背景[1-7]
馬血清采自健康馬血液為原料，封閉系統(tǒng)內(nèi)無(wú)菌采血，微孔過(guò)濾而成，性狀為澄清液體，無(wú)噬菌體、超低內(nèi)毒素，無(wú)溶血無(wú)異物無(wú)細(xì)菌真菌支原體霉形體衣原體等，促細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖效果極佳，適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動(dòng)物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。細(xì)胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活，在特殊類型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子才能是細(xì)胞得以生長(zhǎng)并維持生長(zhǎng)狀態(tài)。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清，血清終濃度多為5－20％。特殊用途的血清來(lái)源需用經(jīng)驗(yàn)確定。廣泛應(yīng)用的血清種類有馬血清與牛血清，胎牛血清中富含有絲分裂因子，常選其做增殖細(xì)胞用的血清，也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來(lái)做有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。
然而，很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng)，也有人用馬血清來(lái)培養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞。馬血清純天然制品，含有豐富的蛋白，可以替換FBS用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，不宜用于昆蟲(chóng)細(xì)胞的培養(yǎng)。馬血清含有更多的生長(zhǎng)因子，尤其適用于造血干細(xì)胞的培養(yǎng)。另外馬血清還可以用于原代神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)和支原體的培養(yǎng)。
馬血清還可以用于異核體細(xì)胞的形成、綿羊紅細(xì)胞的體外抗體反應(yīng)以及肌肉細(xì)胞的誘導(dǎo)分化等。
細(xì)胞培養(yǎng)中血清的作用
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物.
2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力.
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用.
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源.
5.起酸堿度緩沖液作用.
應(yīng)用[8][9]
馬血清可用于動(dòng)物疾病模型的研究：
在馬血清及不同結(jié)構(gòu)皮質(zhì)類固醇激素單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用后對(duì)兔股骨頭壞死所產(chǎn)生的影響實(shí)驗(yàn)中取健康新西蘭雄性大白兔60只,隨機(jī)分成6組,每組10只。單純馬血清組:間隔2周耳緣靜脈注射馬血清,每次10mg/kg。地塞米松組:臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周;甲基氫化潑尼松組:臀肌注射甲基氫化潑尼松10mg/kg,2次/周。馬血清加甲基強(qiáng)的松龍組:同馬血清組注射馬血清,第2次注射2周后,臀肌注射甲基強(qiáng)的松龍10mg/kg,2次/周。馬血清加地塞米松組:同馬血清組注射馬血清,第2次注射2周后,臀肌注射地塞米松2.5mg/kg,2次/周。正常對(duì)照組,臀肌注生理鹽水,2次/周。②8,12,18周,取各組家兔雙側(cè)股骨頭組織病理學(xué)檢測(cè)。
結(jié)果:①各組家兔雙側(cè)股骨頭組織病理學(xué)特征:單一處理的兔子中,骨壞死常伴有臨近修復(fù)過(guò)程,復(fù)合處理的很少能觀察到修復(fù)反應(yīng),股骨頭壞死發(fā)生率明顯。②組織學(xué)改變:用藥12周可見(jiàn)大量空骨陷窩,髓內(nèi)脂肪細(xì)胞增大,壞死骨小梁出現(xiàn)斷裂,出現(xiàn)死骨片,髓內(nèi)脂肪細(xì)胞增大并融合成片;18周時(shí)骨小梁纖細(xì)、斷裂,間距增大,結(jié)構(gòu)模糊,血管數(shù)量明顯減少,骨的近端或遠(yuǎn)端含有骨壞死。③各組股骨頭壞死率的比較:馬血清組占30%(6/20);地塞米松組占50%(10/20);甲基氫化潑尼松組占65%(13/20);馬血清加甲基強(qiáng)的松龍組占75%(15/20);馬血清加地塞米松組占70%(14/20);正常對(duì)照組為0;馬血清加甲基強(qiáng)的松龍組、馬血清加地塞米松組兩組與其他各組相比較差異有顯著性意義(P<0.01)。
結(jié)論:馬血清與甲基氫化潑尼松或與地塞米松合用時(shí)造成兔股骨頭壞死率明顯超過(guò)其他種類藥物導(dǎo)致的骨壞死率。
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