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癸酸鈉抗性菌株的篩選助力產達托霉素的發(fā)酵

2024/1/23 8:41:36

背景技術

癸酸鈉又名十烷酸鈉鹽,CAS號:1002-62-6,分子式:C10H19NaO2,分子量:194.25,熔點:240°C (dec.),儲存條件:2-8°C,蒸汽壓:0.00355mmHg at 25°C,溶解度:在水中的溶解度0.1g/mL,澄清,無色,是白色至淺黃色至淺橙色結晶粉末。

癸酸鈉

為提高達托霉素產生菌玫瑰孢鏈霉菌的發(fā)酵能力,通過篩選癸酸鈉抗性菌株,優(yōu)化其發(fā)酵瓶補加正癸酸的方法,提高達托霉素的搖瓶效價值。達托霉素是一種環(huán)狀脂肽類抗生素,用于治療革蘭氏陽性感染,達托霉素由玫瑰孢鏈霉菌發(fā)酵產生,發(fā)酵代謝產物中活性最強的為A21978C,是一組包含不同長度脂酰側鏈的環(huán)脂肽復合物,為達托霉素的母核,是由13個氨基酸組成的環(huán)十肽結構。A21978C含有許多組分,結構雖然相似,但抑菌活性和細胞毒性存在很大差異,其中達托霉素(A21978C)的治療指數(shù)最高,在發(fā)酵過程中加入外源性前體癸酸,直接參與達托霉素的合成,可提高達托霉素在A21978C復合物中的比重。

方法與結果

癸酸鈉抗性菌株篩選

當癸酸鈉濃度小于0.4g/L時,菌體生長良好,隨著癸酸鈉濃度的增加,菌體生長情況變差,當癸酸鈉濃度為1.2g/L時,對應的抗性平板內沒有菌落生長,癸酸鈉的最小抑制濃度為1.2g/L。同時觀察到抗性平板上的菌落外觀隨著癸酸鈉濃度的增加,由玫紅色漸變?yōu)榘咨L速度隨之變慢,菌落變小,菌落數(shù)隨著濃度的增加變少。

選取癸酸鈉濃度為0.2g/L及以上濃度的單菌落共568個進行搖瓶初篩驗證,結果顯示有32個單菌落效價值普遍高于對照組,對32個單菌落進行復篩搖瓶驗證,搖瓶效價值最高為43.4mg/L,對應菌落號為TR21-29,作為補加正癸酸試驗用菌株。

參考文獻

[1]顧晶,石彥鵬,牛春,等. 癸酸鈉抗性菌株產達托霉素的發(fā)酵補料策略[J]. 黑龍江農業(yè)科學,2022(4):81-84. DOI:10.11942/j.issn1002-2767.2022.04.0081.

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