概述^[1]

試劑盒是一種將測(cè)定一種成分所需要的2種或2種以上的試劑及實(shí)驗(yàn)室一般用品連同操作說(shuō)明書(shū)包裝在一起，形成商品化的試劑單位，即由廠家提供給用戶使用的一種套裝試劑，使用者除用自備的蒸餾水或試劑盒提供的緩沖液進(jìn)行復(fù)溶試劑的操作外不需要作任何試劑配制。目前檢測(cè)試劑已廣泛采用這一方式提供，kit的應(yīng)用不但節(jié)約人力減少配制誤差，而且有利于試劑質(zhì)量的保證和實(shí)驗(yàn)室間方法學(xué)的統(tǒng)一，提高了可比性。

細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒用于細(xì)菌基因組DNA的小量提取。其純化原理是利用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞釋放基因組DNA，由硅膠膜柱可逆吸附基因組DNA，經(jīng)蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)后，用純化液洗脫獲得基因組DNA。本產(chǎn)品可從0.5-2ml對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌液（不超過(guò)10⁶–10⁸個(gè)）中提取到3-20μg超純基因組DNA（OD260/280=1.7-1.9），此基因組DNA可直接用于酶切、PCR等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)^[2]

高效：細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒一次可獲得3-20μg基因組DNA。

快速：30min內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA。

安全：整個(gè)操作中不用酚/氯仿有機(jī)物。

高純度：無(wú)須再純化即可直接用于下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品用途^[2]

常規(guī)限制性酶切；PCR擴(kuò)增；Southern雜交；分子標(biāo)記分析。細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒純化的基因組DNA質(zhì)量通過(guò)限制性酶切和單拷基因的PCR擴(kuò)增鑒定。

注意事項(xiàng)^[2]

1應(yīng)盡量使用新鮮的菌體，確保提取的基因組DNA不被降解。

2在操作步驟4中，菌體應(yīng)充分懸浮，不要?dú)埩艟鷫K，避免影響溶菌效果。

3在操作步驟5種，加入無(wú)水乙醇后，可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，應(yīng)將離心管內(nèi)的溶液及絮狀沉淀轉(zhuǎn)移到純化柱中，確?；蚪MDNA的得率。

4基因組DNA需長(zhǎng)期保存時(shí)，建議使用純化液TE。分裝后保存于-20℃或-80℃。

5基因組DNA濃度及純度與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)。

基因組DNA的濃度及純度檢測(cè)^[2]

1基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)?；厥盏玫降腄NA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。

2 DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。

3 OD260/280比值應(yīng)為1.7–1.9，如果洗脫時(shí)不使用純化液TE，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。

主要參考資料

[1] 協(xié)和醫(yī)學(xué)詞典

[2] 細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒