三環(huán)唑(tricyclazole)屬于細(xì)胞黑色素生物合成抑制劑(melanin biosynthesis inhibitors),是一種作用機理非常獨特的殺菌劑,通常對病原菌直接毒性較低。大多數(shù)黑色素合成抑制劑如三環(huán)唑、稻瘟酰胺、環(huán)丙酰菌胺、咯喹酮等,是防治水稻稻瘟病病菌的專用藥劑。
黑色素存在于病原真菌的附著孢內(nèi),沒有黑色素就不能形成正常的附著孢。附著孢是水稻稻瘟病致病過程中的侵染結(jié)構(gòu),其功能是集聚病菌侵染時所需的能量和機械膨壓伸入寄主表皮,形成次生菌絲。抑制黑色素的生成,附著孢就會喪失正常的侵染能力,病原菌就會喪失致病性。黑色素生物合成抑制劑是一類無毒殺活性的間接作用殺菌劑,作用于病原菌致病過程,又稱抗穿透化合物。這類不直接殺死病原菌而是抑制病害的侵入與發(fā)展的藥劑,對病原菌的選擇壓力小,作用機制復(fù)雜,病原菌抗性變異頻率較低。
三環(huán)唑抗性機理
殺菌劑產(chǎn)生抗藥性主要是由于對靶標(biāo)病原菌的作用位點單一,對于有多個作用位點的殺菌劑一般不容易產(chǎn)生抗藥性。同時幾個作用位點產(chǎn)生變異而導(dǎo)致抗藥性的頻率較低,因此許多保護性殺菌劑從開發(fā)沿用至今仍很少產(chǎn)生抗藥性。三環(huán)唑防治稻瘟病具有多種作用機制,一是主要作用于黑色素生物合成途徑中的三羥基萘酚還原酶和四羥基萘酚還原酶,并且可誘導(dǎo)水稻體內(nèi)與抗性反應(yīng)有關(guān)的酶活性提高,二是抑制病原菌對植株的在侵染。這可能是三環(huán)唑不易產(chǎn)生抗性的原因,屬于低抗性風(fēng)險的農(nóng)藥之一。
關(guān)于三環(huán)唑的抗藥性有不同的觀點,一種認(rèn)為,三環(huán)唑在離體條件下對水稻稻瘟病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)沒有影響,因而田間病原菌敏感性降低多是與用藥水平相關(guān);另一種觀點認(rèn)為,三環(huán)唑?qū)λ镜疚敛【z生長和孢子萌發(fā)有明顯影響,濃度與病原菌敏感性成相關(guān)關(guān)系。
用20 μg/mL的三環(huán)唑溶液對水稻稻瘟病病菌的菌絲生長抑制率和孢子萌發(fā)抑制率測定。結(jié)果表明:三環(huán)唑?qū)Φ疚敛【z生長抑制率僅為0.39%,抑制作用不明顯;處理孢子的平均萌發(fā)率為95%,無顯著抑制作用。
于三環(huán)唑噴霧處理稻苗24 h后接種稻瘟病菌,防效為81.3%;稻苗接種稻瘟病菌24 h后用三環(huán)唑噴霧處理,防效為35.6%;三環(huán)唑與稻瘟病菌孢子同時噴霧處理稻苗,防效為46.3%。統(tǒng)計結(jié)果表明,使用同一濃度藥劑防治稻瘟病,病菌接種與藥劑處理的時間不同,防效差異顯著。稻瘟病菌接種稻苗24 h之后,分生孢子已經(jīng)黑色素化,完成了侵入寄主的過程,此時再使用三環(huán)唑則不能很好達到防治病害的目的。
稻瘟病孢子的附著孢在24 h內(nèi)已全部黑色素化。如果三環(huán)唑的作用機制僅為抑制黑色素的生物合成,那么在黑色素已經(jīng)完全形成后用藥應(yīng)該無明顯防病效果,但從陳炎的試驗結(jié)果表明,接種后14、16和24 h用藥的防治效果分別為91.2%、90.3%和87.2%,三環(huán)唑防病并非僅僅抑制黑色素的生物合成。10 μg/mL三環(huán)唑于接種后48 h噴霧處理對再侵染的抑制效果為63.28%。說明在稻瘟病完成對寄主葉片的穿透后(25℃下,>10 h)再用三環(huán)唑處理雖然不能很好地控制藥劑處理植株病害的發(fā)展,但卻可以有效地抑制該病株作為再侵染源引起周圍其他未經(jīng)藥劑處理的健康植株的發(fā)病。誘導(dǎo)抗性是一種控制植物病害的有效方法,但投入到生產(chǎn)實際應(yīng)用得還較少,三環(huán)唑可能通過JA途徑介導(dǎo)的誘導(dǎo)抗性,阻止病原菌在植株體內(nèi)的再侵染,從而延長了藥物的持效期。
三環(huán)唑的抗性治理
黃星等的研究結(jié)果表明,三環(huán)唑防治水稻稻瘟病田間防效下降并不是水稻稻瘟病病菌產(chǎn)生抗藥性,提高用藥技術(shù),科學(xué)合理使用三環(huán)唑是關(guān)鍵。秧苗移栽前將其在三環(huán)唑藥液中浸根處理,可有效預(yù)防稻瘟病的發(fā)生,且方法簡單易行,效果顯著。在第1次藥劑處理3 d后再進行1次三環(huán)唑噴霧處理,則可提高防效,延長藥劑的持效期,可使水稻安全通過最易感病的分蘗盛期。在實際生產(chǎn)中,還應(yīng)注意藥劑的使用時間,若病原菌附著孢已經(jīng)完成黑色素化、分生孢子侵入水稻苗之后再使用三環(huán)唑,則防效下降,達不到防治病害的目的。
田間風(fēng)、雨和農(nóng)事操作等因素都有可能造成水稻葉片傷口,當(dāng)葉片有傷口時,病原菌無需完成穿透過程,可從傷口直接進入水稻體內(nèi)定殖,此種情況會導(dǎo)致藥劑失去防效,造成損失。因此,在農(nóng)事操作中要盡量避免對水稻葉片造成傷口。施用三環(huán)唑后短時間內(nèi)有降雨,會導(dǎo)致防效下降,降雨與施藥的時間間隔越短,對防效影響越大。田間使用三環(huán)唑,選擇施藥時間需保證3 h內(nèi)無降雨。
與其他藥劑混配是提高藥劑防效的重要方法之一。稻瘟病菌對三環(huán)唑與咪鮮胺和嘧菌酯EC50的相關(guān)系數(shù)分別為0.6373(R2=0.4061)和0.0877(R2=0.0077),差異均不顯著,說明三環(huán)唑與咪鮮胺和嘧菌酯之間均不存在交互抗藥性。
將咪鮮胺與三環(huán)唑混配,可以將防治稻瘟菌的不同作用機制結(jié)合起來,達到增效的作用??梢砸种凭z的生長與稻瘟菌的產(chǎn)孢量,提高對稻瘟病的治療作用,抑制病斑的擴展。藥劑的防治持效期延長,內(nèi)吸性與耐雨水沖刷能力增強。混劑較好的集中了三環(huán)唑與咪鮮胺單劑的優(yōu)點,優(yōu)勢互補,提高了藥劑防效。
雖然目前仍沒有關(guān)于大面積水稻稻瘟病對三環(huán)唑產(chǎn)生抗性的報道,三環(huán)唑目前作為我國防治水稻稻瘟病的主要藥劑,其抗性發(fā)展情況值得密切關(guān)注,在加強抗性監(jiān)測的同時,科學(xué)合理使用該藥劑也是十分重要的。