簡(jiǎn)介

鳥苷酸亦稱一磷酸鳥苷，簡(jiǎn)稱GMP。是RNA的組成成分。堿解RNA得到的GMP是2-磷酸鳥苷和3-磷酸鳥苷的混合物。用稀酸水解GMP可生成鳥嘌呤、D-核酸和磷酸。用蛇毒磷酸二酯酶處理RNA生成5-磷酸鳥苷。在生物體內(nèi)由次黃苷酸生成，此外也由鳥嘌呤或鳥苷生成。一般而言鳥苷酸平均含有7個(gè)分子結(jié)晶水，無臭，有特殊的香菇鮮味。易溶于水；微溶于乙醇；吸濕性強(qiáng)。在一般的食品加工條件下，對(duì)酸、堿、鹽和熱均穩(wěn)定[1]。

合成

圖1鳥苷酸的合成路線

方法一：含有大腸桿菌JM109/pEPI370的質(zhì)粒pEPI370接種到50ml的L培養(yǎng)基中，在37°C下培養(yǎng)16小時(shí)后，通過離心從培養(yǎng)液中收集細(xì)胞，獲得細(xì)菌細(xì)胞在水中的鳥苷晶體漿料和核苷漿料，以及研磨機(jī)（瑞士WAB制造的DYNO-MILL）進(jìn)行晶體的粉碎。在目前的條件下，改變研磨時(shí)間等條件，獲得了不同粒度的晶體。每單位重量的比表面積比為0.2m2/g，研磨后增加到0.4m2/g以上，在5’-鳥苷酸的下一步生產(chǎn)中，將焦磷酸29.3g和未研磨的鳥苷晶體或研磨晶體的漿液7.5g（鳥苷含量）在水溶液中混合，用氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)至4.5，然后加入100mg上述物質(zhì)制備，使最終體積調(diào)節(jié)至100ml，并且通過在30°C下進(jìn)行40小時(shí)的反應(yīng)來測(cè)量生成的5’-鳥苷酸的量。結(jié)果，當(dāng)使用研磨晶體作為底物時(shí)，與使用未研磨晶體作為基質(zhì)的情況相比，磷酸化反應(yīng)進(jìn)展良好，5’-鳥苷酸形成產(chǎn)率提高了不少于14%，磷酸產(chǎn)率提高了不少於1.4%。最終將上述溶液減壓旋蒸然后通過高效制備液相純化得到標(biāo)題化合物鳥苷酸。合成路線如圖1所示。

方法二：將21.5g（鳥苷含量）的酸性焦磷酸鹽29.3g漿料、鳥苷的粉碎晶體（表面積比0.6m2/g）在水溶液中混合，并用燒堿將pH調(diào)節(jié)至約4.5。加入上述細(xì)菌細(xì)胞400mg或300mg，并調(diào)節(jié)至最終體積為100ml。并測(cè)量每0.5小時(shí)產(chǎn)生的5’-鳥苷酸的量。在水浴中進(jìn)行反應(yīng)，通過控制水浴的溫度來控制反應(yīng)溫度，經(jīng)過12h的反應(yīng)，加水猝滅，然后通過硅膠柱色譜純化得到標(biāo)題化合物鳥苷酸。合成路線如圖1所示[2]。

參考文獻(xiàn)

[1] 魏仕夢(mèng),李欣,張予陽. 非血紅素依賴的可溶性鳥苷酸酶激活劑研究進(jìn)展 [J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2023, 40 (07): 955-963. DOI:10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2021.1107

[2]Iida, Iwao; et al. Enzymic method of nucleoside-5'-phosphate. Japan, JP2002000289 A 2002-01-08.