背景技術(shù)

山萸肉是山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉，是四十種極為常用的名貴中藥之一?，F(xiàn)代研究表明，環(huán)烯醚萜苷類成分為山萸肉的重要活性物質(zhì)，具有抗炎、保肝、免疫抑制等活性。目前的藥理學(xué)研究已經(jīng)初步揭示了其中莫諾苷、馬錢苷、山茱萸新苷等成分的活性，而其它環(huán)烯醚萜苷類成分的藥理作用目前尚不明確。文獻研究表明莫諾苷具有改善糖尿病并發(fā)癥和減輕腦缺血損傷等作用，具有抗炎、抗氧化、和神經(jīng)保護等活性。7-O-乙基莫諾苷為山萸肉中的一種環(huán)稀醚砲苷類成分(含量約為0.05?0.06mg/g)，含有莫諾苷骨架結(jié)構(gòu)，然而其是否具有莫諾苷類似的藥理活性還未見系統(tǒng)的研究。由于7-O-乙基莫諾苷在山萸肉飲片中含量較少，從飲片中分離、純化不能較好地滿足體內(nèi)外藥理活性研究的需要。因此，本發(fā)明研發(fā)7-O-乙基莫諾苷的轉(zhuǎn)化合成的方法，在此基礎(chǔ)上對7-O-乙基莫諾苷的體內(nèi)外抗炎作用進行了系統(tǒng)的研究。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的:本發(fā)明的目的是提供一種7-O-乙基莫諾苷的新制備方法，并且本發(fā)明考察7-O-乙基莫諾苷的體內(nèi)外抗炎作用。

技術(shù)方案:為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:

7-O-乙基莫諾苷的制備方法，包括以下步驟:

(1)溶解:取山茱萸環(huán)烯醚萜總苷為原料，加原料重量10?20倍體積的乙醇，超聲溶解；

(2)調(diào)pH:超聲溶解后，調(diào)節(jié)溶液的pH值至1?3或者加入乙?；噭?；

(3)加熱:加熱回流提取10?20h，過濾得提取液，濃縮得浸膏；

(4)純化、結(jié)晶:將浸膏溶于乙酸乙酯，過濾，除去不溶物，濃縮，濃縮液加入二氯甲烷，放置結(jié)晶，重復(fù)結(jié)晶1?3次，減壓干燥即得7-O-乙基莫諾苷。

作為優(yōu)選方案，以上所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，山茱萸環(huán)烯醚萜總苷是以山茱萸為原料，采用水提取方法制備得到山茱萸環(huán)烯醚萜總苷。作為優(yōu)選方案，山茱萸環(huán)烯醚萜總苷中含有重量百分比20?40%莫諾苷和重量百分比10?20%馬錢苷。

作為更加優(yōu)選方案，所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，山茱萸環(huán)烯醚萜總苷中含有重量百分比40%莫諾苷和重量百分比20%馬錢苷。

作為優(yōu)選方案，以上所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，步驟(1)中乙醇為無水醇；超聲頻率為20?60kHz，功率為30kW。本發(fā)明通過大量實驗篩選得到超聲溶解的超聲頻率和功率，可大大提高反應(yīng)物的溶解率，保證反應(yīng)轉(zhuǎn)化率。[0013]作為優(yōu)選方案，以上所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，步驟(2)中的pH值調(diào)節(jié)劑為磷酸、鹽酸、硫酸或硝酸中的一種。

本發(fā)明通過大量實驗篩選，調(diào)節(jié)反應(yīng)物pH值為1?3,可提高合成速率，提高反應(yīng)得率，可使7-O-乙基莫諾苷的轉(zhuǎn)化率在93%以上。

作為優(yōu)選方案，以上所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，步驟(3)中在80?100°C加熱回流提取16h，本發(fā)明通過大量實驗篩選不同的反應(yīng)溫度和反應(yīng)時間，對比實驗結(jié)果表明，在80?100°C加熱回流提取16h可以使7-O-乙基莫諾苷的合成率最高，雜質(zhì)少，得率高。

作為優(yōu)選方案，以上所述的7-O-乙基莫諾苷的制備方法，純化步驟，本發(fā)明通過大量實驗篩選不同的溶劑，實驗結(jié)果表明采用乙酸乙酯溶解，可以有效去除不溶物，并且采用優(yōu)選的二氯甲烷溶劑作為重結(jié)晶溶劑，可以得到純度98%以上的7-O-乙基莫諾苷。本發(fā)明不需要經(jīng)過柱層析復(fù)雜的純化步驟，純化速度更快，工作效率更高，成本低，更有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明通過體內(nèi)外抗炎實驗，結(jié)果表明7-O-乙基莫諾苷體內(nèi)和體外均具有很好的抗炎效果。

有益效果:本發(fā)明提供的7-O-乙基莫諾苷的制備方法和現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)占.本發(fā)明通過大量實驗篩選出的7-O-乙基莫諾苷制備工藝，包括溶解方法，調(diào)節(jié)優(yōu)選的pH值，加熱溫度，加熱時間反應(yīng)參數(shù)，并且優(yōu)選出的純化方法，整個反應(yīng)工藝設(shè)計合理，可操作性強，7-O-乙基莫諾苷合成率高，雜質(zhì)少，純度高，成本低，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明通過體內(nèi)外抗炎實驗篩選，首次證明7-O-乙基莫諾苷體內(nèi)和體外均具有很好的抗炎效果，可以用于制備成抗炎藥物。

具體實施方式

7-O-乙基莫諾苷的制備方法，包括以下步驟:

(1)溶解:稱取山茱萸環(huán)烯醚萜總苷(含有莫諾苷40%，馬錢苷20%)lkg，加入10L無水乙醇，常溫條件下攪拌使之分散均勻；

(2)調(diào)pH值:加入適量的稀磷酸調(diào)節(jié)pH=3;

(3)加熱反應(yīng):在80°C回流16h;過濾得提取液，濃縮得浸膏；

(4)純化、結(jié)晶:浸膏加入乙酸乙酯溶解，過濾出去不溶物，濾液濃縮至小體積，向濃縮液中加入二氯甲烷攪勻至有沉淀析出，放置結(jié)晶，結(jié)晶物再用乙酸乙酯溶解，加入二氯甲烷重結(jié)晶，過濾減壓干燥得化合物7-O-乙基莫諾苷產(chǎn)物365g，轉(zhuǎn)化率93%JS提示所得化合物分子量:434g/mol。