背景及概述^[1]

瓊脂糖凝膠2B為乳白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。瓊脂糖凝膠2B是用2%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒，作為凝膠層析介質(zhì)使用。

理化指標(biāo)^[1]

應(yīng)用^[1]

本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖介質(zhì)，非特異性吸附低，回收率高，可多次重復(fù)使用等特點，用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程。

1裝柱

凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。

（1）讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

（2）選擇一根一定直徑的柱子，長約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的1.15倍），清洗掉20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。不要劇烈攪動，以免攪壞微球。

（3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。

（4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動泵，讓緩沖液緩慢流過，使柱床穩(wěn)定。

（6）用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。

2平衡

讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。

3上樣

（1）樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的，分子量大的先流出來。

（3）上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好。

4洗脫

用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5再生

一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。

6注意

在裝柱、使用和保存柱子的時候，始終要避免柱子流干氣泡進入。

主要參考資料

[1]瓊脂糖凝膠2B使用說明