背景及概述^[1]

漢黃芩素有抗癌、抑菌、利尿、解痙、清熱、止痛等作用。漢黃芩素為黃芩提取物，黃芩為常用中藥，有清熱瀉火、解毒、止血、安胎等作用，其有效成分為黃酮類(lèi)。目前從黃芩中提取并鑒定出結(jié)構(gòu)的黃酮類(lèi)成分已有十幾種，主要包括黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、千層紙素等。

制備^[1-3]

報(bào)道一、

取黃芩藥材，粉碎過(guò)10目篩，加水浸泡4小時(shí)，濾過(guò)，藥渣加入15倍量的乙醇70℃提取2次，每次2小時(shí)，，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮成相對(duì)密度1.05～1.15(40℃測(cè))的濃縮液，將濃縮液置入大孔吸附樹(shù)脂分離柱中，采用濕法裝柱，用蒸餾水洗滌樹(shù)脂柱至水洗液呈無(wú)色，水洗液棄去，用95％乙醇以進(jìn)行洗脫，收集第二條黃色帶的洗脫液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.05～1.15(40℃測(cè))地濃縮液。然后采用高速逆流色譜分離濃縮液，在室溫下分別將系統(tǒng)1(正己烷-丙酮-乙醇-水＝6∶4∶4∶9)，系統(tǒng)2(正己烷-正丁醇-乙醇-水＝2∶6∶5∶5)置于兩個(gè)分液漏斗中振搖，放置，分別取上、下相，將上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相，將固定相泵入色譜柱中，使柱中充滿(mǎn)固定相后，再讓儀器以800r/min轉(zhuǎn)動(dòng)，同時(shí)將流動(dòng)相以2.0ml/min的流速泵入。待流動(dòng)相從出液端流出且兩相在色譜中達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡后，將樣品溶液注入色譜系統(tǒng)中，同時(shí)在出液端接紫外檢測(cè)器。在274nm波長(zhǎng)處對(duì)流出液連續(xù)檢測(cè)，與漢黃芩素標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)應(yīng)，收集液蒸除溶劑，干燥，得樣品。

報(bào)道二、

取黃芩藥材20kg粉碎成粗粉，加水潤(rùn)濕，并于20～30℃保溫過(guò)夜，用乙醇回流提取三次。減壓回收乙醇至無(wú)乙醇蒸出，殘余物加入85％的乙醇，加熱使大部分溶解，過(guò)濾，濾液用柱層析用硅膠，以柱層析法進(jìn)行分離，用石油醚與氯仿1∶3洗脫，收取第二條黃色帶，即得漢黃芩素約100g，經(jīng)純度檢查，主要為漢黃芩素(含量大于90％)，還含有少量黃芩素、千層紙素和白楊素化合物(含量小于10％)。

報(bào)道三、

步驟1、同時(shí)提?。喝↑S芩飲片，加12質(zhì)量倍水加熱回流提取2h，提取液過(guò)濾，濾渣加10倍量水再提取2次，每次1.5h，合并濾液，獲得黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的混合粗提液。

步驟2、分離：將上步粗提液減壓濃縮至每1mL含0.2g生藥，以4BV/h的流速上樣D101大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為1BV，先以水洗脫至流出液無(wú)色，依次以10BV60%乙醇，6BV80%的乙醇分別洗脫，收集60%的乙醇洗脫液，主要成分為黃芩苷，收集80%的乙醇洗脫液，主要成分為黃芩素和漢黃芩素。將黃芩苷類(lèi)洗脫液濃縮成每mL含0.5g生藥，用2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，80℃保溫0.5h，靜置12h，減壓濾過(guò)，沉淀水洗至pH值至5.0，再用少量乙醇洗滌，揮盡乙醇，減壓干燥，即得黃芩苷，液相色譜面積歸一化法測(cè)得其純度為95%，以黃芩中所含黃芩苷計(jì)提取率為87%。將黃芩素、漢黃芩素的混合洗脫液蒸干，所得黃芩素、漢黃芩素的混合物以少量無(wú)水甲醇溶解，上sephadexLH-20凝膠柱，每mL凝膠上樣20~50mg混合物，上樣體積為凝膠柱體積的3~5%，以無(wú)水甲醇洗脫，待凝膠柱上黃色條帶下移至柱底端開(kāi)始分段接流分，每份10mL，視液相色譜結(jié)果合并流分，揮干溶劑，即得黃芩素、漢黃芩素純品，液相色譜面積歸一化法測(cè)得他們的純度分別為99%和97%，以黃芩中所含黃芩素計(jì)黃芩素提取率為88%，以黃芩中所含漢黃芩素計(jì)漢黃芩素的提取率為92%。

參考文獻(xiàn)

[1][中國(guó)發(fā)明]CN200710015979.X一種提取分離高純度漢黃芩素的制備工藝

[2][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN200310110337.X漢黃芩素的提取工藝、藥用組合物及制劑制備工藝

[3][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN201510086688.4一種從黃芩中同時(shí)提取黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的方法