背景[1-3]
內(nèi)皮素-1(抗體)是可以特異性結(jié)合內(nèi)皮素-1的一類(lèi)多克隆抗體，主要用于檢測(cè)內(nèi)皮素-1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中內(nèi)皮素-1水平。用純化的內(nèi)皮素-1抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素-1，再與HRP標(biāo)記的內(nèi)皮素-1抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素-1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中內(nèi)皮素-1濃度。
內(nèi)皮素（endothelin，ET）不僅存在于血管內(nèi)皮，也廣泛存在于各種組織和細(xì)胞中，是調(diào)節(jié)心血管功能的重要因子，對(duì)維持基礎(chǔ)血管張力與心血管系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)起重要作用。它是由21個(gè)氨基酸組成的多肽，分子量為2400D，N端是兩個(gè)二硫鍵將1-15，3-11位置的半胱氨酸連接起來(lái)，C端是一些疏水性氨基酸的殘基。N端結(jié)構(gòu)決定其與受體的親和力，C端結(jié)構(gòu)決定其與受體的結(jié)合位置。ET-1另有兩個(gè)同分異構(gòu)體家族即ET-2，ET-3，其差別在于個(gè)別氨基酸的殘基，對(duì)于心血管起主要作用的是ET-1。
內(nèi)皮細(xì)胞受到刺激合成并釋放ET-1，其調(diào)控主要在基因轉(zhuǎn)錄水平，刺激ET-1合成的因素包括：腎上腺素、血栓素、血管加壓素、血管緊張素、胰島素、細(xì)胞因子以及血管壁剪切力與壓力的變化及缺氧等物理化因素，刺激ET-1合成的過(guò)程需要有Ca2+（依賴(lài)型蛋白激酶C（PKC）的參與。抑制ET-1合成的因素有：NO，PGI2，心房利鈉肽及肝素等。ET-1在血漿中的半衰期很短（<5min），很快與組織上的受體結(jié)合，其清除部位主要在肺與腎臟，ET降解酶很快將其分解。
應(yīng)用[4][5]
用于內(nèi)脂素對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮素-1表達(dá)的影響及機(jī)制研究
脂素,也稱(chēng)為前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子,是最近發(fā)現(xiàn)的一種新的脂肪因子,主要由內(nèi)臟脂肪組織產(chǎn)生,具有類(lèi)胰島素活性,與肥胖及肥胖相關(guān)性疾病有關(guān)。
內(nèi)脂素也是一種新的促炎癥細(xì)胞因子,劑量依賴(lài)性上調(diào)人單核細(xì)胞IL-1β、IL-6和TNF-α表達(dá),各種炎癥性疾病血漿內(nèi)脂素水平增高。
此外,內(nèi)脂素還是一種新的血管炎癥介質(zhì),可提高THP-1單核細(xì)胞MMP-9活性和外周血單核細(xì)胞TNF-α和IL-8水平,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分泌ICAM-1和VCAM-1,增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞MMP-2和-9的活性。
在動(dòng)脈粥樣硬化形成和發(fā)展的過(guò)程中內(nèi)脂素可能起了一定的作用,有癥狀患者的頸動(dòng)脈斑塊較無(wú)癥狀患者的頸動(dòng)脈斑塊的內(nèi)脂素基因表達(dá)顯著增強(qiáng);冠心病患者,特別是急性冠脈綜合征患者血漿內(nèi)脂素水平顯著增高。
內(nèi)脂素定位于不穩(wěn)定斑塊富含脂質(zhì)的泡沫巨噬細(xì)胞,可能在斑塊不穩(wěn)定過(guò)程中發(fā)揮重要作用。ET-1是內(nèi)皮細(xì)胞分泌的迄今已知的作用最強(qiáng)的血管收縮肽,能夠收縮血管,促進(jìn)炎癥反應(yīng),促有絲分裂和增殖,刺激自由基生成和激活血小板。內(nèi)皮素(ET)-1與高血壓、高膽固醇血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病和冠心病等多種心血管疾病的內(nèi)皮功能障礙有關(guān)。
血管內(nèi)皮損傷刺激ET-1表達(dá),觸發(fā)內(nèi)皮黏附、血管平滑肌細(xì)胞增殖,最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化形成。而內(nèi)皮功能障礙是動(dòng)脈粥樣硬化和血管疾病發(fā)病的初期階段,是心血管事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。經(jīng)典觀點(diǎn)認(rèn)為,內(nèi)皮來(lái)源的舒張因子NO、前列環(huán)素和內(nèi)皮依賴(lài)性超極化因子的生物利用度降低,引起血管舒張功能受損,導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙。
參考文獻(xiàn)
[1]Effects of Systemic Simvastatin on the Concentrations of Visfatin,Tumor Necrosis Factor-α,and Interleukin-6 in Gingival Crevicular Fluid in Patients with Type 2 Diabetes and Chronic Periodontitis[J].Maha A.Bahammam,Mai S.Attia,Cinzia Ciccacci.Journal of Immunology Research.2018
[2]Adipokines in neurovascular diseases[J].Radka Opatrilova,Martin Caprnda,Peter Kubatka,Vanda Valentova,Sona Uramova,Vladimir Nosal,Ludovit Gaspar,Lukas Zachar,Ioana Mozos,Daniel Petrovic,Jozef Dragasek,Slavomira Filipova,Dietrich Büsselberg,Anthony Zulli,Luis Rodrigo,Peter Kruzliak,Vladimir Krasnik.Biomedicine&Pharmacotherapy.2018
[3]The role of Visfatin in atherosclerotic peripheral arterial obstructive disease[J].Matthaios G.Pitoulias,Lemonia Skoura,Apostolos G.Pitoulias,Dimitris Chatzidimitriou,Apostolia Margariti,Minas Arsenakis,Georgios A.Pitoulias.Cytokine.2017
[4]Serum Alkaline Phosphatase Negatively Affects Endothelium-Dependent Vasodilation in Na?ve Hypertensive Patients[J].Francesco Perticone,Maria Perticone,Raffaele Maio,Angela Sciacqua,Michele Andreucci,Giovanni Tripepi,Salvatore Corrao,Francesca Mallamaci,Giorgio Sesti,Carmine Zoccali.Hypertension.2015(4)
[5]李杰.內(nèi)脂素對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮素-1表達(dá)的影響及機(jī)制研究[D].中國(guó)醫(yī)科大學(xué),2018.