背景及概述[1]
噬菌體是寄生在細菌或放線菌內(nèi)的病毒的總稱。體積微小,要借助電子顯微鏡才能看到。其形態(tài)為蝌蚪狀、球狀、纖維狀等。按其形態(tài)、核酸類型及不同寄主,給予不同名稱,例如T2、T4、T6、T7,沙門氏菌的P22等。在自然條件下,不能感染高等動物和植物。有的侵入細菌后,即可進行營養(yǎng)繁殖,形成子代噬菌體,導(dǎo)致細菌裂解,稱為烈性噬菌體。有的侵入細菌后,不行營養(yǎng)繁殖,其內(nèi)含核酸附著或整合在細菌基因組上,并不損害寄主細胞,而與其基因組同步復(fù)制,隨著細胞分裂傳給子代,稱之為溫和噬菌體。內(nèi)含此噬菌體的菌稱為溶源性細菌,此菌內(nèi)的噬菌體核酸稱為原噬菌體。在發(fā)酵工業(yè)中,時常發(fā)生噬菌體污染,例如鏈霉素產(chǎn)生菌的灰色鏈霉菌噬菌體,谷氨酸產(chǎn)生菌的谷氨酸棒桿菌噬菌體等,使產(chǎn)量下降,造成巨大經(jīng)濟損失。有些致病菌噬菌體可用于治療相應(yīng)疾病。噬菌體亦是分子生物學(xué)研究的好材料。
T7gp4蛋白來源于T7噬菌體,是其復(fù)制系統(tǒng)的一種核心蛋白,它既具有引發(fā)酶的作用也具有解旋酶的活性,主要應(yīng)用于全基因組擴增(WGA),且在擴增環(huán)狀全基因組上有非常大的優(yōu)勢,常用于病毒檢測。噬菌體T7基因4編碼產(chǎn)物T7gp4B蛋白(T7Gene4,gp4),分子量56kD,參與噬菌體的DNA復(fù)制。T7gp4B蛋白為T7gp4A蛋白的截短產(chǎn)物,其蛋白N端的缺失導(dǎo)致該蛋白Primase活性缺失,但保留了解旋酶活性。據(jù)文獻報道該蛋白具有dTTP水解活性,其具有5'-3'解旋酶(helicase)活性。該蛋白為基因工程產(chǎn)物,通過重組表達純化獲得的可溶產(chǎn)物。T7gp4蛋白-20℃可保存3年。
主要參考資料
[1]中國小學(xué)教學(xué)百科全書·自然卷