介紹

羅米地辛，英文名為Romidepsin，其化學(xué)名稱為(1S,4S,7Z,10S,16E,21R)?7一乙叉基一4，21?二異丙基?2?氧雜?12，13一二硫?5，8，20，23?四氮雜雙環(huán)[8，7，6]二十三碳?16?烯?3，6，9，19，22?五酮，分子式為C24H36N4O6S2，是一種雙環(huán)四肽，具有穩(wěn)定的疏水結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)中特有的二硫鍵是發(fā)揮活性的關(guān)鍵基團(tuán)。2009年，羅米地辛獲得美國食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)，用于治療皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)。

圖一 羅米地辛

應(yīng)用

羅米地辛為組蛋白去乙?；?HDACs)抑制劑，透過腫瘤細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞內(nèi)二硫鍵被谷胱甘肽還原成巰基，與鋅依賴的HDACs中的鋅相結(jié)合而發(fā)揮抑制HDACs的作用，從而進(jìn)一步誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡。

合成

羅米地辛的合成一共分為六步，分別為：

合成步驟一：稱取替代度為0.5mmol/g的CTC Resin 2g(合成規(guī)模1mmol)，加入到固相反應(yīng)柱中，用DMF洗滌2次，用DMF溶脹樹脂30分鐘后，稱取1.01g Fmoc?Val?OH，0.38g HOBt、0.03gDMAP用DMF溶解，冰水浴下加入0.6mL DIPEA活化后，加入上述裝有樹脂的反應(yīng)柱中，反應(yīng)2小時反應(yīng)結(jié)束，用DMF洗滌6次，得到中間體I。

合成步驟二：固相反應(yīng)柱中中間體I用20％DBLK脫除Fmoc保護(hù)基團(tuán)，然后用DMF洗滌6次，取少量樹脂進(jìn)行茚三酮試驗(yàn)，樹脂顯色。稱取1.02g Fmoc?Thr?OH、0.38g HOBt、0.03gDMAP溶于體積比為1:1的DMF和NMP混合溶液，冰水浴下加入0.3mL DIC活化后，加入到固相反應(yīng)柱，室溫反應(yīng)2h(反應(yīng)終點(diǎn)以茚三酮法檢測為準(zhǔn)，如果樹脂無色透明，則反應(yīng)完全，樹脂顯色，表示反應(yīng)不完全，需再偶聯(lián)反應(yīng)1h)。重復(fù)上述脫除Fmoc保護(hù)和加入相應(yīng)氨基酸偶聯(lián)的步驟，依次完成Fmoc?D?Cys(Trt)?OH、Fmoc?D?Val?OH和(R)?3?叔丁氧基?7?巰基?4?庚烯酸得到中間體V。

合成步驟三：稱取0.03gDMAP、0.20g對甲苯磺酰氯用10mL二氯甲烷溶解后，加入0.60ml哌啶。然后將混合液加入到含有中間體V的固相反應(yīng)柱中，反應(yīng)2小時，反應(yīng)結(jié)束后用DMF洗滌6次，再用甲醇收縮3次，真空干燥得到3.0g中間體VI。

合成步驟四：將步驟3中得到的3.0g中間體VI樹脂加入到50ml燒瓶中，配置裂解試劑(體積比，TFA：EDT：PhOH：H2O＝95：5：3：2)，將裂解試劑30mL倒入燒瓶中，室溫反應(yīng)2小時。反應(yīng)結(jié)束，過濾樹脂，收集濾液。滴加至300ml乙醚試劑中，離心、無水乙醚洗滌、真空干燥，得到0.70g中間體VII，純度80.52％。

合成步驟五：將步驟4得到的0.70g中間體VII溶于5mL70％的乙腈水溶液，加入六水合氯化鐵0.20g，35℃反應(yīng)5小時。反應(yīng)結(jié)束后加入飽和氯化銨溶液10mL，然后用二氯甲烷萃取三次，依次用飽和食鹽水洗、水洗，無水硫酸鈉干燥、過濾、濃縮，得0.60g中間體VIII，純度75.5％。

合成步驟六：在1000mL的反應(yīng)瓶中，依次加入3.8g三苯基膦、0.6g對甲苯磺酸、2.2mL偶氮二甲酸二異丙酯和500mL四氫呋喃?；旌弦菏覝?cái)嚢?0分鐘，然后冷卻至0℃，滴加溶有實(shí)施例五制得的0.60g中間體VIII的四氫呋喃溶液100mL，兩小時滴完。0℃反應(yīng)三小時后，濃縮得油狀物。此油狀物用水稀釋10倍采用RP?HPLC系統(tǒng)，波長230nm，色譜柱為50×250mm反相C18柱，0.2％醋酸水溶液/乙腈溶液流動相純化，收集目的峰餾分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，凍干得到羅米地辛0.25g，HPLC純度98.5％，總收率40.5％。

圖二 羅米地辛的合成

參考文獻(xiàn)

[1]陳學(xué)明,林欣媛,宓鵬程,等. 一種羅米地辛的合成方法[P]. 廣東?。篊N201811555690.1,2022-03-08.