在細(xì)胞周期檢測(cè)或細(xì)胞死活鑒別中，經(jīng)常會(huì)用到一些核酸染料，最常用的就是碘化丙啶（簡(jiǎn)稱(chēng)PI）。然而，PI用著方便、簡(jiǎn)單、便宜，但可能給管路清洗帶來(lái)很大的麻煩，所以很多中心不愿意將機(jī)器給大家用來(lái)做細(xì)胞周期。另外，不僅僅是碘化丙啶，其它如7-AAD等核酸染料均存在粘附液路的風(fēng)險(xiǎn)。

但實(shí)際上，只要清洗得當(dāng)，還是沒(méi)關(guān)系的，大家無(wú)需過(guò)于擔(dān)心。這里介紹一些國(guó)外FLOWER總結(jié)的清洗絕招，腦洞大開(kāi)！大家可根據(jù)需要選擇一種試試。

1.先跑一會(huì)兒DMSO，然后再用蒸餾水沖洗

由于PI在DMSO中的溶解度較高，所以可以考慮用DMSO先沖洗液路，但是國(guó)外有站友試了之后效果不是特別理想。

另外一個(gè)選擇就是先用DMSO跑5分鐘，然后再用Beckman Coulter的Clenz液跑5分鐘，最后再用蒸餾水跑5分鐘。

2.先跑乙醇，再用蒸餾水沖洗

是利用乙醇溶解度高的原理，但似乎效果也一般。

3.用次氯酸鈉

用終濃度0.1～0.5％的次氯酸鈉溶液。

對(duì)于特別粘沖的染料（例如AO、7-AAD等），有BD儀器用戶(hù)建議在BD沖洗步驟上增加70％乙醇，也就是說(shuō)：

（1）將終濃度0.1～0.5％的次氯酸鈉溶液浸泡上樣針，將支撐架打到一邊，讓上樣針吸取1分鐘，然后支撐架打回來(lái)，按照正常跑5分鐘。

（2）用70％乙醇，重復(fù)步步驟。

（3）用蒸餾水，重復(fù)步步驟。

切記，每根管子跑完之后都要扔掉，不要重復(fù)使用。

4.PI喜歡DNA，那么我就用DNA來(lái)解決

這個(gè)原理很有意思，就是利用PI容易與DNA結(jié)合的方式，用放置了很長(zhǎng)時(shí)間的外周血樣本，由于標(biāo)本中的細(xì)胞基本上都碎了，所以白細(xì)胞釋放出大量的DNA。新加坡的Te Chih推薦可以用這類(lèi)標(biāo)本上機(jī)，利用DNA結(jié)合殘留的PI。

5.用咖啡因

這個(gè)想法很有意思，實(shí)屬腦洞大開(kāi)，但卻有文章作為支撐。

大多數(shù)熒光染料通過(guò)靜電可粘附在流式細(xì)胞儀液路上，從而對(duì)后續(xù)樣品中的細(xì)胞產(chǎn)生影響。Bedner等人觀察到，除了漂白水以外，也可以利用咖啡因溶液（例如以PBS配制的50mM咖啡因溶液）去除液路中或已被熒光染料污染的細(xì)胞中的粘附熒光素?？Х纫?qū)I或吖啶染料有相當(dāng)高的親和力，并且可以用于從染色的細(xì)胞、染色的凝膠以及靜電結(jié)合這些染料的細(xì)胞、玻璃或塑料表面去除這些異常粘附的染料。