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測(cè)量葉綠素A的幾種方法比較

2024/8/26 13:26:05 作者:云霄

葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素,是一類(lèi)含脂的色素家族,位于類(lèi)囊體膜。葉綠素吸收大部分的紅光和紫光但反射綠光,所以葉綠素呈現(xiàn)綠色,它在光合作用的光吸收中起核心作用。

葉綠素與生物總量有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。生物總量/生物量是自然科學(xué)中非常重要的參數(shù),研究和監(jiān)測(cè)它可指導(dǎo)人們的生產(chǎn)和生活。如下是一般生物量與葉綠素A的關(guān)系:生物量Biomass = 葉綠素a Chlorophyll a x 67 (數(shù)據(jù)來(lái)自Raschke 1993)。

葉綠素 A

測(cè)量方法

(1)人工顯微鏡檢查計(jì)算法

主要設(shè)備:顯微鏡

(2)分光光度法

主要設(shè)備:分光光度計(jì),離心機(jī),過(guò)濾器等

(3)高效液相色譜法(HPLC)

主要設(shè)備:液相色譜儀

(4)熒光分析法

主要設(shè)備:熒光法傳感器

優(yōu)缺點(diǎn)比較

(1)人工顯微鏡檢查計(jì)算法

優(yōu)點(diǎn):所需設(shè)備簡(jiǎn)單。

缺點(diǎn):需要人工處理水樣,需要專(zhuān)業(yè)人員操作,人工計(jì)數(shù)重復(fù)性差,無(wú)法排除菌落和其它藻類(lèi)干擾。必須在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,無(wú)法在線實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

(2)分光光度法

優(yōu)點(diǎn):有中國(guó)國(guó)標(biāo)HJ897-2017和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO 10260 。重復(fù)性好。

缺點(diǎn):測(cè)量和操作步驟復(fù)雜,需要專(zhuān)業(yè)儀器和專(zhuān)業(yè)人員,必須在實(shí)驗(yàn)室中完成。各種標(biāo)準(zhǔn)中使用的公式不一樣,導(dǎo)致在不同標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法下得到的水樣讀數(shù)不同。

(3)高效液相色譜法(HPLC)

優(yōu)點(diǎn):分辨率高,低檢出限,準(zhǔn)確度高。

缺點(diǎn):試用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn),需要有害有機(jī)溶劑和昂貴的設(shè)備以及專(zhuān)家級(jí)別的操作人員在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。無(wú)法在線監(jiān)測(cè)。

(4)熒光分析法

優(yōu)點(diǎn):水樣無(wú)需預(yù)先處理,靈敏度高,低檢出限,重復(fù)性好,不破壞葉綠素細(xì)胞,可在線實(shí)時(shí)測(cè)量。

缺點(diǎn):fDOM,濁度以及環(huán)境光對(duì)熒光測(cè)試干擾。水溫及pH對(duì)葉綠素A熒光效應(yīng)影響和干擾。

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