介紹^[1]

Bad基因首先從鼠的cDNA文庫中克隆鑒定出，其后又克隆出人的同源基因，由Yang等 于1995年發(fā)現(xiàn)，其編碼一個含204個氨基酸，分子質(zhì)量22-1×103的蛋白質(zhì)。雙雜交和序列分析發(fā)現(xiàn)，Bad可與Be1-2和Bd-xL結(jié)合形成異源二聚體，具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡作用，故名Bad(Bcl-xL/Bcl-2 associateddeath promoter)，它存在Bc1-2家族成員BH3同源結(jié)構(gòu)域和序列。

與Bax、Bak、Bc1-2相似，此結(jié)構(gòu)域是Bad與Bcl-2家族蛋白結(jié)合所必需的。Bad的促凋亡作用依賴于與Bel-2或Bc1-xL結(jié)合，胞外的Bad還能通過與一種細(xì)菌毒素的轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)構(gòu)域結(jié)合進(jìn)入細(xì)胞，誘導(dǎo)凋亡。Bad在某些病毒感染時還可與病毒受體結(jié)合，可能通過酪氨酸激酶途徑激活細(xì)胞凋亡。Bad是與BcI-xL和Bd-2相關(guān)的細(xì)胞死亡促進(jìn)因子，是調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要成員，主要通過線粒體途徑參與細(xì)胞凋亡。

在缺血性損傷，腫瘤發(fā)生和發(fā)展等多方面發(fā)揮調(diào)控細(xì)胞凋亡的作用，其促凋亡作用與其自身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和與其他Bc1-2家族成員的相互作用有關(guān)。應(yīng)用其調(diào)控凋亡的作用，在缺血損傷中若從避免其去磷酸化人手阻斷Bad 通路激活可達(dá)到抗凋亡目的或在腫瘤的治療中，促進(jìn)其磷酸化來抑制細(xì)胞惡性化。隨著對凋亡及其調(diào)節(jié)因子的不斷認(rèn)識，提醒人們通過抑制或促進(jìn)基因表達(dá)來達(dá)到基因治療的目的，為臨床工作提供更好的醫(yī)治思路。

Bad在外周及中樞神經(jīng)元、淋巴細(xì)胞、骨髓造血細(xì)胞、生殖細(xì)胞及許多上皮細(xì)胞中均有表達(dá)。近年來其在缺血損傷方面的研究受到重視，腫瘤方面的研究多見。腦缺血后Bel-2基因家族在腦內(nèi)表達(dá)有明顯的改變，此方面的研究是新的熱點(diǎn)。

Bad抗體為無色溶液，其濃度為0.5 mg/ml，溶解于包含有50%甘油，1% BSA， 0.02%硫柳汞的PBS （pH 7.2）緩沖液中。Bad抗體(Bad antibody)用重組表達(dá)的Bad蛋白進(jìn)行適當(dāng)修飾后免疫rabbit，通過兔單抗技術(shù)，獲得穩(wěn)定分泌Bad兔單抗的真核表達(dá)細(xì)胞株，最后用親和純化技術(shù)得到的高純度抗體。經(jīng)檢測驗(yàn)證，可與人、小鼠、大鼠、猴種屬來源的Bad蛋白發(fā)生免疫反應(yīng)，可檢測到22kDa Bad蛋白，并且它不與相關(guān)家族成員交叉反應(yīng)。

Bad抗體-20℃保存，Western抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western-抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。Bad抗體可用于Western印跡分析（1-2μg/ ml），免疫沉淀（4-8μg/ ml）和免疫組織化學(xué)（20-40μg/ ml），但是條件應(yīng)單獨(dú)確定。

主要參考資料

[1] 何家璇, 薛榮亮. Bad 蛋白對細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用[D]. , 2007.