檢測(cè)原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠 VEGF抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的VEGF與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。

檢測(cè)類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測(cè)樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠 VEGF檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。

靈敏度：1.8 pg/mL

檢測(cè)范圍：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范圍：82-110%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF 或 VEGF-A)，又叫血管通透因子(VPF)，是一種針對(duì)胎兒和成 人的血管新生和血管生成的有效調(diào)節(jié)因子。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子屬于 PDGF 家族，該 家族蛋白的特點(diǎn)是存在 8 個(gè)保守的胱氨酸結(jié)點(diǎn)和通過(guò)反向平行二硫鍵結(jié)合的二聚體(4)。 經(jīng)過(guò)選擇性剪切，VEGF 剪接體有不同的氨基酸長(zhǎng)度。小鼠有 VEGF120、VEGF164、 VEGF188；人的 VEGF 有 VEGF121、VEGF145、VEGF164、VEGF183、VEGF189 和 VEGF206。VEGF165 是人的表達(dá)量最高、活性最強(qiáng)的一種亞型，其次是 VEGF121 和 VEGF89。小鼠也許是同樣情況。除 VEGF120 和 VEGF121 外，VEGF 的其 他亞型都含有基本的肝素結(jié)合區(qū)域，且不能自由擴(kuò)散。小鼠 VEGF164 與相應(yīng)的大 鼠蛋白氨基酸享有 97%的同源性;與人或豬的 VEGF 同源性為 89%，與牛 VEGF 同源性 為 88%，與貓、馬及犬的 VEGF 的同源性為 90%。VEGF 在多種細(xì)胞和組織中表達(dá)，包 括骨骼肌和心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、成骨細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、棕色脂肪細(xì)胞、CD34⁺ 干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維素細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞等等。VEGF 的表達(dá)受到缺氧和細(xì)胞因子的誘導(dǎo)，包括 IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素 M（oncostatin M）和腫瘤壞死因子α等。在發(fā)育過(guò)程和成體中，VEGF 亞型的表達(dá)也是不同的。

VEGF 的二聚體與兩個(gè)相關(guān)的酪氨酸激酶受體相結(jié)合，即 VEGF R1(也叫 FLt-1) 和 VEGF R2(Flk-1/KDR) 。VEGF 與受體的結(jié)合可誘導(dǎo)后者同型二聚體化和自磷酸化。這些受體擁有 7 個(gè)胞外的類免疫球蛋白域。血管內(nèi)皮細(xì)胞和一些非內(nèi) 皮細(xì)胞都有 VEGF 受體的表達(dá)。盡管 VEGF 與 VEGF R1 的親和力最高，但 VEGF R2 卻是調(diào)控 VEGF 的血管生產(chǎn)活性的主要因子。VEGF165 也結(jié)合臂板蛋白（semaphoring）受體、神經(jīng)纖毛蛋白 1（neuropilin-1），由此促進(jìn)與 VEGF R2 的復(fù)合體形成。

VEGF 因其參與血管生成而著稱。在胚胎發(fā)育過(guò)程中，VEGF 調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、 遷移和生存，并由此調(diào)控血管的密度、體積，但對(duì)于血管形成的格局并不起作 用。VEGF 通過(guò)成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的招募促進(jìn)骨骼的形成，它同時(shí)也是一個(gè)單核細(xì)胞 趨化因子。在產(chǎn)后，VEGF 維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性, 并且是大/小血管內(nèi)皮 細(xì)胞的有效絲裂劑。在成體中，VEGF 主要在傷口修復(fù)和女性的生殖周期發(fā)揮作用。 在疾病組織中，VEGF 促進(jìn)血管的通透性。因此，VEGF 通過(guò)促進(jìn)外滲和腫瘤血管生成， 參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程。針對(duì)阻斷 VEGF 活性的各種治療策略正在被用于控 制由 VEGF 誘導(dǎo)的腫瘤血管生成。體內(nèi)循環(huán)的 VEGF 水平與自身免疫行疾?。ㄈ珙?風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡）的病征程度相關(guān)。