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苯乙醇胺甲基轉移酶抗體的應用

2020/7/28 11:54:28

背景[1-3]

苯乙醇胺甲基轉移酶抗體是可以特異性結合苯乙醇胺甲基轉移酶的一類多克隆抗體,主要用于檢測苯乙醇胺甲基轉移酶的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。

檢測原理:雙抗體夾心法測定標本中苯乙醇胺甲基轉移酶水平。用純化的苯乙醇胺甲基轉移酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入苯乙醇胺甲基轉移酶,再與HRP標記的苯乙醇胺甲基轉移酶抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的苯乙醇胺甲基轉移酶呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中苯乙醇胺甲基轉移酶濃度。

PNMT是一種位于腎上腺髓質的酶,它催化兒茶酚胺生物合成途徑的最后一步,該過程將去甲腎上腺素甲基化形成腎上腺素(腎上腺素)。PNMT具有β-咔啉2N-甲基轉移酶活性。PNMT參與調節(jié)腎上腺素的產生。糖皮質激素受體形成獨立于DNA結合域的PNMT的多聚體。PNMT表達在小鼠妊娠后期受AP2-alpha和糖皮質激素的調節(jié)。

應用[4][5]

用于苯乙醇胺-N-甲基轉移酶基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓易感性的關聯(lián)研究

高血壓病(Essential Hypertension,EH)是目前最常見的心血管病之一,是全球范圍內的重大公共衛(wèi)生問題。原發(fā)性高血壓是遺傳易感性和環(huán)境因素共同決定的復雜疾病。人群30~60%的血壓變異歸因于遺傳因素。

目前對高血壓病遺傳危險因素的研究,大多采用候選基因的策略,位于17號染色體q21位置上的苯乙醇胺-N-甲基轉移酶(PNMT)基因是其中之一。PNMT是兒茶酚胺生物合成的終點酶,能催化去甲腎上腺素生成腎上腺素,其活性變化可影響體內去甲腎上腺素和腎上腺素的水平,從而參與高血壓病的病理生理過程,故編碼PNMT的基因是研究原發(fā)性高血壓易感性重要的候選基因之一。

探討苯乙醇胺-N-甲基轉移酶(PNMT)G-390A基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓遺傳易感性的關系。

方法:應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)的分析方法,在400例原發(fā)性高血壓患者和388例健康人群中對PNMT基因PNMT G-390A位點進行基因分型。應用χ~2檢驗比較組間基因型及A等位基因頻率的分布的異同,并檢驗不同性別組間基因型及A等位基因頻率的分布異同;

應用非條件Logistic回歸分析對風險因素進行校正,確定PNMT基因型與原發(fā)性高血壓遺傳易感性間的相關性關系;應用單向方差分析檢驗高血壓組與對照組不同基因型的一般情況差異。

參考文獻

[1]Association study between reward dependence temperament and a polymorphism in the phenylethanolamine N-methyltransferase gene in a Japanese female population[J].Emi Yamano,Tokiko Isowa,Yoshiro Nakano,Fumihiko Matsuda,Tomoko Hashimoto-Tamaoki,Hideki Ohira,Shinji Kosugi.Comprehensive Psychiatry.2008(5)

[2]Significance of Heritability in Primary and Secondary Pediatric Hypertension[J].Renee F.Robinson,Donald L.Batisky,John R.Hayes,Milap C.Nahata,John D.Mahan.American Journal of Hypertension.2005(7)

[3]Arterial hypertension as a public health issue in Slovenia[J].Rok Accetto.Blood Pressure.2005(S2)

[4]Hypertension and SNP genotyping in antihypertensive treatment[J].Lisa Kurland,Ulrika Liljedahl,Lars Lind.Cardiovascular Toxicology.2005(2)

[5]陳安.苯乙醇胺-N-甲基轉移酶基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓易感性的關聯(lián)研究[D].中南大學,2009.

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