小檗堿誘導(dǎo) MG-63 人骨肉瘤細(xì)胞凋亡和 DNA 損傷。

小檗堿是一種從黃連根瘤的干燥根中提取的異喹啉生物堿，已被發(fā)現(xiàn)對(duì)一組已建立的癌細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的抗癌作用。在治療的人骨肉瘤細(xì)胞系中，發(fā)現(xiàn) MG-63 細(xì)胞最敏感。 本研究調(diào)查了小檗堿對(duì) MG-63 人骨肉瘤細(xì)胞的潛在遺傳毒性作用。
方法和結(jié)果：
使用 3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑溴化物測(cè)定法測(cè)定小檗堿對(duì)細(xì)胞活力的影響，并通過流式細(xì)胞術(shù)和 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定分析細(xì)胞凋亡。γH2AX 病灶形成用于檢測(cè) MG-63 細(xì)胞中的 DNA 損傷。通過 DNA 片段分析和流式細(xì)胞術(shù)確定，小檗堿以濃度和時(shí)間依賴性方式誘導(dǎo) MG-63 細(xì)胞凋亡的顯著增加。此外，與陰性對(duì)照相比，小檗堿誘導(dǎo)了 DNA 損傷的濃度和時(shí)間依賴性顯著增加。
結(jié)論：
總之，這些觀察結(jié)果表明小檗堿誘導(dǎo) MG-63 細(xì)胞凋亡和 DNA 損傷。

小檗堿通過抑制自發(fā)性高血壓大鼠頸動(dòng)脈中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來(lái)改善內(nèi)皮功能。

內(nèi)皮細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （ER） 應(yīng)激的激活導(dǎo)致氧化應(yīng)激增加，并經(jīng)常導(dǎo)致細(xì)胞死亡，這與高血壓有關(guān)。 本研究調(diào)查了小檗堿（一種從黃連根瘤中純化的植物生物堿）對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠 （SHR） 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響及其潛在機(jī)制。
方法和結(jié)果：
將來(lái)自正常血壓 WKYs 和 SHRs 的離體頸動(dòng)脈懸浮在肌長(zhǎng)圖中進(jìn)行等長(zhǎng)力測(cè)量。通過 Western blotting 測(cè)定蛋白質(zhì)磷酸化和表達(dá)。通過 DHE 染色測(cè)量活性氧 （ROS） 水平。與 WKY 動(dòng)脈相比，SHR 頸動(dòng)脈表現(xiàn)出乙酰膽堿觸發(fā)的內(nèi)皮依賴性收縮 （EDC） 和升高的 ROS 積累。此外，Western blot 分析顯示 SHR 頸動(dòng)脈中 AMPK 磷酸化降低，eIF2α 磷酸化增加，ATF3 、 ATF6 、 XBP1 和 COX-2 水平升高，而這些病理改變通過與小檗堿孵育 12 小時(shí)逆轉(zhuǎn)。此外，AMPK 抑制劑化合物 C 或顯性陰性 AMPK 腺病毒抑制小檗堿對(duì)上述標(biāo)志蛋白和 EDC 的影響。更重要的是，ROS 清除劑 tempol 和 tiron 加上 DETCA 或 ER 應(yīng)激抑制劑、4-PBA 和 TUCDA 使 ROS 和 COX-2 表達(dá)水平升高正?；?，并減弱了 SHR 動(dòng)脈中的 EDC。
結(jié)論：
綜上所述，目前的結(jié)果表明，小檗堿可能通過激活 AMPK 來(lái)減少 EDC，從而抑制 ER 應(yīng)激并隨后清除 ROS，導(dǎo)致 SHR 頸動(dòng)脈中 COX-2 下調(diào)。因此，本研究為小檗堿對(duì)高血壓的血管有益作用提供了更多見解。

小檗堿是一種天然植物產(chǎn)品，可激活 AMP 活化蛋白激酶，在糖尿病和胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下具有有益的代謝作用。

小檗堿已被證明具有抗糖尿病特性，盡管其作用方式尚不清楚。在這里，我們研究了小檗堿在兩種胰島素抵抗動(dòng)物模型和胰島素反應(yīng)細(xì)胞系中的代謝影響。
方法和結(jié)果：
小檗堿減輕了體重，并在不改變 db/db 小鼠食物攝入量的情況下顯著改善了葡萄糖耐量。同樣，小檗堿降低了高脂肪喂養(yǎng)的 Wistar 大鼠的體重和血漿甘油三酯，并改善了胰島素作用。小檗堿下調(diào)參與脂肪生成的基因的表達(dá)，并上調(diào)參與脂肪組織和肌肉能量消耗的基因的表達(dá)。小檗堿處理導(dǎo)致 3T3-L1 脂肪細(xì)胞和 L6 肌管中的 AMP 活化蛋白激酶 （AMPK） 活性增加，以磷脂酰肌醇 3' 激酶非依賴性方式增加 L6 細(xì)胞中的 GLUT4 易位，并減少 3T3-L1 脂肪細(xì)胞中的脂質(zhì)積累。
結(jié)論：
這些發(fā)現(xiàn)表明，小檗堿至少部分通過刺激 AMPK 活性在治療糖尿病和肥胖方面顯示出有益作用。

小檗堿可改善阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因小鼠模型中的 β-淀粉樣蛋白病理、神經(jīng)膠質(zhì)增生和認(rèn)知障礙。

淀粉樣蛋白前體蛋白 （APP） 異常加工衍生的 β-淀粉樣蛋白 （Aβ） 肽的積累是阿爾茨海默病 （AD） 大腦的常見病理標(biāo)志。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們?cè)u(píng)價(jià)了從中草藥黃連中提取的小檗堿 （BBR） 對(duì) TgCRND8 小鼠神經(jīng)病理學(xué)和認(rèn)知障礙的治療效果，TgCRND8 小鼠是一種成熟的 AD 轉(zhuǎn)基因小鼠模型。兩個(gè)月齡的 TgCRND8 小鼠通過口服強(qiáng)飼法接受低劑量 （25 mg/kg /天） 或高劑量的 BBR （100 mg/kg /天） 直至 6 個(gè)月大。與載體對(duì)照治療相比，BBR 治療顯著改善了學(xué)習(xí)缺陷、長(zhǎng)期空間記憶保留以及斑塊負(fù)荷。此外，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 （ELISA） 測(cè)量顯示，BBR 處理小鼠的腦勻漿中洗滌劑可溶性和不溶性 β-淀粉樣蛋白水平顯著降低。糖原合成酶激酶 （GSK）3 是參與 APP 和 tau 磷酸化的主要激酶，BBR 處理顯著抑制。我們還發(fā)現(xiàn)，在穩(wěn)定表達(dá)人瑞典突變體 APP695 （N2a-SwedAPP） 的 N2a 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中，BBR 顯著降低了 APP 的 C 端片段水平以及通過 Akt/糖原合酶激酶 3 信號(hào)通路的 APP 和 tau 過度磷酸化。
結(jié)論：
我們的結(jié)果表明，BBR 通過調(diào)節(jié) APP 加工在 TgCRND8 小鼠中提供神經(jīng)保護(hù)作用，并且有必要進(jìn)一步研究 BBR 用于治療 AD 的作用。

小檗堿逆轉(zhuǎn)人宮頸癌細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化并抑制轉(zhuǎn)移和腫瘤誘導(dǎo)的血管生成。

小檗堿可改善大鼠單側(cè)輸尿管梗阻誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化。

探討小檗堿對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻 （UUO） 大鼠模型中梗阻腎臟腎間質(zhì)纖維化 （RIF） 的潛在影響。
方法和結(jié)果：
將 48 只大鼠隨機(jī)分為 3 組： 假手術(shù)、載體處理的 UUO 和小檗堿處理的 UUO。用小檗堿 （200 mg/kg 每天） 或載體強(qiáng)飼大鼠。每組隨機(jī)選擇 8 只大鼠 kiped，并在 UUO 后第 14 天收集標(biāo)本。評(píng)估生理參數(shù)和組織學(xué)變化，使用 Masson 三色和天狼星紅染色評(píng)估 RIF，測(cè)定氧化應(yīng)激和炎癥標(biāo)志物，使用免疫組織化學(xué)或蛋白質(zhì)印跡分析測(cè)量轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β1 （TGF-β1） 、磷酸化 Smad3 （pSmad3） 和α平滑肌肌動(dòng)蛋白 （α-SMA）。其余 UUO 大鼠在第 14 天通過經(jīng)皮腎造瘺術(shù)緩解了梗阻。在腎造瘺術(shù)前 14 天和緩解后第 7 天通過彩色多普勒血流成像進(jìn)行左腎阻力指數(shù)測(cè)定。小檗堿處理顯著減弱了 UUO 誘導(dǎo)的 RIF。UUO 誘導(dǎo)的腎超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性降低增加，而升高的腎丙二醛水平顯著降低。小檗堿治療可顯著改善 UUO 誘導(dǎo)的炎癥，并降低 UUO 腎臟的 TGF-β1 、 pSmad3 和 α-SMA 表達(dá)。此外，與 UUO 組相比，小檗堿治療在 UUO 后第 14 天以及梗阻緩解后第 7 天顯著抑制了阻力指數(shù)的增加。
結(jié)論：
小檗堿治療通過抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和 TGF-β1/pSmad3 信號(hào)傳導(dǎo)改善 UUO 大鼠模型中的 RIF。

轉(zhuǎn)移是患者癌癥相關(guān)死亡的最常見原因，上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 （EMT） 對(duì)于癌癥轉(zhuǎn)移至關(guān)重要，癌癥轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟的復(fù)雜過程，包括局部浸潤(rùn)、內(nèi)滲、外滲和遠(yuǎn)處部位的增殖。 當(dāng)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移時(shí)，血管生成也是轉(zhuǎn)移播散所必需的，因?yàn)檠苊芏鹊脑黾訉⑹鼓[瘤細(xì)胞更容易進(jìn)入循環(huán)，并且代表了治療干預(yù)的合理目標(biāo)。小檗堿具有多種抗炎和抗癌生物作用。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們提供了與小檗堿抗轉(zhuǎn)移作用相關(guān)的分子證據(jù)，顯示通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶-2 和尿激酶型纖溶酶原激活劑的轉(zhuǎn)錄活性，幾乎完全抑制高度轉(zhuǎn)移性 SiHa 細(xì)胞的侵襲 （P < 0.001）。小檗堿逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β 1 誘導(dǎo)的 EMT，并導(dǎo)致上皮標(biāo)志物（如 E-鈣粘蛋白）和抑制間充質(zhì)標(biāo)志物（如 N-鈣粘蛋白和蝸牛-1）的上調(diào)。snail-1 特異性小干擾 RNA 對(duì) snail-1 的選擇性抑制也顯示 SiHa 細(xì)胞中 E-cadherin 表達(dá)增加。小檗堿還減少了體外和體內(nèi)腫瘤誘導(dǎo)的血管生成。
結(jié)論：
重要的是，體內(nèi) BALB/c 裸鼠異種移植模型和尾靜脈注射模型顯示，小檗堿治療分別通過口服強(qiáng)飼法減少了腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)表明小檗堿可以減少宮頸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和血管生成，從而構(gòu)成轉(zhuǎn)移控制的輔助治療。