背景[1-3]
內(nèi)皮素-1(抗體)是可以特異性結(jié)合內(nèi)皮素-1的一類多克隆抗體，主要用于檢測內(nèi)皮素-1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中內(nèi)皮素-1水平。用純化的內(nèi)皮素-1抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素-1，再與HRP標記的內(nèi)皮素-1抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素-1呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中內(nèi)皮素-1濃度。
內(nèi)皮素（endothelin，ET）不僅存在于血管內(nèi)皮，也廣泛存在于各種組織和細胞中，是調(diào)節(jié)心血管功能的重要因子，對維持基礎(chǔ)血管張力與心血管系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)起重要作用。它是由21個氨基酸組成的多肽，分子量為2400D，N端是兩個二硫鍵將1-15，3-11位置的半胱氨酸連接起來，C端是一些疏水性氨基酸的殘基。N端結(jié)構(gòu)決定其與受體的親和力，C端結(jié)構(gòu)決定其與受體的結(jié)合位置。ET-1另有兩個同分異構(gòu)體家族即ET-2，ET-3，其差別在于個別氨基酸的殘基，對于心血管起主要作用的是ET-1。
內(nèi)皮細胞受到刺激合成并釋放ET-1，其調(diào)控主要在基因轉(zhuǎn)錄水平，刺激ET-1合成的因素包括：腎上腺素、血栓素、血管加壓素、血管緊張素、胰島素、細胞因子以及血管壁剪切力與壓力的變化及缺氧等物理化因素，刺激ET-1合成的過程需要有Ca2+（依賴型蛋白激酶C（PKC）的參與。抑制ET-1合成的因素有：NO，PGI2，心房利鈉肽及肝素等。ET-1在血漿中的半衰期很短（<5min），很快與組織上的受體結(jié)合，其清除部位主要在肺與腎臟，ET降解酶很快將其分解。
應用[4][5]
用于內(nèi)脂素對人臍靜脈內(nèi)皮細胞內(nèi)皮素-1表達的影響及機制研究
脂素,也稱為前B細胞克隆增強因子,是最近發(fā)現(xiàn)的一種新的脂肪因子,主要由內(nèi)臟脂肪組織產(chǎn)生,具有類胰島素活性,與肥胖及肥胖相關(guān)性疾病有關(guān)。
內(nèi)脂素也是一種新的促炎癥細胞因子,劑量依賴性上調(diào)人單核細胞IL-1β、IL-6和TNF-α表達,各種炎癥性疾病血漿內(nèi)脂素水平增高。
此外,內(nèi)脂素還是一種新的血管炎癥介質(zhì),可提高THP-1單核細胞MMP-9活性和外周血單核細胞TNF-α和IL-8水平,誘導內(nèi)皮細胞分泌ICAM-1和VCAM-1,增強內(nèi)皮細胞MMP-2和-9的活性。
在動脈粥樣硬化形成和發(fā)展的過程中內(nèi)脂素可能起了一定的作用,有癥狀患者的頸動脈斑塊較無癥狀患者的頸動脈斑塊的內(nèi)脂素基因表達顯著增強;冠心病患者,特別是急性冠脈綜合征患者血漿內(nèi)脂素水平顯著增高。
內(nèi)脂素定位于不穩(wěn)定斑塊富含脂質(zhì)的泡沫巨噬細胞,可能在斑塊不穩(wěn)定過程中發(fā)揮重要作用。ET-1是內(nèi)皮細胞分泌的迄今已知的作用最強的血管收縮肽,能夠收縮血管,促進炎癥反應,促有絲分裂和增殖,刺激自由基生成和激活血小板。內(nèi)皮素(ET)-1與高血壓、高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、糖尿病和冠心病等多種心血管疾病的內(nèi)皮功能障礙有關(guān)。
血管內(nèi)皮損傷刺激ET-1表達,觸發(fā)內(nèi)皮黏附、血管平滑肌細胞增殖,最終導致動脈粥樣硬化形成。而內(nèi)皮功能障礙是動脈粥樣硬化和血管疾病發(fā)病的初期階段,是心血管事件的獨立預測因子。經(jīng)典觀點認為,內(nèi)皮來源的舒張因子NO、前列環(huán)素和內(nèi)皮依賴性超極化因子的生物利用度降低,引起血管舒張功能受損,導致內(nèi)皮功能障礙。
參考文獻
[1]Effects of Systemic Simvastatin on the Concentrations of Visfatin,Tumor Necrosis Factor-α,and Interleukin-6 in Gingival Crevicular Fluid in Patients with Type 2 Diabetes and Chronic Periodontitis[J].Maha A.Bahammam,Mai S.Attia,Cinzia Ciccacci.Journal of Immunology Research.2018
[2]Adipokines in neurovascular diseases[J].Radka Opatrilova,Martin Caprnda,Peter Kubatka,Vanda Valentova,Sona Uramova,Vladimir Nosal,Ludovit Gaspar,Lukas Zachar,Ioana Mozos,Daniel Petrovic,Jozef Dragasek,Slavomira Filipova,Dietrich Büsselberg,Anthony Zulli,Luis Rodrigo,Peter Kruzliak,Vladimir Krasnik.Biomedicine&Pharmacotherapy.2018
[3]The role of Visfatin in atherosclerotic peripheral arterial obstructive disease[J].Matthaios G.Pitoulias,Lemonia Skoura,Apostolos G.Pitoulias,Dimitris Chatzidimitriou,Apostolia Margariti,Minas Arsenakis,Georgios A.Pitoulias.Cytokine.2017
[4]Serum Alkaline Phosphatase Negatively Affects Endothelium-Dependent Vasodilation in Na?ve Hypertensive Patients[J].Francesco Perticone,Maria Perticone,Raffaele Maio,Angela Sciacqua,Michele Andreucci,Giovanni Tripepi,Salvatore Corrao,Francesca Mallamaci,Giorgio Sesti,Carmine Zoccali.Hypertension.2015(4)
[5]李杰.內(nèi)脂素對人臍靜脈內(nèi)皮細胞內(nèi)皮素-1表達的影響及機制研究[D].中國醫(yī)科大學,2018.