牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,在生化實驗中具有有廣泛的應(yīng)用。牛血清白蛋白一般作為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,穩(wěn)定酶活性,并可防止酶的分解和非特異性吸附。
牛血清白蛋白的作用
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護”或“載體”作用,不少酶類添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可實現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時,BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因為在不含BSA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10~20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學物質(zhì)。
不同級別的牛血清白蛋白及其用途
標準級別的牛血清白蛋白(BSA, Standard Grade),可以滿足大部分常規(guī)實驗需求,如用作免疫封閉劑、組織細胞(微生物動物及昆蟲細胞等)培養(yǎng)養(yǎng)料和培養(yǎng)成分、蛋白/酶穩(wěn)定劑以及蛋白定量標準品。
診斷級別的牛血清白蛋白(BSA,Diagnostic Grade),可以滿足大部分常規(guī)實驗需求,如用作免疫封閉劑、蛋白/酶穩(wěn)定劑、稀釋劑、載體以及蛋白標準品。另外,還可用于具高靈敏度要求的免疫檢測、細胞培養(yǎng)和雜交實驗。
無IgG、蛋白酶、DNase的牛血清白蛋白,適用于RIA和ELISA檢測中用作稀釋液和封閉劑。也可用于干細胞培養(yǎng)、雜交瘤細胞培養(yǎng)。
無脂肪酸的牛血清白蛋白(Fatty Acid Free BSA),其內(nèi)的脂肪酸含量非常低(0.02%),幾乎可忽略,且易溶解。通常用作微量元素,脂肪酸,激素和生長因子的載體蛋白,加入無血清培養(yǎng)體系。本品允許BSA內(nèi)加入某些特定的脂肪酸以促進細胞生長。適用于避免脂類或脂肪酸干擾結(jié)果的激素或膽固醇分析檢測。
無蛋白酶的牛血清白蛋白(BSA, Protease Free),經(jīng)檢測無蛋白酶殘留。主要用于重組蛋白生產(chǎn),更適合用于RIA/ELISA實驗封閉劑以及抗體稀釋液。
低內(nèi)毒素的牛血清白蛋白(BSA, Low Endotoxin),產(chǎn)品中內(nèi)毒素含量低于2.0 EU/mg,在內(nèi)毒素水平敏感的細胞培養(yǎng)中,該產(chǎn)品可作為天然載體蛋白使用;適用于無血清或化學成分限定的細胞和組織培養(yǎng)中;有效的穩(wěn)定和稀釋敏感蛋白溶液;也可用于ELISA等診斷檢測。