5'-(4,4'-二甲氧基三苯基)-3'-脫氧胸苷 2'-(2-氰乙基-N,N-二異丙基)亞磷酰胺，英文名為DMT-dT Phosphoramidite，是一種亞磷酰胺類生物化學試劑，它可由雙(二異丙基氨基)(2-氰基乙氧基)膦與胸苷前體物質(zhì)通過縮合反應(yīng)制備得到，該物質(zhì)常用于生物大分子例如DNA，RNA的合成，在生物醫(yī)學研究領(lǐng)域中有一定的應(yīng)用。

制備方法

在一個干燥的反應(yīng)燒瓶中將5'-(4,4'-二甲氧基三苯基)-3'-脫氧胸苷 2'-(2-氰乙基-N,N-二異丙基)亞磷酰胺的前體物質(zhì)胸苷（1.84 mmol, 1.0 eq.）溶于2ml二氯甲烷和2ml丙酮中。然后往上述反應(yīng)混合物中緩慢地加入300 mg N-甲基咪唑（3.68 mmol, 291 μL, 2.0 eq）和665 mg 2-氰乙基-N，N，N，N'-四異丙基磷二胺（2.21 mmol, 700 μL, 1.2 eq），然后再往其中緩慢地加入1.00 g分子篩3?。在此攪拌懸浮液中緩慢地滴入230mg三氟乙酸（2.02 mmol, 159 μL， 1.1當量）于1ml二氯甲烷中，所得的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌反應(yīng)大約3h后反應(yīng)完成，然后將反應(yīng)混合物在真空下進行濃縮處理以除去有機溶劑，所得的剩余物通過硅膠柱層析法進行分離純化即可得到目標產(chǎn)物分子5'-(4,4'-二甲氧基三苯基)-3'-脫氧胸苷 2'-(2-氰乙基-N,N-二異丙基)亞磷酰胺。[1]

水解反應(yīng)

圖2 5'-(4,4'-二甲氧基三苯基)-3'-脫氧胸苷 2'-(2-氰乙基-N,N-二異丙基)亞磷酰胺的水解反應(yīng)

將0.1 M四唑溶液（1.5 mL, 0.15 mmol）加入至5'-(4,4'-二甲氧基三苯基)-3'-脫氧胸苷 2'-(2-氰乙基-N,N-二異丙基)亞磷酰胺（100 mg, 0.13 mmol），在干燥乙腈溶液（3 mL）中攪拌。在室溫下攪拌反應(yīng)30min， TLC分析（MeOH:CH2Cl2 1:4）表明起始中間體的消耗情況。然后在反應(yīng)混合物中緩慢地滴入1.0 M 的單質(zhì)碘（THF: 2,6-lutidine: H2O(2:2:1)）溶液。然后通過逐步加入Na2S2O3溶液（5mol %）來消耗溶液中多余的單質(zhì)碘，直到溶液變清。所有的有機層并將其用無水MgSO4進行干燥處理，過濾除去干燥劑并將所得得濾液在真空中濃縮，所得的剩余物通過硅膠柱色譜法純化（MeOH:EtOAc 3:7）即可得到目標產(chǎn)物分子。[2]

參考文獻

[1] Lange, Meinolf; et al, Germany Patent, Patent Number:WO2006064039.

[2] Greenberg, Marc M.; et al,Journal of Organic Chemistry (1998), 63(12), 4062-4068.