背景[1-3]
小鼠抗GFAP單克隆抗體是以GFAP為抗原的小鼠單克隆抗體，可以特異性結(jié)合GFAP。小鼠抗GFAP單克隆抗體主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等GFAP檢測實驗。
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結(jié)合力。
GFAP是膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein）的英文簡稱，是星形膠質(zhì)細胞活化的標志物。膠質(zhì)纖維酸性蛋白。神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是一種Ⅲ型中間絲狀蛋白，以單體形式存在。
在人類當中發(fā)現(xiàn)有8種同源異構(gòu)體，相對分子質(zhì)量介于(40-53)×10^3。人類GFAP基因定位于17號染色體長臂2區(qū)1帶上，由9個外顯子和8個內(nèi)含子組成。
GFAP主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細胞，參與細胞骨架的構(gòu)成并維持其張力強度。其在軟骨細胞、成纖維細胞、肌上皮細胞、淋巴細胞、肝星形細胞也有表達。但外周系統(tǒng)所表達的GFAP不能被中樞神經(jīng)系統(tǒng)的GFAP單克隆抗體檢測出，提示兩個來源的GFAP可能在結(jié)構(gòu)上存在差異。GFAP或許對神經(jīng)系統(tǒng)有特異性。
GFAP見于神經(jīng)系統(tǒng)以外疾?。好庖呓M化研究發(fā)現(xiàn)：在正常乳腺和乳腺的良性病變組織中，有部分MEC表達GFAP。乳腺原位癌中殘存的MEC不表達GFAP。在乳腺原位癌和浸潤性癌中，各種癌細胞均不表達GFAP。在乳腺的各種良性病變中，部分EC和間質(zhì)的肌纖維母細胞可表達GFAP。但在乳腺癌的間質(zhì)中，即使間質(zhì)纖維化很嚴重，肌纖維母細胞也不表達GFAP，而表達SMA。
應用[4][5]
用于小鼠抑郁癥模型建立及干預、行為學和海馬GFAP變化研究
建立小鼠抑郁癥模型,研究其行為學變化,了解其大腦中GFAP(glial fibrillary acidic protein)的變化,并給予藥物干預,探索抑郁癥模型是否與覓食行為有關(guān),以及覓食行為是否與GFAP相關(guān),和覓食行為所涉及的機制,為抑郁癥的臨床治療及深入的基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。
方法1.建立小鼠抑郁癥模型：根據(jù)Molina的方法并加以改進,即慢性輕度不可預見性應激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型,評價其有效性。在覓食行為試驗中,抑郁癥模型的覓食量改變。
2. 檢測GFAP:利用Western blot和RT-PCR的方法檢測抑郁模型海馬和皮層內(nèi)GFAP的表達。免疫組化檢測GFAP在海馬中各區(qū)域的表達。
3. 藥物干預：建立小鼠抑郁癥模型,隨機將其分為三組,分別給予腹腔注射不同的藥物干預14d后,觀察其行為學和GFAP表達量的改變,探討抑郁癥的發(fā)生機制。
結(jié)果1.在行為學實驗中CUMS抑郁癥模型小鼠行為學指標與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。在覓食實驗中,模型組覓食活動與對照組相比顯著減少差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
2.GFAP蛋白和mRNA表達水平,GFAP在模型組小鼠海馬中的表達與對照組相比減少差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),在模型組小鼠皮層中沒有變化。
參考文獻
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[5]楊春蕊.小鼠抑郁癥模型建立及干預、行為學和海馬GFAP變化研究[D].昆明醫(yī)科大學,2013.