背景[1-3]
油紅O染色液(培養(yǎng)細胞專用)簡稱ORO染色液，可顯示最小的脂滴，可優(yōu)先為脂類從溶劑中吸附染料。標本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福爾馬林)。脂肪陽性染色結果呈橘黃至紅色，但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。
細胞油紅O染色圖
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機溶劑(如乙醇、乙醚等)。
人體的脂肪主要有兩種：1、儲存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。
2、結構脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一，在氧化時釋放出能量。
中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料，最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。
油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑，較易不甘油三脂結合呈小脂滴狀，不磷脂結合力稍差，其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。
染料在細胞內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質(zhì)而使脂肪染色。
應用[4][5]
用于抗精神病藥物對3T3-L1前脂肪細胞分化及脂聯(lián)素蛋白表達水平的影響
研究氟哌啶醇、氯氮平、奧氮平、喹硫平、利培酮、齊拉西酮6種抗精神病藥物對3T3-L1前脂肪細胞誘導分化及成熟脂肪細胞中脂聯(lián)素表達水平的影響。
方法1.應用標準流程對3T3-L1前脂肪細胞進行復蘇、培養(yǎng)、傳代,并采用傳統(tǒng)的激素雞尾酒方法誘導其分化成為成熟脂肪細胞,應用油紅O對誘導分化成熟的脂肪細胞進行染色,鑒定其分化程度。
2. 將不同濃度的氟哌啶醇、氯氮平、奧氮平、喹硫平、利培酮、齊拉西酮（均采用0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、四種濃度、并設置空白對照及溶媒（DMSO）對照組）加入誘導分化液中對3T3-L1前脂肪細胞進行干預,誘導分化至第8天,用油紅O染色后顯微鏡下觀察并拍照記錄。
3. 應用不同濃度的氟哌啶醇、氯氮平、奧氮平、喹硫平、利培酮、齊拉西酮（均采用0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、四種濃度、并設置空白對照及溶媒（DMSO）對照組）對分化成熟的脂肪細胞分別干預24小時及48小時,利用Western-blot檢測脂聯(lián)素蛋白表達水平。
結果1.通過傳統(tǒng)激素雞尾酒方法成功誘導了3T3-L1前脂肪細胞分化成熟。
2.油紅O染色發(fā)現(xiàn)：較低濃度氟哌啶醇、氯氮平、奧氮平、喹硫平、齊拉西酮干預的細胞成脂率顯著高于溶媒對照組（P<0.05）,但隨著抗精神病藥物濃度升高,細胞中脂滴數(shù)量減少；較高濃度的各種藥物的細胞成脂率則顯著低于溶媒對照組,且隨濃度升高脂滴數(shù)量減少。而各濃度利培酮干預的細胞成脂率均顯著低于溶媒對照組（P<0.05）。
參考文獻
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[3]Clozapine impairs insulin action by up‐regulating akt phosphorylation and Ped/Pea‐15 protein abundance[J].FabioPanariello,GiuseppePerruolo,AngelaCassese,FerdinandoGiacco,GinevraBotta,Alessia P.M.Barbagallo,GiovanniMuscettola,FrancescoBeguinot,PietroFormisano,Andreade Bartolomeis.J.Cell.Physiol..2012(4)
[4]Body Mass Index Increase,Serum Leptin,Adiponectin,Neuropeptide Y and Lipid Levels during Treatment with Olanzapine and Haloperidol[J].N.R.B.Raposo,A.S.Ferreira,W.F.Gattaz.Pharmacopsychiatry.2011(05)
[5]徐保彥.抗精神病藥物對3T3-L1前脂肪細胞分化及脂聯(lián)素蛋白表達水平的影響[D].中南大學,2013.