背景[1-3]
兔多克隆抗體TO BAX是一類可以特異性結(jié)合BAX的多克隆抗體，主要用于檢測BAX的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標(biāo)本中BAX水平。用純化的BAX抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入BAX，再與HRP標(biāo)記的BAX抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的BAX呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中BAX濃度。
bax基因是人體最主要的凋亡基因，屬于bcl-2基因家族，編碼的Bax蛋白可與Bcl-2形成異二聚體，對Bcl-2產(chǎn)生阻抑作用。研究發(fā)現(xiàn)Bax/Bcl-2兩蛋白之間的比例關(guān)系是決定對細胞凋亡(Apoptosis)抑制作用強弱的關(guān)鍵因素，因此認為，bax是極重要的促細胞凋亡(Apoptosis)基因之一。Bax的表達更為廣泛，它可出現(xiàn)在肝細胞、腎小管上皮細胞、呼吸系上皮細胞和支氣管平滑肌、血管平滑肌細胞中。
BAX屬于兔抗人多克隆抗體。試驗中適用組織為石蠟切片，其陽性部位為細胞漿，陽性對照為乳腺癌，組織處理為熱修復(fù)。BAX是與BCL-2同源的水溶性相關(guān)蛋白，是BCL-2基因家族中細胞凋亡促進基因，BAX的過度表達可拮抗BCL-2的保護效應(yīng)而使細胞趨于死亡。目前多和BCL-2一起用于腫瘤的研究。
應(yīng)用[4][5]
用于中藥活骨注射液在兔股骨頭缺血性壞死修復(fù)過程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表達情況的實驗研究
通過動物實驗的方法,從細胞分子水平,研究中藥活骨注射液對VEGF、bFGF、IGF-1、OPG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3表達的影響,探討活骨注射液治療股骨頭缺血性壞死的作用機制,為活骨注射液治療股骨頭缺血性壞死提供理論依據(jù)。
研究方法：隨機分為兩組,即空白組(30只)、模型組(90只)。模型組行兔股骨頭壞死動物造模后再隨機分為3組：鹽水組、對照組、實驗組各30只動物?？瞻捉M正常飼養(yǎng),不給予任何藥物治療。鹽水組給予0.9%生理鹽水0.70ml/次,每三日一次髖關(guān)節(jié)腔灌注。
對照組給予冠心寧注射液每三日一次髖關(guān)節(jié)灌注0.70ml/次。實驗組給予活骨注射液每三日一次髖關(guān)節(jié)灌注,劑量0.70ml/次。造模術(shù)后兩周開始治療,各組按1、3、6、9、12周時間點分批處死動物,每批每組6只,進行檢測。
采用免疫組化、Real-time PCR及Western blot三種方法檢測兔股骨頭缺血性壞死修復(fù)過程中VEGF、bFGF、IGF-1蛋白的表達情況。
參考文獻
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[4]Differential Regulation of Telomerase in Endothelial Cells by Fibroblast Growth Factor‐2 and Vascular Endothelial Growth Factor‐A:Association with Replicative Life Span[J].ELISABETHTRIVIER,DAVID J.KURZ,YINGHONG,HSIU‐LINHUANG,JORGE D.ERUSALIMSKY.Annals of the New York Academy of Sciences.2006(1)
[5]張文進.中藥活骨注射液在兔股骨頭缺血性壞死修復(fù)過程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表達情況的實驗研究[D].黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2016.