背景^[1][2]

熱休克蛋白（heat shock protein, HSP）是在各種應激因素特別是高溫環(huán)境因素的誘導下產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)，廣泛存在于人、動物、微生物和植物的細胞中，能提高細胞對抗各種損傷因素的能力，并促進細胞對各種刺激所造成的損傷進行自身修復，具有重要的生物學功能，并與腫瘤細胞的增殖密切相關，HSPs- 肽復合物通過活化體內(nèi)多個CTL 克隆，可望特異殺傷同一種腫瘤內(nèi)所有腫瘤細胞，打破免疫耐受，消滅殘存瘤組織，克服目前腫瘤中難以解決的抗原多變性及細胞異質(zhì)性等困難。

根據(jù)其分子量的不同，可分為HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子熱休克蛋白亞家族。HSP60是HSPD1基因的產(chǎn)物，較早的研究認為HSP60是線粒體內(nèi)分子伴侶(也被稱為Cpn60)。在生理條件下HSP60有輔助新生非折疊或錯誤折疊的多肽達到一種天然構(gòu)象的重要作用，并且與線粒體HSP10協(xié)同作用(HSP10也位于線粒體內(nèi)并被稱為Cpnl0)。HSP60主要定位于細胞線粒體內(nèi)，生理狀態(tài)下，協(xié)助細胞多肽或蛋白質(zhì)正確轉(zhuǎn)運、折疊和裝配。

近年發(fā)現(xiàn)HSP60與癌癥形成有關，可促進腫瘤生存和增生 ；其表達與腫瘤的惡性程度和復發(fā)性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤的形成有關 ；具有腫瘤診斷和推斷預后等作用。有研究利用人Rb石蠟切片研究HSP60在未接受治療的Rb患者視網(wǎng)膜內(nèi)原發(fā)Rb細胞和脈絡膜、視神經(jīng)等侵襲部位的Rb細胞的表達差異，初步分析了HSP60在Rb細胞的定位特點及其與Rb細胞凋亡的關系和可能的作用機制。結(jié)果表明Rb腫瘤細胞在從視網(wǎng)膜內(nèi)向外侵襲的過程中，通過升高HSP60、減少凋亡來促進侵襲部位腫瘤細胞的存活。

HSP60小鼠單克隆抗體通過免疫HSP60重組蛋白獲得，可用于WB（1:1000-1:10000）、IP（1:1000-1:10000）、IHC（1:20-1:200）、IF（1:20-1:200）。 HSP60小鼠單克隆抗體-20℃保存，Western-抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

如果HSP60小鼠單克隆抗體用于Western blot (WB)、免疫熒光(IF)、免疫細胞化學(ICC)等實驗，請注意回收使用過的稀釋抗體?；厥盏目贵w通常至少可以重復使用5-10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存?；厥蘸笾貜褪褂玫目贵w，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。

如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。 提供的Western一抗稀釋液也可以用于免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)、免疫細胞化學(ICC)等適當用途。如果希望獲得的檢測效果，請考慮使用上述檢測專用的一抗稀釋液。

主要參考資料

[1] 羅鑫, 丁運剛, 葉慧菁, 等. HSP60 在人視網(wǎng)膜母細胞瘤中表達的研究[J]. 眼科新進展, 2015, 35(6): 549-553.

[2] 吳大鵬, 胡治平, 楊和平. 熱休克蛋白 20 與高爾基體在沙鼠前腦缺血再灌注后的變化及相關性[D]. 中華醫(yī)學會, 2012.