檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗小鼠IFN-γ抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IFN-γ與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 (Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長 (參考校正波長540nm或570nm) 測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠IFN-γ檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.8 pg/mL
檢測范圍:31.2 - 2,000 pg/mL
回收率范圍:82-110%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
γ干擾素(IFN-γ,又稱為 II 型干擾素)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子,因其具 有抗病毒活性而被發(fā)現(xiàn)。IFN-γ通過其抗病毒、抗增殖和免疫調(diào)節(jié)功能在宿主 防御過程中起關(guān)鍵作用。在許多類型的細(xì)胞中,IFN-γ誘導(dǎo)細(xì)胞因子在生產(chǎn)和 上調(diào)多種膜蛋白的表達,包括 I 型和 II 型主要組織相容性復(fù)合體(MHC)抗原、Fc 受體、白細(xì)胞黏附分子和 B7 家族抗原。IFN-γ是強大的巨噬細(xì)胞效應(yīng)激活劑;它指導(dǎo) B 細(xì)胞免疫球蛋白的合成、類型轉(zhuǎn)變及分泌。IFN-γ通過抑制 Th2 細(xì)胞的分化和刺激 Th1 細(xì)胞的發(fā)育而影響 T 輔助細(xì)胞表型的發(fā)育。IFN-γ在自身免疫疾病和動脈粥樣 硬化等炎性疾病的惡化過程中起重要作用。
具有生物活性的 IFN-γ是由兩個非共價相連的具有不同程度糖基化的 20-25 kDa 亞 基組成的同源二聚體。成熟的小鼠 IFN-γ與大鼠 IFN-γ在氨基酸序列上享有 86%的 同源性,與牛、犬、棉鼠、馬、貓、人、豬及恒河猴的 IFN-γ有 38-44%的同源性。IFN-γ 二聚體先于跨膜 IFN-γ RI(α亞基)集合,再與跨膜 IFN-γ RII(β亞基) 結(jié)合,從而形成 含有兩個 α亞基和 β亞基的活性受體復(fù)合體。受體復(fù)合體中的 IFN-γ RII 可增 加配體的親和力以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率。盡管α鏈在多種細(xì)胞類型中廣泛表達, 受體β鏈卻與 IFN-γ的應(yīng)答狀態(tài)相關(guān),其表達受到嚴(yán)格調(diào)控。
在炎癥條件下,IFN-γ可由多種類型的細(xì)胞產(chǎn)生,包括樹突狀表皮/γδ T 細(xì)胞、 角質(zhì)形成細(xì)胞、外周γδ T 細(xì)胞、肥大細(xì)胞、神經(jīng)元、CD8+ T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B 細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、 CD4+T 細(xì)胞和睪丸精子細(xì)胞。
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