背景[1-3]
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體，胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛，胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
應(yīng)用[4][5]
用于不同濃度胎牛血清對(duì)大鼠髓核間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性影響研究
研究大鼠髓核間充質(zhì)干細(xì)胞（NPMSC）體外培養(yǎng)的血清濃度并探討椎間盤(pán)退變的機(jī)制。
方法用膠原酶、胰酶序貫消化法從SD大鼠腰部和尾部的椎間盤(pán)組織中提取NPMSC，并進(jìn)行體外培養(yǎng)，將其傳代。（1）利用流式細(xì)胞儀對(duì)第3代傳代的NPMSC細(xì)胞表型CD29、CD34、CD24、CD90、CD105進(jìn)行鑒定；
（2）利用普通PCR鑒定體外培養(yǎng)的NPMSC細(xì)胞基因Sox2、Nanog的表達(dá)；
（3）在37℃、21%O2、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中用成骨、成軟骨、成脂培養(yǎng)液誘導(dǎo)培養(yǎng)第3代傳代NPMSC，24周以后，用染色劑對(duì)其進(jìn)行染色，觀察其成脂、成骨、成軟骨能力。
（4）在37℃、21%O2、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中用不同濃度（0%、5%、10%、20%、30%）的DMEM-F12血清培養(yǎng)液培養(yǎng)第3代傳代的NPMSC，72小時(shí)以后，利用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞的增殖，并采用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞蛋白多糖、Ⅱ型膠原、SOX9的mRNA表達(dá)，借助流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的檢測(cè)。
結(jié)果（1）大鼠NPMSC的成骨、成軟骨能力強(qiáng)，成脂能力較差，且其細(xì)胞表面高度表達(dá)CD29、CD90、CD105，低度表達(dá)CD24、CD34，細(xì)胞基因Sox2、Nanog高度表達(dá)。
（2）隨著培養(yǎng)液血清濃度增加，OD值增大，NPMSC的凋亡率降低，細(xì)胞蛋白多糖、Ⅱ型膠原、SOX9基因的mRNA表達(dá)增加。
參考文獻(xiàn)
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[2]Feasibility of a stem cell therapy for intervertebral disc degeneration[J].Satoshi Sobajima,Gianluca Vadala,Adam Shimer,Joseph S.Kim,Lars G.Gilbertson,James D.Kang.The Spine Journal.2008(6)
[3]Pathophysiology of the human intervertebral disc[J].Alessandra Colombini,Giovanni Lombardi,Massimiliano Marco Corsi,Giuseppe Banfi.International Journal of Biochemistry and Cell Biology.2008(5)
[4]Fas ligand expression on human nucleus pulposus cells decreases with disc degeneration processes[J].Shuichi Kaneyama,Kotaro Nishida,Toru Takada,Teppei Suzuki,Takatoshi Shimomura,Koichiro Maeno,Masahiro Kurosaka,Minoru Doita.Journal of Orthopaedic Science.2008(2)
[5]宋亮.不同濃度胎牛血清對(duì)大鼠髓核間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性影響[D].山西醫(yī)科大學(xué),2014.