背景[1-3]
JNK123抗體是一類可以特異性結(jié)合JNK123的多克隆抗體，主要用于檢測(cè)JNK123的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中JNK123水平。用純化的JNK123抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入JNK123，再與HRP標(biāo)記的JNK123抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的JNK123呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中JNK123濃度。
C-Jun N末端激酶（JNK）也稱為絲裂原激活的蛋白激酶（MAPK8）。它屬于應(yīng)激激活蛋白激酶的MAPK超家族。MAPK是絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，可響應(yīng)多種細(xì)胞外刺激而被激活，并介導(dǎo)從細(xì)胞表面到細(xì)胞核的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。JNK參與多種細(xì)胞過(guò)程，例如增殖，分化，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和發(fā)育。JNK途徑受壓力和炎癥信號(hào)的刺激。由于差異的mRNA剪接，JNK被表達(dá)為十種不同的亞型。主要形式為JNK1和JNK2。
JNK123能夠使c-Jun(一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，屬亮氨酸拉鏈家族成員)氨基末端活性區(qū)Ser63和Ser73發(fā)生磷酸化的蛋白激酶。是促分裂原活化的蛋白激酶超家族中的一個(gè)家族，包括JNK1、JNK2、JNK3，當(dāng)其活化模體Thr-Pro-Tyr內(nèi)的Thr、Tyr被JNKK1、JNKK2磷酸化后而激活，活化酶可磷酸化c-Jun等多種蛋白質(zhì)，從而影響細(xì)胞凋亡、炎癥和腫瘤的發(fā)生。
應(yīng)用[4][5]
用于谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達(dá)可抑制大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43重構(gòu)研究
谷氨酰胺（glutamine，Gln）誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達(dá)對(duì)鹽酸異丙基腎上腺素（isoprenaline hydrochloride,ISOprenaline）所致的大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43（connexin43，Cx43）重構(gòu)的影響及其機(jī)制。并與纈沙坦（valsartan）在抑制大鼠心房纖維化和縫隙連接蛋白43（Cx43）重構(gòu)中的作用進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)谷氨酰胺的應(yīng)用價(jià)值。
方法：該實(shí)驗(yàn)共分為兩部分，具體實(shí)驗(yàn)方法如下：部分實(shí)驗(yàn)方法:40只SPF級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量（180±20）g，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)等分為對(duì)照組、二甲基亞砜（DMSO）組（DMSO組）、鹽酸異丙腎上腺素（isoprenaline，ISO）5mg kg-1 d-1組（模型組）、ISO5mg kg-1 d-1+丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）0.75mg kg-1 d-1組（干預(yù)組）和ISO5mg kg-1 d-1+槲皮素（quercetin，QUE）100mg kg-1 d-1+Ala-Gln0.75mg kg-1 d-1+DMSO組（QUE組），每組8只大鼠。每組每天1次給予相應(yīng)試劑，7d后處死大鼠。免疫組化SP法半定量測(cè)定心肌組織中熱休克蛋白70（Hsp70）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2/3（p-JNK1/2/3）、c-Jun及Cx43蛋白的表達(dá)。
結(jié)果：DMSO組大鼠心房肌組織中AngⅡ含量與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而模型組、干預(yù)組和QUE組則均顯著高于對(duì)照組（P均<0.01）。
參考文獻(xiàn)
[1]Protein folding rates and thermodynamic stability are key determinants for interaction with the Hsp70 chaperone system[J].Ashok Sekhar,Hon Nam Lam,Silvia Cavagnero.Protein Science.2012(10)
[2]Interactions between atrial electrical remodeling and autonomic remodeling:How to break the vicious cycle[J].Lilei Yu,Benjamin J.Scherlag,Yong Sha,Shaolong Li,Tushar Sharma,Hiroshi Nakagawa,Warren M.Jackman,Ralph Lazzara,Hong Jiang,Sunny S.Po.Heart Rhythm.2012(5)
[3]PPAR‐γActivator Pioglitazone Prevents Age‐Related Atrial Fibrillation Susceptibility by Improving Antioxidant Capacity and Reducing Apoptosis in a Rat Model[J].DONGZHUXU,NOBUYUKIMURAKOSHI,MIYAKOIGARASHI,AKIHIRAYAMA,YOKOITO,YOSHIHIROSEO,HIROSHITADA,KAZUTAKAAONUMA.Journal of Cardiovascular Electrophysiology.2012(2)
[4]Recent Clinical and Experimental Advances in Atrial Fibrillation[J].Shigeru Miyagawa,Taichi Sakaguchi,Hiroyuki Nishi,Yasushi Yoshikawa,Satsuki Fukushima,Shunsuke Saito,Yoshiki Sawa,C.Hassager,D.Leung,A.D.Szekely.ISRN Cardiology.2011
[5]鮑宏剛.谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達(dá)可抑制大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43重構(gòu)[D].第四軍醫(yī)大學(xué),2013.