背景及概述^[1]

羥基甲硝唑為甲硝唑的代謝物。甲硝唑?qū)儆谙趸溥蝾愃幬?，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，常作為驅(qū)除動物體內(nèi)寄生蟲的藥物，加入動物飼料后，造成雞蛋中甲硝唑的殘留。由于甲硝唑?qū)θ梭w有多種毒副作用，尤其是具有潛在致癌性和致遺傳性變異作用，而且甲硝唑進(jìn)入人體后能快速分布于全身，因此對雞蛋中甲硝唑及其代謝產(chǎn)物殘留的檢驗非常必要。

目前甲硝唑及其代謝物含量測定方法大多采用液相色譜法或液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，國家現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)方法中采用固相萃取法、GPC法進(jìn)行樣品預(yù)處理或采用內(nèi)標(biāo)法定量，過程繁瑣，成本較高。

檢測^[1]

方法1：雞蛋中甲硝唑及其代謝物殘留量的測定方法：

（1）提?。悍Q取雞蛋5g，置于離心管中，加入乙腈10mL，加入無水硫酸鈉5g，渦旋混勻，10000轉(zhuǎn)/分，離心5min；取上層溶液，加入10mL正己烷，渦旋10000轉(zhuǎn)/分，離心5min，下層溶液待凈化。

（2）凈化：取上述溶液5mL，加載到PRIMEHLB固相萃取柱（200mg，6cc），保持一秒一滴流速，收集全部流出液。

（3）濃縮：取4.0mL流出液氮氣吹干，加入1.0mL0.1%甲酸水-甲醇（體積比50：50）溶解殘渣，過0.2μm微孔濾膜，上LCMSMS測試。

（4）測定：采用液相色譜法進(jìn)行檢測，其中色譜柱為AcqμityBEHC（2.1mm*5mm，1.7μm），柱溫：35℃，進(jìn)樣量1μl，流動相：溶劑A為0.1%甲酸水，溶劑B為乙腈，梯度洗脫。

（5）測量結(jié)果：通過以上步驟測得雞蛋中甲硝唑及羥基甲硝唑的含量低于0.5μg/kg。

方法2：蜂王漿中硝基咪唑類藥物殘留量的方法，尤其涉及采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定蜂王漿中羥基甲硝唑、2-甲硝咪唑、羥基二甲硝咪唑、甲硝唑、二甲硝咪唑、洛硝噠唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑、羥基異丙硝唑和異丙硝唑等硝基咪唑類藥物殘留量的方法。

同時測定蜂王漿中多種硝基咪唑類藥物殘留量的檢測方法，本發(fā)明采用甲醇沉淀蛋白，提取，再采用HLB固相萃取小柱和C18固相萃取小柱凈化，采用色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定。本發(fā)明具有專屬性強、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確的特點，不僅測定硝基咪唑原藥還包括一些代謝產(chǎn)物，方法的測定低限10μg/kg，測定低限滿足目前國內(nèi)外對蜂王漿中硝基咪唑類藥物殘留量的要求?；厥章史秶鸀?0.7%~105.0%；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于12.7%。

主要參考資料

[1] CN201811088112.1雞蛋中甲硝唑及其代謝物殘留量的測定方法

[2] CN200910099612.X同時測定蜂王漿中多種硝基咪唑類藥物殘留量的檢測方法