jī)理初探[J].中華腫瘤雜志, 1999, 21(6):4.DOI:10.3760/j.issn:0253-3766.1999.06.001.