介紹^[1]

Bad基因首先從鼠的cDNA文庫(kù)中克隆鑒定出，其后又克隆出人的同源基因，由Yang等 于1995年發(fā)現(xiàn)，其編碼一個(gè)含204個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量22-1×103的蛋白質(zhì)。雙雜交和序列分析發(fā)現(xiàn)，Bad可與Be1-2和Bd-xL結(jié)合形成異源二聚體，具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡作用，故名Bad(Bcl-xL/Bcl-2 associateddeath promoter)，它存在Bc1-2家族成員BH3同源結(jié)構(gòu)域和序列。

與Bax、Bak、Bc1-2相似，此結(jié)構(gòu)域是Bad與Bcl-2家族蛋白結(jié)合所必需的。Bad的促凋亡作用依賴(lài)于與Bel-2或Bc1-xL結(jié)合，胞外的Bad還能通過(guò)與一種細(xì)菌毒素的轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)構(gòu)域結(jié)合進(jìn)入細(xì)胞，誘導(dǎo)凋亡。Bad在某些病毒感染時(shí)還可與病毒受體結(jié)合，可能通過(guò)酪氨酸激酶途徑激活細(xì)胞凋亡。Bad是與BcI-xL和Bd-2相關(guān)的細(xì)胞死亡促進(jìn)因子，是調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要成員，主要通過(guò)線(xiàn)粒體途徑參與細(xì)胞凋亡。

在缺血性損傷，腫瘤發(fā)生和發(fā)展等多方面發(fā)揮調(diào)控細(xì)胞凋亡的作用，其促凋亡作用與其自身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和與其他Bc1-2家族成員的相互作用有關(guān)。應(yīng)用其調(diào)控凋亡的作用，在缺血損傷中若從避免其去磷酸化人手阻斷Bad 通路激活可達(dá)到抗凋亡目的或在腫瘤的治療中，促進(jìn)其磷酸化來(lái)抑制細(xì)胞惡性化。隨著對(duì)凋亡及其調(diào)節(jié)因子的不斷認(rèn)識(shí)，提醒人們通過(guò)抑制或促進(jìn)基因表達(dá)來(lái)達(dá)到基因治療的目的，為臨床工作提供更好的醫(yī)治思路。

Bad在外周及中樞神經(jīng)元、淋巴細(xì)胞、骨髓造血細(xì)胞、生殖細(xì)胞及許多上皮細(xì)胞中均有表達(dá)。近年來(lái)其在缺血損傷方面的研究受到重視，腫瘤方面的研究多見(jiàn)。腦缺血后Bel-2基因家族在腦內(nèi)表達(dá)有明顯的改變，此方面的研究是新的熱點(diǎn)。

Phospho-Bad(Ser112)抗體(Phospho-Bad(Ser112)antibody)是用經(jīng)過(guò)修飾的含磷酸化Ser112的一段mouse Bad多肽作為抗原制備而成的小鼠單克隆抗體。Phospho-Bad(Ser112)抗體識(shí)別Ser112位點(diǎn)磷酸化的Bad，可以檢測(cè)內(nèi)源性的Phospho-Bad(Ser112)，不識(shí)別其他位點(diǎn)磷酸化的Bad或磷酸化的其它Bcl-2家族蛋白。

Phospho-Bad(Ser112)抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。Phospho-Bad(Ser112)抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

對(duì)于Phospho-Bad(Ser112)抗體，Western檢測(cè)時(shí)一抗要4℃緩慢搖動(dòng)過(guò)夜，如果僅短時(shí)間與一抗孵育檢測(cè)效果較差。在Western實(shí)驗(yàn)后，請(qǐng)注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過(guò)的稀釋抗體，4℃保存。

主要參考資料

[1] 何家璇, 薛榮亮. Bad 蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用[D]. , 2007.